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암 연구 응용을 위한 인간 췌장 오가노이드

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췌관 선암이란 무엇인가?

췌관 선암(PDAC)은 모든 췌장암의 85%를 차지합니다. 췌장암은 발생률이 약 3.5%로 7번째로 흔한 암이며, 남녀 및 모든 연령대에서 암 관련 사망 원인 중 4위를 차지합니다. 흡연, 당뇨병, 비만, 고령, 유전적 소인은 현재까지 PDAC 발병과 연관된 주요 위험 요인으로 확인되었습니다.

KRAS G12D 및 G12V 돌연변이는 PDAC 사례의 90% 이상에서 발견됩니다. KRASG12C를 표적하는 약물의 성공은 이러한 대체 PDAC 관련 KRAS 돌연변이를 특이적으로 표적하는 약물의 잠재력을 시사합니다.

역사적으로 PDAC 연구에는 췌장암 세포주나 동물 모델이 사용되어 왔으나, 생물학적 관련성 부족이나 높은 비용으로 인해 한계가 있었습니다. 환자 유래 오가노이드(PDO)는 조직과 유사한 기능을 가진 새로운 체외 3차원 세포 모델로, 기존의 2차원 세포주 및 PDX 동물 모델을 대체할 수 있습니다.

췌관 선암 오가노이드 바이오뱅크

3dGRO® 췌장 오가노이드 바이오뱅크는 질병 모델링 연구를 위한 조직 유래 인간 췌장암 오가노이드(PDAC 오가노이드) 컬렉션입니다. 이 췌장 오가노이드 바이오뱅크에는 야생형 및 KRAS 드라이버 돌연변이를 포함한 원발성 종양을 대표하는 PDAC 환자 유래 고도로 특성화된 오가노이드 라인이 포함되어 있습니다.

완전한 췌장 오가노이드 배양 프로토콜 및 배지 레시피는 3dGRO 인간 췌장 오가노이드 사용자 가이드를 참조하십시오.

췌관 선암종 오가노이드 데이터

췌관 선암종 오가노이드의 5일 간 현미경 촬영 이미지 4점. 첫 번째 이미지는 1일차 오가노이드를 2배율로 촬영한 것으로, 작은 검은 점들이 이미지 전체를 덮고 있다. 두 번째 이미지는 배양 5일차의 오가노이드를 2배율로 보여줍니다. 더 적고 큰 검은색 원들이 이미지에 흩어져 있습니다. 세 번째 이미지는 배양 1일차의 오가노이드를 10배율로 보여줍니다. 회색 배경 위에 작은 투명한 원들이 보입니다. 네 번째 이미지는 배양 5일차의 오가노이드를 10배율로 보여줍니다. 회색 배경 위에 더 크고 적은 수의 투명한 원들이 보입니다.

그림 1.5일간의 PDAC 암 오가노이드 성장 시간 경과를 보여주는 이 이미지는 해동 후 세포 증식이 관찰되며(SCC700, PPTO.02), 상단 이미지는 2배율, 하단 이미지는 10배율로 촬영되었습니다.

냉동 보존 전 PDAC 오가노이드의 현미경 이미지. 첫 번째 이미지는 6일차 오가노이드를 2배율로 촬영한 것으로, 작은 검은색 원들이 이미지 전체를 덮고 있다. 두 번째 이미지는 6일차 오가노이드를 10배율로 촬영한 것으로, 회색 배경 위에 더 큰 투명한 원들이 보인다.

그림 2.인간 PDAC 암 오가노이드(SCC706, PPTO.46)의 형태 및 융합도, 냉동 보존 전 6일차 (첫 번째 사진: 2배 확대, 두 번째 사진: 10배 확대).

PDAC 오가노이드의 현미경 이미지. 첫 번째 이미지는 회색 배경 중앙에 하나의 크고 선명한 오가노이드가 보이는 대비 현미경 이미지이다. 두 번째 이미지는 오가노이드의 면역세포화학 염색 이미지이다. CK19는 오가노이드 내 세포를 둘러싸며 녹색으로 표시되고, 액틴은 오가노이드 세포의 내부 고리를 따라 배열되어 적색으로 표시되며, DAPI는 세포 중앙에 작은 원을 형성하여 청색으로 표시됩니다. 세 번째 이미지는 오가노이드의 면역세포화학 염색 결과입니다. EpCAM은 오가노이드 내 각 세포를 따라 배열되어 녹색으로 표시되었으며, 액틴은 오가노이드 세포의 내부 고리를 따라 배열되어 적색으로 표시되었습니다. DAPI는 세포 중앙에 작은 원을 형성하여 청색으로 표시되었습니다.

그림 3.인간 췌장 장기유사체(SCC700, PPTO.02)의 면역세포화학적 특성 분석. 인간 PDAC 암 장기유사체는 사이토케라틴 19(CK19, 녹색), 상피세포 접착 분자(EpCAM, 녹색) 및 액틴(적색)에 양성 반응을 보인다. 세포는 DAPI(파란색)로 대조 염색되었다.

밀리셀® 마이크로웰 플레이트에서 배양된 PDAC 오가노이드의 현미경 이미지. 각 오가노이드를 둘러싼 녹색의 EpCAM, 각 오가노이드 중심부의 적색 액션, 각 오가노이드 중심부의 청색 DAPI로 염색됨. 첫 번째 이미지에서는 검은색 배경 중앙에 육각형 격자로 배열된 여러 개의 작은 청색 및 녹색 원이 보임. 두 번째 이미지에서는 여러 개의 작은 파란색 및 녹색 원들이 육각형 격자 안에 배치되어 있으며, 이들을 둘러싼 약간 더 큰 회색 원들은 마이크로웰 격자를 나타냅니다. 세 번째 이미지에서는 약간 더 큰 녹색 및 빨간색 원들이 검은색 배경 위에 균일하게 간격을 두고 배치되어 있습니다.

그림 4.밀리셀® 마이크로웰 플레이트 400µm (MC96U4005)를 사용하여 배양한 췌관 선암 오가노이드 (SCC704). 세포는 EpCAM (녹색), 액틴 (적색) 및 DAPI (청색)로 염색됨.

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