효소결합면역흡착법(ELISA) 키트

샌드위치, 다이렉트 및 경쟁 ELISA

머크의 ELISA는 혈청, 혈장, 세포 배양 상청액 또는 용해액 등 다양한 매트릭스 내의 용해성 단백질 바이오마커를 연구하기 위한 편리하고 사용하기 쉬운 방법입니다. 머크의 ELISA 제품군은 인간, 생쥐, 쥐 및 기타 다양한 동물 모델(농업용 및 반려동물)을 포함한 광범위한 종을 대상으로 하는 1,000종 이상의 연구용(Research Use Only) 분석법으로 구성되어 있습니다. 각 분석법에는 96웰 플레이트 실험을 수행하는 데 필요한 구체적인 프로토콜과 시약이 포함되어 있습니다. ELISA는 주로 96웰 형식으로 제공되며, 공급업체는 표적 단백질을 검출하고 정량화하는 데 필요한 시약을 제공합니다. ELISA에는 샌드위치, 직접, 경쟁법 등 다양한 방법이 있습니다.

샌드위치 분석법은 동일한 표적의 서로 다른 항원 결정기를 인식하는 한 쌍의 단일클론항체(mAb)를 사용합니다. 플레이트에 결합된 1차 mAb는 용액에서 단백질을 끌어내고, 2차 mAb는 "샌드위치" 구조를 완성하여 표적의 존재를 나타내는 신호를 제공합니다. 키트에는 정해진 양의 재조합 단백질이 포함되어 있어, 사용자가 표준 곡선을 작성할 수 있으며, 이를 기준으로 시료 중 하나에서 나온 신호를 해석하게 됩니다. 머크의 제품 포트폴리오 대부분은 이러한 샌드위치 ELISA 형식을 따릅니다.

직접 ELISA 및 경쟁 ELISA는 비교적 드문 방식입니다. 직접 ELISA는 단일 mAb를 사용하여 플레이트에 결합된 시료를 검출합니다. 이후 이 mAb에 리포터 2차 항체가 결합하여 신호를 제공합니다.

경쟁적 분석법에서는 알려진 양의 바이오마커가 미리 플레이트에 결합되어 있습니다. 표지된 항체를 시료와 함께 배양하면, 시료 내 표적의 농도에 따라 항체가 "흡수"됩니다. 이후 시료를 세척하여 제거하면, 남은 자유 항체가 플레이트상의 항원에 결합하여 신호를 발생시킵니다. 이 경우, 신호는 표적 바이오마커의 농도와 반비례합니다.

Conferma^® ELISA 및 Belysa^® 면역분석 곡선 피팅 소프트웨어

Conferma^® ELISA 브랜드는 분석 사용자들에게 주요 관심사인 핵심 시약 수준의 로트 간 변동성을 최소화하도록 설계된 샌드위치 분석법으로 구성됩니다. 상세한 품질 관리(QC) 프로토콜에 부합하는 다양한 분석 기법을 통해 핵심 시약의 개별 로트를 평가함으로써, 머크는 시간 경과에 따른 변동성을 제어하고 제한할 수 있습니다.

과학자들이 자신의 분석법의 재현성을 평가할 수 있도록, 머크는 Belysa^® 면역분석 곡선 피팅 소프트웨어를 추가로 개발했습니다. 이 도구를 사용하면 사용자는 샌드위치 면역분석 결과를 검토하여 %CV(변동계수) 및 %회수율과 같은 매개변수가 예상대로인지 확인할 수 있습니다. 그런 다음 여러 플레이트의 표준 곡선을 비교하여 해당 방법의 일관성을 확인할 수 있습니다.