대장균과 대장균군의 구분
위생 지표로서의 생화학적 검사
대장균과 대장균군은 위생 상태를 나타내는 중요한 지표 미생물이다.
2008년 8월, 미국에서 대장균에 오염된 쇠고기가 발견되면서 전국적인 쇠고기 회수 조치가 이루어졌다. 원인은 오염된 쇠고기 제품 이력이 있는 한 공급업체로 밝혀졌다. 쇠고기 내 대장균의 일반적인 오염원은 분변으로 오염된 동물 사체, 급수 시설 및/또는 기타 위생 문제이다. 음용수가 유난히 깨끗한 스위스에서도 액체 비료에 의한 분변 오염 사례가 드물게 발생한다. 이러한 병원체의 검출은 위생 유지에 매우 중요하다.
섹션 개요
대장균의 검출 및 동정
대장균은 호기성, 막대형, 운동성, 그람 음성 장내 세균으로, 유당 및 기타 탄수화물을 발효시킵니다 (표 1). 이 세균은 혼합산(예: 젖산, 초산, 포름산)을 생성하여 포도당(D-글루코스)을 발효시키며, 메틸레드 지시약을 첨가하면 이 산들이 가시화되기 때문에 검출이 가능합니다. 대장균 존재를 검출하는 다른 방법도 많다. 예를 들어, 보게스와 프로스카우어는 클레브시엘라와 엔테로박터가 포도당을 발효할 때 생성되는 아세토인과 2,3-부탄디올을 검출하는 검사를 발견했다. 알칼리성 조건에서 이 두 화합물은 디아세틸로 산화됩니다. 디아세틸은 크레아틴(구아니딘 유도체)과 반응하여 분홍빛을 띤 붉은색 화합물로 나타나거나, α-나프톨과 반응하여 체리색을 띤 붉은색으로 나타납니다.
당사는 이러한 미생물의 차별화 및 동정을 위한 광범위한 생화학적 검사를 제공합니다.
표 1: 탄수화물 차별화 디스크 (25개 단일 팩 또는 10 x 25개 패키지 크기 제공). 키: [+] = 양성 반응, 노란색; [-] = 음성 반응은 아래에 기재되어 있습니다.
참고:
탄수화물 1은 아도니톨, 아라비노스, 셀로비오스, 덱스트로스, 둘시톨을 의미합니다.
탄수화물 2는 과당, 갈락토스, 이노시톨, 유당, 맥아당을 의미합니다.
탄수화물 3은 만니톨, 만노스, 멜리비오스, 라피노스, 람노스를 나타냅니다
탄수화물 4는 살리신, 소르비톨, 자당, 트레할로스, 자일룰로스를 나타냅니다
대장균의 특성
다른 특징적인 효소들도 상호작용을 통해 검출할 수 있다. 트립토파나아제는 트립토판을 피루브산, 인돌, 암모니아로 분해한다; 연구자들은 시약(코박스 및 DMCA)을 사용하여 인돌 생성을 검출할 수 있다(그림 1). β-갈락토시다아제는 ONPG(2-니트로페닐 β-D-갈락토피라노사이드)라는 발색 기질로 검출되며, 이 기질은 분해 후 노란색으로 변합니다. 또한, 질산염을 아질산염으로 환원하는 능력은 설파닐산과 α-나프틸아민을 첨가하여 검출할 수 있으며, 이로 인해 적색 침전물(프론토실)이 생성됩니다. 마지막으로, 라이신은 대장균의라이신 탈카르복실효소에 의해 카다베린으로분해됩니다. 알칼리성 반응의 결과로, 지시약(브로모크레졸 퍼플)은 노란색에서 보라색으로 변합니다.

그림 1.코바츠 인돌 반응 (왼쪽부터: 대조군, 음성 반응, 양성 반응)

그림 2.TSI 한천 배지: 왼쪽부터, 미생물이 없는 배지, 이어서 시험관 바닥과 경사면에서 극단적인 반응; 왼쪽에서 두 번째 시험관은 대장균 미생물에 전형적인 반응을 보여줍니다.
TSI 한천 경사 배지에 접종 시 흥미로운 분화 결과가 관찰된다. 유당, 자당 및 포도당의 발효 과정에서 산이 생성되어 일반적으로 pH 수준이 하락한다. 그러나 펩톤의 산화적 탈카르복실화 시 알칼리성 생성물이 발생하면 pH가 상승한다. pH 상승은 페놀 레드에 의해 확인됩니다. 페놀 레드는 산성 환경에서는 적황색에서 노란색으로 변하고, 알칼리화되면 진한 적색으로 변합니다. 대장균은 시험관 바닥에서 산성 반응(노란색)과 가스 생성을 보이며, 경사 배지 표면에서도 산성 반응(노란색)을 나타냅니다.
대장균의 주요 생화학적 반응 개요는 표 2에 제시되어 있다.
제품의 차별화 및 식별을 위한 테스트
분별 및 동정을 위한 시약
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