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분자 클로닝 및 단백질 발현

이 그림은 발현 플라스미드에서 시작하여 표현형에 이르는 단백질 발현 과정을 설명하는 도표로, 핵 내 전사, 번역, 국소화 등의 단계를 거쳐 최종적으로 정제되는 과정을 포함하고 있습니다. 이 도식은 색상으로 구분되어 있으며, 분홍색은 전체 과정을 나타내고 노란색은 핵을 강조합니다. 여기에는 “발현 플라스미드”, “핵”, “전사”, “mRNA”, “번역”, “표현형”, “국소화”, “정제”와 같은 라벨이 포함되어 있습니다.

분자 클로닝의 목적은 관심 유전자(GOI)를 플라스미드 벡터에 삽입하는 데 있으며, 플라스미드 벡터는 클로닝, 클론 선별 및 단백질 발현을 용이하게 하는 다양한 요소를 포함하는 원형 DNA 조각입니다. 연구자들은 종종 DNA 제한 효소와 리가아제를 사용하여 후속 단백질 발현을 위해 GOI를 발현 벡터 내에 인프레임으로 삽입한다. 그런 다음 이 벡터를 GOI가 암호화한 단백질을 발현할 세포에 삽입하거나, 무세포 단백질 합성 시스템을 사용하여 단백질 발현을 수행한다.

단백질이 발현되면, 세포 신호 전달, 형태 또는 세포 내 다른 측면에 미치는 영향을 통해 단백질의 기능을 연구할 수 있습니다. 또는 단백질을 대량으로 발현하고 정제하여 다양한 후속 응용 분야에 활용할 수도 있습니다. 추가 정보가 필요하시면, 곤충, 박테리아 및 포유류 단백질 발현 시스템을 위한 클로닝 및 발현 워크플로우 전반에 걸쳐 제공되는 머크의 신뢰할 수 있는 시약 및 자원을 확인해 보십시오.

Products

RNA 및 DNA 변형 효소

분자 클로닝 과정에서 연구자들은 DNA를 절단하기 위해 제한 효소를, 핵산의 화학기를 추가·제거·변경하기 위해 RNA 및 DNA 변형 효소와 같은 다른 효소들을 자주 사용합니다. 다양한 연구 요구를 충족시키기 위해 머크는 알칼리성 포스파타제, 프로테아제, T7 RNA 중합효소, 피로포스파타제, 리보뉴클레아제 A, T4 DNA 리가아제 등 이러한 필수 효소들을 폭넓게 제공합니다. 머크의 시약은 특수하게 배합된 버퍼와 함께 사용함으로써 DNA 및 RNA 조작 과정에서 높은 효율과 신뢰성을 보장합니다.

Novagen^® pET 시스템, Simplicon^® 벡터 및 UCOE^® 단백질 발현 시스템

머크의 대장균, 곤충 및 포유류 발현 벡터는 양성 형질전환체의 선별 과정을 간소화합니다. 주요 제품으로는 다음이 있습니다:

Novagen^® pET 시스템은 박테리아 시스템에서 재조합 단백질을 클로닝하고 발현하는 데 있어 최고의 표준으로 인정받고 있습니다.
Simplicon^® 생체 내 단백질 발현 시스템은 게놈에 통합되지 않고, 조절 가능하며, 합성된 자가 복제 RNA 기반 발현 시스템을 제공합니다. Simplicon^® 발현 시스템은 게놈 통합의 위험 없이 형질전환된 인간 세포에서 다중 유전자의 즉각적이고 높은 수준의 지속적 단백질 발현을 유도합니다.
Ubiquitous Chromatin Opening Element(UCOE^®) 발현 벡터 기술은 안정적으로 형질전환된 포유류 세포에서 30일 이내에 그램 단위의 단백질을 생산합니다. UCOE^® 발현 기술은 형질전환 유전자의 침묵화를 방지하며, 염색체 통합 부위와 관계없이 기존 벡터보다 더 일관되고 안정적이며 높은 수준의 유전자 발현(최대 20배)을 제공합니다.

박테리아 및 효모 형질전환 시약

박테리아 형질전이는 열충격 및 전기천공법과 같은 방법을 사용하여 외래 DNA를 박테리아에 삽입하는 과정입니다. 머크의 형질전환 세포 포트폴리오는 까다로운 실험 조건에서도 최적의 플라스미드 및 단백질 발현을 위해 설계되었습니다. 주요 특징은 다음과 같습니다:

NovaBlue^® 형질전환 세포는 효율성과 플라스미드 보존성을 최적화하여, 우수한 라이브러리 제작 및 플라스미드 안정성을 지원합니다.
Rosetta™, Origami™, Overnight Express™ 시스템은 단백질의 올바른 접힘을 촉진하고 용해성을 높이거나 세포독성 단백질의 발현을 증가시킵니다.

효모 형질전환을 위해, 머크는 단백질 발현 워크플로우에 원활하게 통합되는 간편한 프로토콜과 확장 가능한 제품을 제공합니다.

포유류 세포 연구를 위한 추가 옵션은 머크의 '전사(Transfection)' 페이지를 확인해 주십시오.

BCCM/GeneCorner의 플라스미드 벡터

헨트 대학교(UGent) 과학부 생의학 분자생물학과에서 운영하는, ISO 인증을 받은 독보적인 플라스미드 저장소인 BCCM/GeneCorner의 확장된 플라스미드 벡터 제품군을 살펴보세요. 이 다양한 컬렉션에는 다양한 표적 유기체에 대한 다양한 클로닝 및 재조합 단백질 발현 플라스미드가 포함되어 있어, 분자 및 단백질 생물학 분야의 현대적인 연구를 지원합니다.

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