Nucleasa P₁ from Penicillium citrinum

Se ha probado la actividad fosfodiesterasa 3′- y 5′ y la actividad nucleotidasa 3′- en nuestra nucleasa P1 de gran actividad, y es la nucleasa P1 más activa del mercado.

Glucoproteína dependiente del zinc que consta de 270 restos de aminoácidos. Masa molecular: 42 - 50 kDa.

La nucleasa P1 es una de las nucleasas específicas de una sola cadena más conocidas en biología molecular; la nucleasa P1 es una endonucleasa específica de una sola cadena (de ssDNA o ssRNA). La nucleasa P1 también puede romper regiones monocatenarias en ácidos nucleicos bicatenarios.
La nucleasa P1 de Penicillium citrinum es una endonucleasa dependiente de zinc que muestra una mayor actividad en presencia de bajas concentraciones de urea. La actividad selectiva de la nucleasa P1 ha encontrado aplicaciones útiles en estudios sobre la estructura de ácidos nucleicos.

• La nucleasa P1 escinden el ADN o el ARN monocatenarios en 5′ mononucleótidos
• La nucleasa P1 respalda la investigación de daños y modificaciones en el ADN
• La composición de bases de los ácidos nucleicos y el análisis estructural puede realizarlos la nucleasa P1
• La nucleasa P1 se ha utilizado históricamente para la producción industrial de 5′mononucleótidos a partir del ARN de la levadura.
• La eliminación de ácidos nucleicos a través de la purificación de proteínas puede hacerla la nucleasa P1
• La nucleasa P1 es un reactivo clave para el desarrollo de métodos para estudiar la biosíntesis de aminoácidos dependiente del t-ARN y la transamidación dependiente del t-RNA
• La nucleasa P1 de Penicillium citrinum se ha utilizado en un estudio para evaluar las estructuras de cristal utilizando sulfato de amonio o polietilenglicol 4000 como precipitante.
• La nucleasa P1 se utilizó en un estudio para investigar un método para el análisis de secuencia directa de 20-25 nucleótidos de los extremos 3′ o 5′ del ARN marcado en el grupo final.
• La nucleasa P1 se utiliza para mejorar la sensibilidad de un método de marcaje con 32P para la detección de aductos de ADN.

La enzima tiene una temperatura óptima de aproximadamente 70°C, pero para una incubación larga, es más adecuada una temperatura por debajo de 60°C. Es estable en el intervalo de pH de 5 - 8.

La enzima tiene una temperatura óptima de aproximadamente 70 °C, pero para una incubación larga, es más adecuada una temperatura por debajo de 60 °C. Es estable en el intervalo de pH de 5 - 8.

Cataliza la escisión endonucleolítica inespecífica del ADN y el ARN monocatenarios para producir 5′-fosfatos de nucleósidos y 5′-fosfooligonucleótidos. No degrada apreciablemente los ácidos nucleicos de doble cadena, especialmente en presencia de cloruro sódico superior a 400 mM a pH 6,0.

3′-5′-fosfodiesterasa: Una unidad liberará 1,0 μmol de nucleótidos solubles en ácido del ARN por min a pH de 5,3 a 37 °C.
3′-nucleotidasa: Una unidad hidrolizará 1,0 μmol de ortofosfato del 3′-AMP por min a pH de 7,2 a 37 °C.