Human Fibronectin

La fibronectina (FN) es una glucoproteína multifuncional, cuyo gen está localizado en el cromosoma 2q34-36 humano. Este gen abarca 75 kb y contiene 50 exones. La estructura de la fibronectina consiste en bloques de secuencias peptídicas repetidas que son homólogas en naturaleza y forman una unidad funcional ordenada linealmente en dos brazos de subunidad. Existe como dos isoformas principales, una soluble y una insoluble. La primera está presente en el plasma, mientras que la forma insoluble reside en los tejidos y en la matriz extracelular (MEC) del cartílago. Hay alrededor de 20 formas diferentes de la proteína fibronectina debido a los cortes y empalmes alternativos de una región variable y dos exones de tipo III denominados dominios extra A y B.

La fibronectina del plasma humano se utiliza para las siguientes aplicaciones:

• Se utiliza en la siembra celular y la diferenciación neuronal [como uno de los componentes del medio de expansión para la resuspensión de las CBSC (células madre sanguíneas del cordón umbilical) y también en el medio de diferenciación]
• Se utiliza en cultivo celular (la cámara de cultivo se recubrió con fibronectina para la expresión de las células HEK293)
• Ensayos de extracción de fibronectina (FN) in-vitro
• Especificidad de proteínas
• Utilizada en estudios de migración celular

La fibronectina (FN) desempeña un papel esencial en múltiples funciones biológicas, como la angiogénesis, la migración celular, la adhesión célula a célula, la fijación de célula a membrana basal, la estabilización del coágulo, la embriogénesis, la diferenciación, la cicatrización de heridas, así como la unión de patógenos a las células de mamífero y a la matriz extracelular. Estudios llevados a cabo en la población Han china demuestran que mutaciones en este gen podrían estar vinculadas a sensibilidad a la artrosis de rodilla (AR). La variante de empalme del dominio B extra (EDB) de la FN es un signo patognomónico en la angiogénesis tumoral. Además, con el aumento de rigidez de la matriz se produce un aumento en la producción de esta isoforma en las células endoteliales. En el cáncer colorrectal (CRC), el EDA se relaciona con metástasis, vasculogénesis y tumorigénesis, y promueve la transición epitelial-mesenquimatosa.

Este producto se liofiliza a partir de disolución salina tamponada con Tris 0,05 M a pH 7,5. Es soluble a 1 mg/ml en agua, y debe dejarse disolver durante al menos 30 minutos a 37°C. Puede quedar una pequeña cantidad de material no disuelto, pero no afectará al rendimiento. La homogeneidad de la proteína se evalúa mediante inmunoelectroforesis, se analiza la presencia de endotoxinas y se ha demostrado que el material original era negativo para el VIH, la hepatitis B, la hepatitis C Y LA SÍF. En el recubrimiento de las superficies de cultivo, la fibronectina debe diluirse en disolución salina estéril equilibrada y recubrirse con un volumen mínimo. Luego hay que dejar secar la superficie al aire durante 45 minutos a temperatura ambiente y puede conservarse durante 2-4 semanas a 2-8°C

La disolución reconstituida debe conservarse en alícuotas de trabajo a -20°C o menos. No se recomienda agitar en vórtex ni en exceso, ni ciclos añadidos de congelación y descongelación de la fibronectina reconstituida.

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