Home 제품 단백질 생물학 항체 - 1차, 2차 및 재조합 단일 클론 항체2차 항체

2차 항체

Anti-von Wille 항체를 사용하여 염색한 말의 과다 육아조직(과다 육아조직).

2차 항체는 1차 항체나 Fc 또는 Fab 영역과 같은 항체 단편에 결합하는 다클론성 또는 단클론성 항체입니다. 이 항체들은 일반적으로 검출, 정제 또는 선별 용도에 유용하도록 표지되어 있습니다.

머크는 다양한 숙주 종에서 유래한 2차 항체를 제공합니다. 머크의 다클론성 2차 항체는 생쥐, 토끼, 염소, 양과 같은 숙주 동물의 혈청에서 생산됩니다. 반면, 머크의 단클론성 2차 항체는 생쥐 하이브리도마 클론에서 생산됩니다.

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머크의 '항체 탐색기(Antibody Explorer)' 검색 도구를 사용하여 클론성, 용도, 종, 반응성, 접합체, 숙주 종 및 형태별로 항체를 확인하고 비교해 보십시오.

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유사분열 중인 도롱뇽 폐 세포의 형광 현미경 사진. 단일클론 항-^ 항체로 염색된 미세소관.

2차 항체의 용도

2차 항체는 다음과 같은 다양한 용도로 사용됩니다:

면역 정제
ELISA
웨스턴 블롯
면역조직화학
세포 기반 분석
유세포 분석

마우스 항-뉴로필라멘트 H 항체와 CF568 염색된 염소 항-마우스 항체로 염색한 쥐 시신경의 냉동 절편 (신경 돌기, 적색), 토끼 항-GFAP 항체와 고도로 교차흡착된 CF488A 염색된 염소 항-토끼 항체로 염색한 것 (아교세포, 녹색). 핵은 RedDot2로 염색되어 있다 (청록색).

마우스 항-뉴로필라멘트 H 항체와 CF568 염색된 염소 항-마우스 항체로 염색한 쥐 시신경의 냉동 절편 (신경 돌기, 적색), 토끼 항-GFAP 항체와 고도로 교차흡착된 CF488A 염색된 염소 항-토끼 항체로 염색한 것 (교세포, 녹색). 핵은 RedDot2로 염색되어 있다 (청록색).

표지 항체 및 프로브

머크는 다양한 공액 항체 포트폴리오를 제공합니다. 공액 항체는 표지자와 결합된 단일클론 또는 다클론 항체로, 다양한 분석 기법에서 검출 용도로 사용됩니다. 2차 항체의 구체적인 용도는 결합된 프로브에 따라 달라집니다. 프로브는 다양한 검출 기술을 지원하는 분자입니다. 공액 2차 항체에 가장 일반적으로 사용되는 검출 시스템은 비색법 또는 형광법입니다.

비색 분석법은 일반적으로 알칼리성 인산분해효소(ALP)나 양고추냉이 과산화효소(HRP) 또는 그 유도체를 사용하는 것을 기반으로 합니다. 비오틴-아비딘(스트렙타비딘) 접합체 결합 시스템은 ALP 또는 HRP의 색상 측정 신호를 증폭하는 데 자주 사용됩니다. 가장 일반적인 형광 분석법은 플루오레세인 이소티오시아네이트(FITC), 로다민 또는 그 유도체인 테트라메틸로다민 이소티오시아네이트(TRITC), 시아닌(Cy3), 또는 피코에리트린(R-PE)을 활용합니다.

머크는 검출, 정제, 분류 및 현미경 관찰 용도로 사용할 수 있도록 다양한 색상 측정 및 형광 표지자와 결합된 항체를 제공합니다. 결합 항체는 다양한 숙주 동물에서 생산되어 광범위한 면역화학 시약과 호환됩니다. 연구 과정에서 자체 시약에 표지자를 부착해야 하는 사용자를 위해, 머크는 단일클론 및 다클론 항체에 다양한 표지자(비오틴, FITC, CF™ 표지자)를 결합할 수 있는 항체 표지 키트를 제공합니다.

단백질 A, G 및 L

단백질 A는 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)에서 유래합니다. 단백질 G는 연쇄상구균(Streptococcus) 종에서 유래합니다. 두 단백질 모두 포유류 IgG의 Fc 부위에 대한 결합 부위를 가지고 있습니다. 이러한 단백질들의 IgG에 대한 친화력은 동물 종에 따라 다릅니다. 단백질 G는 쥐, 염소, 양, 소의 IgG뿐만 아니라 생쥐 IgG1 및 인간 IgG3에 대해 더 높은 친화력을 보입니다. 단백질 A는 고양이 및 기니피그 IgG에 대해 더 높은 친화성을 보입니다(표 1). 천연 단백질 G는 IgG Fc 결합 부위 외에도 알부민, Ig의 Fab 영역 및 막 결합 부위에 대한 결합 부위를 포함하고 있어 비특이적 염색을 유발할 수 있습니다. 이러한 문제들은 단백질의 재조합 형태를 개발함으로써 해결되었습니다. 재조합 단백질 G는 알부민 결합 부위를 제거하도록 설계되었으며, 재조합 단백질 G′는 알부민, Fab 및 막 결합 부위를 결여하고 Fc 결합 부위만 유지한 단편 단백질로, 천연 형태보다 IgG에 대해 더 높은 특이성을 나타낸다.

Peptostreptococcus magnus에서 유래한 단백질 L은 다양한 종의 카파 경쇄(표 2)에 친화성을 보입니다. 이 단백질은 카파 경쇄를 포함하는 단일클론 또는 다클론 IgG, IgA, IgM은 물론 Fab, F(ab′)2 및 재조합 단일사슬 Fv(scFv) 단편을 검출합니다. 또한 닭 IgG와도 결합합니다. 참고: 소, 염소, 양, 말과 같이 Ig가 거의 전적으로 람다 사슬로만 구성된 종의 경우, 단백질 L에 잘 결합하지 않거나 아예 결합하지 않을 수 있습니다.

검출 시약

단백질 A와 G는 포유류 조직 내의 1차 항체 또는 표면 IgG를 결합하기 위한 일반적인 비종 특이적 시약으로 사용됩니다. 단백질 G는 생쥐와 쥐를 포함한 대부분의 종에 권장됩니다. 단백질 A는 고양이와 기니피그에 권장됩니다. 두 시약 모두 IgA 또는 IgM 검출, Fab 단편 검출, 조류 IgG 검출에는 권장되지 않습니다. 아가로스와 같은 수지에 결합된 단백질 A와 단백질 G는 혈청이나 복수에서 면역글로불린을 친화성 정제하는 데 사용될 수 있습니다.

프로테인 L은 포유류 또는 조류 1차 항체나 모든 클래스의 표면 Ig를 결합하기 위한 일반 시약으로 사용됩니다. 특히 Fab, F(ab′)₂ 단편 및 재조합 scFv 단편의 검출, Fc 수용체에 결합된 Ig의 검출, 또는 소 Ig가 존재하는 환경에서 단일클론 항체의 검출에 유용합니다. 사용은 카파 경쇄를 가진 Ig의 검출로 제한됩니다.

수지

단백질 A와 단백질 G는 포유류 IgG의 Fc 부위에 대한 결합 부위를 가지고 있습니다. 이러한 단백질의 IgG 결합 능력은 종에 따라 다릅니다. 일반적으로 IgG는 단백질 A보다 단백질 G에 대해 더 높은 친화성을 보이며, 단백질 G는 더 다양한 종의 IgG를 결합할 수 있습니다. 다양한 IgG 아형, 특히 생쥐 및 인간 유래 IgG의 프로테인 A에 대한 친화도는 프로테인 G에 비해 더 큰 변동을 보입니다. 따라서 프로테인 A는 일부 종의 동형 순수 IgG를 제조하는 데 사용할 수 있습니다. 프로테인 L은 소 IgG의 오염 없이 세포 배양 상청액에서 생쥐 단일클론 항체를 분리하는 데 적합합니다.

마우스 항튜불린 항체와 CF488A 염소 항마우스 2차 항체로 염색한 HeLa 세포 (미세소관, 녹색). 액틴 필라멘트는 CF640R 팔로이딘으로 염색되었다 (보라색). 핵은 DAPI로 대조 염색되었다 (파란색).

CF™ 염료 표지 항체

CF™ 염료는 항체 표지용으로 가시광선 및 근적외선(near-IR) 스펙트럼을 아우르는 고수용성 형광 염료 시리즈입니다. 획기적인 화학 기술을 활용하여 과학자들이 개발한 CF™ 염료는 합리적인 염료 설계 덕분에 밝기, 광안정성 및 색상 선택 측면에서 타 상용 염료의 품질에 필적합니다.

머크는 다양한 종별 옵션으로 제공되는, 철저한 검증을 거친 CF™ 염색 표지 2차 항체를 제공합니다.