抗NeuN抗体、クローンA60

46/48 kDa

抗 NeuN 抗体（NEUronal Nuclei; クローン A60）は、テストされたすべての脊椎動物のほとんどの CNS および PNS ニューロン細胞型に存在する、DNA に結合するニューロン特異的タンパク質 NeuN を特異的に認識します。NeuN タンパク質の分布は一見して、胎児と成体のいずれの脳においても神経核、周核体および一部の近位神経突起に限られますが、次に示す一部のニューロンはすべての年齢において NeuN によって認識されません：INL 網膜細胞、カハール・レチウス細胞、プルキンエ細胞、下オリーブ核および歯状核ニューロン、および交感神経節細胞など（Mullen et al., 1992; Wolf et al., 1996）。免疫組織染色的に検出可能な NeuN タンパク質は、ニューロンの細胞周期からの離脱および/またはニューロンの末端分化の開始に相当する発達時点で初めて出現します（Mullen et al., 1992）。免疫活性は、E9.5 のあたりでマウス神経管に見られ、E12.5 までは神経系の発達全体を通して広範囲です。強い核染色は核調節タンパク質機能を示唆しますが、NeuN タンパク質抗原が遠位細胞質で機能しているのか、または核に戻る前にそこで合成されただけなのかに関するエビデンスは今のところありません。精製核から単離されたタンパク質と、イムノブロッティングでの全脳抽出物との間に違いは見られません（Mullen et al., 1992）。

マウス脳から精製された細胞核

ウェスタンブロッティング：
この抗体の前回のロットは、46～48 kDaの範囲に2～3個のバンドを認識し、おそらく別のバンドを約66 kDaに認識しました。

免疫細胞染色：
前回のロットの1:10-1:100希釈を使用しました。培養したニューロンは、0.1% triton X-100で透過処理してください。一次抗体の希釈はすべて、バッファーおよび一次抗体のみを含み、過剰なタンパク質阻害剤や洗浄剤を含まない単純な溶液を用いて行ってください。

免疫組織染色：
1:100-1:1,000。この抗体は、ポリエステルワックス包埋組織で最もよく機能しますが、低いワーキング希釈倍率では、パラフィン包埋組織でも機能します。この抗体は、ホルムアルデヒドをベースとした固定剤でよく機能します。クエン酸およびマイクロ波前処理は問題なく使用されています（Sarnat, 1998）。

免疫組織染色（パラフィン）：前回のロットをIH(P)で使用しました。

最適なワーキング希釈倍率は、お客様が決めてください。

抗NeuN抗体、クローンA60は、NeuNの濃度を検出します。 FC、IC、IF、IH、IH(P)、IP、WBでの使用が文献発表され、検証されています。

研究カテゴリー
ニューロサイエンス

研究サブカテゴリー
神経細胞・グリアマーカー

NeuN（または神経核）と呼ばれる、脊椎動物ニューロン特異的核タンパク質に対するMILLIPOREの独占的なモノクローナル抗体は、小脳、大脳皮質、海馬、視床、脊髄を含むマウスの神経系全体のほとんどの神経細胞型と反応し、また、後根神経節、交感神経鎖神経節および腸神経節を含む末梢神経系のニューロンと反応します。発生的には、ニューロンが有糸分裂後となった直後に免疫反応が最初に観察され、増殖帯には染色は観察されていません。免疫組織化学的染色は主にニューロンの核に局在し、細胞質の染色は軽度です。MAB377に反応しない数種類の細胞としては、プルキンエ細胞、僧帽細胞、光受容体細胞などがあります。この抗体は、初代培養およびレチノイン酸で刺激されたP19細胞におけるニューロンの優れたマーカーです。移植におけるニューロンの同定にも有用です。

0.02 Mリン酸バッファー、0.25 M NaCl、pH 7.6、0.1%アジ化ナトリウムを含むバッファー中の精製マウス免疫グロブリン IgG1液。

フォーマット：精製

プロテインA精製

2～8ºCで受領日から6か月間安定です。

コントロール
ポジティブコントロール - 脳組織。ネガティブコントロール - 線維芽細胞などのすべての非神経組織

脳組織の免疫組織染色で常に評価されています。

免疫組織染色（パラフィン）：
ラット小脳におけるNeuN（カタログ番号：MAB377）染色パターン／形態。クエン酸、pH 6.0で前処理した組織。このロットの抗体を1:100に希釈し、HRP-DABによるIHC-Select検出を用いました。 顆粒層のニューロンの核染色として免疫反応性が認められます。 プルキンエ細胞の核にはシグナルは検出されないことにご注意ください。
クエン酸バッファー、pH6.0を用いた最適染色、エピトープ修復：ラット小脳

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