DNAクローニング
DNAクローニングは、遺伝子工学の技術の一つであり、目的のDNA断片に対して大腸菌やPCRを用いて増幅や複製を行い、単離する方法です。基礎知識、基本的なプロトコル、製品選択ガイド、トラブルシューティングのヒント、そしてよくある質問への回答を提供しています。
大腸菌培養プロトコル
大腸菌の培養方法について詳しく説明した「大腸菌培養プロトコル」PDFを紹介しています。画線培養やシングルコロニーからの液体培養の手順、よく使う溶液の調製方法、LB培地やTB培地などの微生物用培地の作製方法、抗生物質溶液の調製方法、大腸菌の形質転換法など、大腸菌の培養に必要な基本的な技術を網羅しています。実験や研究にすぐに役立つ、実践的なプロトコルとなっています。
- 大腸菌培養プロトコル (PDF)
DNA、RNA基本プロトコル（プラスミド抽出、精製、電気泳動）
DNA・RNA の基本的なプロトコルを紹介するPDFファイルです。トリスバッファーやPBS、EDTA 溶液などの調製方法から、プラスミドの抽出・精製、フェノール抽出、アガロースゲル電気泳動などの基本的な実験手法が詳しく説明されています。
DNA Ligation プロトコル
ライゲーションとは、制限酵素で切断したDNA断片を連結する反応のことです。 分子生物学の実験で頻繁に使用される制限酵素処理とDNAライゲーションの手技を習得するのに役立つ情報が掲載されています。
- 制限酵素処理プロトコル（M-hub記事）
- DNAライゲーションプロトコル（M-hub記事）
Rapid DNA Ligation Kitのプロトコル
Rapid DNA Ligation Kitの使用方法と注意点を詳しく説明しています。キットにはライゲーションに必要な試薬がすべて含まれており、15~25℃で平滑末端または突出末端のDNAを連結できます。DNA濃度によって環状またはコンテカマのいずれかになります。ライゲーションDNAは形質転換実験に直接使用できます。
細菌形質転換プロトコル
化学的に処理された細菌コンペテントセルとエレクトロコンペテントセルを使った形質転換プロトコルについて説明しています。形質転換効率を最大化するためのヒントや、トラブルシューティングのアドバイスも記載されています。
コロニー選択のための青／白スクリーニングとそのプロトコル
青白コロニースクリーニングの原理と手順を詳しく説明しています。青白コロニースクリーニングは、β-ガラクトシダーゼ（lacZ）活性を利用して組換えに成功した大腸菌コロニーを同定する、迅速で効率的な手法です。lacZの一部が組み込まれておりいるベクターは、宿主細胞のlacZΔM15変異と相補的に機能しますが、DNAが組み替えられたベクターはlacZ活性を有しません。IPTGとX-galを用いて、組み換え大腸菌を白色コロニーとして確認できます。このページでは、必要な材料と具体的な手順が図解されています。