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Home미생물학적 분석ISO 업데이트: 미생물학적 식품 및 수질 분석

ISO 업데이트: 미생물학적 식품 및 수질 분석

ISO 표준은 1차 생산 단계부터 식품 및 사료 제품에 이르는 식품 공급망의 미생물학적 분석 분야와 수질 분야에서 적용되는 기준 방법입니다. IDF와 ISO는 유제품 분야 표준을 공동으로 발표하며, IFU는 과일 및 채소 주스 분석을 위한 자체 방법을 발표합니다.

바바라 게르텐

바바라 게르텐은 30년 이상의 산업 미생물학 경험을 보유하고 있으며, 현재 Merck의 규제 마케팅 부서에서 근무하고 있습니다. 그녀는 ISO, CEN, IDF 및 IFU에서 미생물학적 주제를 다루는 여러 국가 및 국제 기구의 활동적인 회원으로, ISO 작업 그룹 '배지 배양' 및 '방법 검증'을 포함하며, 새로운 EN ISO 7704:2023의 책임 프로젝트 리더를 역임했습니다.

바바라 거튼
선임 연구원 전통 미생물학
Merck

신규 (EN) ISO 15213:2023

식품 공급망의 미생물학 — 클로스트리디움 속(Clostridium spp.) 의 검출 및 계수용 수평적 방법 — 제1부: 콜로니 계수 기법을 이용한 아황산염 환원성 클로스트리디움 속(Clostridium spp.) 의 계수

국제표준화기구(ISO)는 3부작 EN ISO 15213 시리즈를 발간합니다. 본 시리즈는 반려동물 사료 및 동물 사료를 포함한 광범위한 식품, 식품 및 사료 생산 및 취급 과정의 1차 생산 단계 시료 및 환경 시료에서 황산염 환원성 클로스트리디움 속(C. perfringens 포함)의 계수 및 검출 방법을 규정합니다.

  • 제1부: 콜로니 계수법을 이용한 아황산염 환원성 클로스트리디움 속 균의 계수. ISO 15213:2003을 대체함
  • 제2부: 콜로니 계수법을 이용한 클로스트리디움 퍼프린젠스(Clostridium perfringens) 계수. EN ISO 7937:2004를 대체할 예정입니다.
  • 제3부: 클로스트리디움 퍼프린젠스(Clostridium perfringens) 검출을 위한 효소면역측정법(). 본 부분은 새로 발간될 예정입니다.

신규 (EN) ISO 7704:2023

수질 — 배양법을 통한 미생물 직접 계수용 멤브레인 필터 성능 시험 요구사항

국제표준화기구(ISO)는 최근 EN ISO 7704:2023 표준을 발표하였습니다. 본 표준은 배양법을 통한 미생물 포집 및 후속 직접 계수를 위해 사용되는 막 여과기의 성능 시험 요구사항을 규정합니다. 이는 다음과 같은 다양한 수질 시료 분석에 적용됩니다:

  • - 음용수, 생수 및 기타 미생물 수가 낮은 것으로 예상되는 수질 시료
  • 미생물 수가 더 높을 것으로 예상되는 물, 예를 들어 지표수 또는 공정수

본 문서는 멤브레인 필터를 생산하는 제조업체 및 자체 시험을 위해 멤브레인 필터를 사용하거나 이를 다른 최종 사용자에게 제공하는 미생물학 실험실에 적용됩니다.

(EN) 20976-2:2022

식품 공급망의 미생물학 — 식품 및 사료 제품에 대한 도전 시험 수행을 위한 요구사항 및 지침 — 제2부: 불활성화 가능성 및 동역학적 매개변수 연구를 위한 도전 시험

식품 위생에 관한 코덱스 알리멘타리우스의 일반 원칙에 따라, 식품 사업자(FBOs)는 식품 내 미생물학적 위험을 통제하고 미생물 위험을 관리할 책임이 있습니다. 따라서 FBOs는 위험 분석 및 중요 관리점(HACCP) 시스템 내에서 검증된 통제 조치를 시행하고, 식품 공급망 전반에 걸쳐 식품 안전 기준 준수 여부를 조사하기 위한 연구를 수행합니다.

미생물 위험 평가(MRA) 체계 내에서 식품 공급망에 존재하는 병원체 또는 부패 미생물이 초래하는 위험을 추정하기 위해 여러 보완적 접근법이 개발되었다. MRA는 식품 기준을 설정하는 국제 기구의 주관 하에 규제 기관에 의해 채택된다. 도전 시험은 HACCP 체계 내 통제 조치의 유효성을 검증하고, 식품의 미생물학적 안전성 및 품질, 식품 생산, 식품 저장 조건, 소비자를 위한 식품 조리 권장 사항을 평가하는 데 사용되는 인정된 접근법 중 하나이다.

따라서 본 문서는 합리적으로 예측 가능한 식품 공정, 저장 및 사용 조건 하에서 원재료, 중간 제품 또는 최종 제품 내에서 접종된 관심 미생물이 증식, 생존 또는 불활성화되는 능력을 조사하기 위한 기술적 규칙, 계산 및 접근법을 제공한다. 연구의 목적과 범위는 실험 설계 및 연구 조건 선정과 미생물 불활성화 정도 평가를 결정하는 것이다. 규제 기관마다 권고 사항이 다를 수 있으며, 이러한 차이점은 가능한 한 반영되었습니다. 그러나 도전 시험에 대한 규제 승인을 얻기 위해 특정 요구 사항을 추가로 포함해야 할 수도 있습니다.

증식과 불활성화 연구는 서로 다르므로, ISO 20976 시리즈는 '식품 및 사료 제품에 대한 도전 시험 수행을 위한 요구사항 및 지침: 식품 공급망의 미생물학'이라는 총제목 아래 두 부분으로 구성됩니다:

  • 제1부: 성장 잠재력, 지연 시간 및 최대 성장률 연구를 위한 챌린지 시험.
  • 제2부: 불활성화 가능성 및 동역학적 매개변수 연구를 위한 도전 시험.

ISO 20976 시리즈의 적용에는 식품 미생물학, 식품 과학, 식품 가공 및 통계학 등 관련 분야의 전문성이 요구됩니다. 통계 전문성은 표본 추출 이론 및 실험 설계에 대한 이해, 미생물학적 데이터의 통계적 분석, 예측 모델링에 사용되는 과학적으로 인정되고 이용 가능한 수학적 개념에 대한 개요를 포함합니다.

실용적인 이유로 "식품"이라는 용어에는 사료도 포함됩니다.

본 문서는 원료 및 성분, 중간 제품 또는 최종 제품 내 영양 세균 및 박테리아 포자에 대한 불활성화 연구를 위한 미생물학적 도전 시험 수행 프로토콜을 명시합니다.

본 문서의 사용 범위는 균사체를 형성하지 않는 효모까지 확장될 수 있습니다.

분석 방법 제2호 (2022)

과일 및 관련 제품의 산성 내성 부패 미생물 검출 및 계수 방법

모든 제품에 존재하는 미생물의 총균수를 결정하는 데 완벽한 배지 매체는 존재하지 않는 것으로 알려져 있습니다. 적합한 배지 매체의 목적은 완제품을 부패시킬 가능성이 있는 모든 미생물, 즉 소위 잠재적 부패 미생물의 성장을 가능하게 하는 것입니다. 과일 제품의 낮은 pH로 인해 대부분의 미생물 성장은 억제되며, 주로 아래에서 언급하는 산성 내성 유형으로 제한됩니다.

  1. 유산균(주로 락토바실러스(Lactobacillus)류코노스톡(Leuconostoc) 속)은 낮은 브릭스(Brix) 수준의 제품(주스 등) 및 주스 농축 공정 초기 단계에서 분리될 수 있다.
  2. 효모는 대부분 삼투압 내성 특성을 보이며, 32° Bx 이상에서 65° Bx까지의 브릭스 수준을 가진 제품의 주요 잠재적 부패 미생물로 발견될 수 있습니다.
  3. 곰팡이는 주로 부패한 원료나 부적절한 저장, 가공 중 재감염으로 인한 2차 오염원으로 간주해야 합니다.
  4. 초산균 및 글루코노박터와 같은 일부 다른 산 내성 유형은 특히 청량 음료에서 부패 식물상의 일부일 수 있습니다.

IFU 방법 제2:1996호 및 IFU 제7:1998호와 비교한 주요 변경 사항은 다음과 같습니다:

  • 방법의 제목이 변경되었습니다.
  • 여러 배지의 선택적 사용이 하나의 액체 배지(맥아 추출물 육수)와 하나의 고체 배지[오렌지 혈청 한천(OSA) 배지]의 사용으로 변경되었습니다.
  • 투명하거나 막 여과 가능한 과즙 제품 및 낮은 브릭스 지수를 가진 원료에 대해 여과 기술을 이용한 새로운 계수 절차가 도입되었습니다.
  • 10mL당 1 cfu 검출을 위한 새로운 배양 증식법 검출 절차가 도입되었습니다.
  • 트립틱 소이 브로스(산성화) 배지에서 증식을 통한 새로운 확인 절차가 추가되었습니다.
  • 배지의 품질 보증을 위한 성능 시험이 부록 B에 추가되었습니다.
  • 본 방법의 성능 특성이 부록 C에 추가되었습니다.
  • 매트릭스 의존적 특수 공정이 부록 D에 추가되었습니다.

본 문서에서 IFU 방법 제2:1996호 및 IFU 제7:1998호와 비교하여 도입된 서문에 기재된 주요 기술적 변경 사항은 (ISO 17468에 명시된 바와 같이) 중대한 것으로 간주됩니다. 본 문서는 고산도 및 낮은 pH를 가진 과일 및 관련 제품의 잠재적 부패 미생물 검출 및 계수 방법을 규정합니다.

본 문서는 다음에 적용됩니다:

  • 인체 섭취용 과즙 및 과즙 관련 제품과 그 원료
  • 주스 및 주스 관련 생산·취급 과정의 처리수를 포함한 환경 시료
  • 주스를 포함하지 않는 기타 음료 및 시럽을 포함한 그 원료

본 방법은 30°C에서 중온성 산내성 잠재적 부패 미생물을 검출 및 계수하기 위한 것이며, 특정 포함 그룹은 최적 성장 조건이 다를 수 있습니다.

모든 IFU 방법 목록은 IFU 국제 과일 및 채소 주스 협회 웹사이트(www.ifu-fruitjuice.com 참조)에서 확인할 수 있습니다.

IDF 팩트시트 22/2022

부티르산 생성(치즈 부패) 클로스트리디아 계수 – 방법론적 고려사항

치즈의 후기 부패는 특히 경질 또는 반경질 치즈 제조 과정에서 심각한 문제입니다. 부패는 식품 공급망에서의 손실을 초래하고 효율성을 저하시키며 경질 치즈 제조에 심각한 경제적 손실을 발생시킵니다. 치즈 부패 클로스트리디아와 관련된 피해 비용이 상당한 것으로 확인되었습니다.

원유 1리터당 소수의 클로스트리디움 포자, 심지어 단일 포자만으로도 경질 치즈의 심각한 부패를 유발할 수 있습니다. 클로스트리디움 계수에는 현재 다양한 배지 조성을 포함한 여러 가지 최다가능수(MPN) 절차가 사용되고 있습니다. 가장 일반적인 절차의 비교는 IDF 팩트시트 표 1에 제시되어 있습니다.

IDF 팩트시트는 국제유제품연맹(IDF) 웹사이트( www.fil-idf.org 참조)에서 무료로 확인할 수 있습니다.

(EN) ISO 23419:2022

식품 공급망 미생물학 — 세균의 계통 분류 및 유전체 특성 분석을 위한 전체 유전체 시퀀싱 — 일반 요구사항 및 지침

차세대 시퀀싱(NGS)은 미생물 전체 게놈 서열에 대한 신속하고 경제적이며 대량 처리 능력을 제공하며, 식품 미생물학 분야에서 점점 더 많은 문제에 적용되고 있습니다.

본 문서는 식품 공급망(예: 원료, 식품, 사료, 생산 환경)에서 채취한 식품 매개 세균성 미생물의 전체 게놈 서열 및 관련 메타데이터에 대한 실험실 및 생물정보학적 구성 요소를 모두 안내합니다. 식품 공급망 미생물학에는 바이러스와 곰팡이도 포함되지만, 본 문서는 세균에만 적용되며 현재 이용 가능한 모든 차세대 DNA 시퀀싱 기술에 적용됩니다.

본 문서는 식품 공급망에서 획득한 세균의 전체 게놈 시퀀싱(WGS) 데이터 생성 및 분석을 위한 최소 요구사항을 명시합니다. 이 과정은 다음 단계를 포함할 수 있습니다:

  1. 세균 배양 처리
  2. 무균적 게놈 DNA 분리
  3. 라이브러리 준비, 시퀀싱, 원시 DNA 서열 읽기 품질 평가 및 저장
  4. 유전적 관련성, 유전적 내용 결정 및 표현형 예측을 위한 생물정보학 분석, 생물정보학 파이프라인 검증
  5. 메타데이터 수집 및 서열 저장소 등록
  6. 종단 간 WGS 워크플로우 검증(목적에 부합하는 적용 적합성).

본 문서는 다음에서 분리된 박테리아에 적용됩니다:

  • 인체 섭취용 제품
  • 동물 사료용 제품
  • 식품 및 사료 취급 및 생산 지역의 환경 샘플
  • 1차 생산 단계에서 채취한 샘플

ISO 4833-1:2013/AMD 1:2022

식품 공급망의 미생물학 — 미생물 계수용 수평적 방법 — 제1부: 30°C에서의 포어 플레이트 기법에 의한 콜로니 계수 — 개정 1: 적용 범위 명확화

본 개정안은 30°C에서 호기성 배양 후 고체 배지에서 성장하고 콜로니를 형성할 수 있는 미생물의 계수용 수평적 방법을 규정한 문서의 적용 범위를 명확히 합니다.

본 문서에 기술된 방법은 다음에 적용됩니다:

  • 인간의 소비를 목적으로 하는 제품
  • 동물(반려동물 포함) 사료용 제품
  • 식품 생산 및 취급 과정의 환경 시료
  • 1차 생산 단계의 모든 시료

본 기술은 시험 시료에서 최소 10개 군집이 배지에서 계수되는 미생물 수를 계수하는 데 적합하나 이에 국한되지 않습니다. 이는 액체 시료의 경우 10 cfu/mL 이상, 고체 시료의 경우 100 cfu/g 이상의 오염 수준에 해당합니다.

본 기술은 특히 다음에 적합합니다:

  • 정량 하한이 지정된 경우 신뢰할 수 있는 계수가 필요한 제품
  • 다른 미생물 군집을 가릴 수 있는 확산성 군집을 포함할 것으로 예상되는 제품(예: 확산성 간균 종이 포함될 가능성이 있는 우유 및 유제품)
  • 산소 민감성 세균이 포함될 것으로 예상되는 제품 (예: 유통기한 중 또는 가스조절저장 시 발생하는 일부 유산균)

(EN) ISO 4833-2:2013/AMD 1:2022

식품 공급망의 미생물학 — 미생물 계수용 수평법 — 제2부: 표면 배양법으로 30°C에서 콜로니 계수 — 개정안 1: 적용 범위 명확화

본 개정안은 30°C에서 호기성 배양 후 고체 배지 표면에서 성장하고 콜로니를 형성할 수 있는 미생물의 계수용 수평적 방법을 규정한 문서의 범위를 명확히 합니다.

본 문서에 기술된 방법은 다음에 적용됩니다:

  • 인체 섭취용 제품
  • 동물(반려동물 포함) 사료용 제품
  • 식품 생산 및 취급 과정의 환경 시료
  • 1차 생산 단계의 모든 시료.

본 기술은 시험 시료에서 최소 10개 이상의 콜로니가 배지에서 검출되는 미생물 수 측정(계수)에 적합하나 이에 국한되지 않습니다. 이는 액체 시료의 경우 100 cfu/mL 이상, 고체 시료의 경우 1000 cfu/g 이상의 오염 수준에 해당합니다.

본 기술은 특히 다음에 적합합니다:

  • 총 미생물 군집에서 상당한 비율을 차지할 가능성이 있는 열에 민감한 미생물을 함유한 제품(예: 냉장 및 냉동 식품, 건조 식품 및 열에 민감한 미생물을 포함할 수 있는 기타 식품의 저온성 미생물)
  • 총 미생물 군집에서 상당한 비율을 차지할 가능성이 있는 절대호기성 세균을 함유한 제품(예: 슈도모나스 속)
  • 주입 배지에서 콜로니와 구분이 어려운 미세 입자를 함유한 제품
  • 주입 배지에서 식민지 식별을 방해할 정도로 색상이 진한 제품
  • 식품 품질 평가의 일환으로 다양한 유형의 콜로니를 구분해야 하는 제품

수동 도포 배양 기술 외에도, 본 문서는 표면 콜로니 계수를 수행하는 자동화된 방법인 나선형 도포기(spiral plater)의 사용에 대해서도 설명합니다(EN ISO 4833-2:2013 부록 A 참조).

(EN) ISO 20836:2021

식품 공급망의 미생물학 — 미생물 검출을 위한 중합효소 연쇄 반응(PCR) — 열순환기의 열 성능 시험

본 문서는 식품 공급망의 미생물학 — 식품 매개 병원체 검출을 위한 중합효소 연쇄 반응(PCR)이라는 일반 제목 아래의 국제 표준 계열의 일부입니다:

  • (EN) ISO 22174, 일반 요구사항 및 정의
  • (EN) ISO 20837, 정성 검출을 위한 시료 전처리 요구사항
  • (EN) ISO 20836, 열순환기의 열 성능 시험
  • (EN) ISO 20838, 정성적 방법의 증폭 및 검출 요구사항

본 문서는 표준 열순환기와 실시간 열순환기의 성능 시험 방법을 기술하며, 이를 통해 실험실은 사용 중인 열순환기가 의도된 용도에 적합하고 실험실이 설정한 사양을 충족하는지 평가할 수 있습니다.

설명된 방법은 블록 기반 열 사이클러에서는 열 사이클러 블록 내에서, 가열 챔버 기반 열 사이클러에서는 튜브 내에서 직접 측정하는 물리적 방법을 기반으로 합니다. 설명된 방법은 사양과 의미 있는 비교를 가능하게 할 만큼 충분히 낮은 측정 불확도를 제공합니다.

또한, ISO/IEC 17025 준수 실험실에서 사용할 경우, 이 방법은 계량학적으로 추적 가능한 교정 방법의 기준을 충족합니다.

본 문서는 표준 열순환기와 실시간 열순환기의 설치, 유지보수, 온도 교정 및 온도 성능 시험에 대한 요구사항을 명시합니다. 이는 중합효소연쇄반응(PCR) 기반 방법을 사용하는 식품 공급망 내 미생물 검출 및 기타 모든 응용 분야에 적용됩니다.

본 문서는 식품 검사를 위해 제정되었으나, 열순환기를 사용하는 다른 분야(예: 환경, 인체 건강, 동물 건강 및 법의학 검사)에도 적용할 수 있습니다.

이 초판 국제 표준은 기술적으로 개정된 초판 기술 사양(ISO/TS 20836:2005)을 취소하고 대체합니다.

이전판 대비 주요 변경 사항은 다음과 같습니다:

  • 범위가 열순환기와 실시간 열순환기 모두를 포함하도록 확장되었습니다.
  • 물리적 성능 시험 방법이 더 상세히 기술되었으며, 생화학적 성능 시험 방법은 제외되었습니다.
  • ISO/IEC 17025 관련 실험실 정보를 포함하였습니다.
  • 성능 시험 방법이 ISO/IEC 17025와 일치하도록 조정되었습니다.
  • 적합성 시험이 추가되었습니다
  • 부록 C에 PCR 기반 방법 사양 설정 절차 2개가 추가되었습니다

(EN) ISO 6888-1:2021 및 (EN) ISO 6888-2:2021

식품 공급망의 미생물학 — 응고효소 양성 포도상구균(황색포도상구균 및 기타 종)의 계수용 수평법 — 제1부: 베어드-파커 한천 배지를 이용한 방법

식품 공급망의 미생물학 — 응고효소 양성 포도상구균(황색포도상구균 및 기타 종)의 계수용 수평법 — 제2부: 토끼 혈장 피브리노겐 한천 배지를 이용한 방법

최근 발표된 이 문서들은 34°C~38°C에서 호기성 배양 후 고체 배지에서 얻은 콜로니를 계수하여 응고효소 양성 포도상구균을 계수하는 수평적 방법을 명시하고 있습니다.

제1부는 고체 배지인 베어드-파커 배지를 사용하고, 제2부는 고체 배지인 토끼 혈장 피브리노겐 배지를 사용합니다.

양쪽 부분은 다음에 적용됩니다:

  • 인체 섭취용 제품
  • 동물 사료용 제품
  • 식품 및 사료 생산, 취급 과정의 환경 샘플
  • 1차 생산 단계의 시료

그러나 식품 공급망 내 제품의 다양성으로 인해, 이러한 수평적 방법은 모든 제품에 세부적으로 적합하지 않을 수 있습니다. 그럼에도 불구하고, 필요한 수정 사항이 최소화되어 본 수평적 방법으로부터 상당한 편차를 초래하지 않도록 기대됩니다.

본 문서 발행 시점에 이용 가능한 정보를 바탕으로, 본 방법은 다음과 같은 오염 가능성이 있는 발효 제품 또는 Staphylococcus spp. (예: S. xylosus)를 기반으로 한 기술적 미생물 군집을 포함하는 기타 제품(예: 생우유로 만든 치즈 및 특정 생육 제품)을 검사하는 데 (완전히) 적합하지 않은 것으로 간주됩니다:

  • 베어드-파커 한천 배지에서 비정형 콜로니를 형성하는 포도상구균
  • 표적 콜로니를 가릴 수 있는 배경 미생물군

그럼에도 불구하고 (EN) ISO 6888-1 및 (EN) ISO 6888-2는 동등한 지위를 부여받습니다.

제1부 및 제2부의 이전 판과 비교한 주요 기술적 변경 사항

양 부분의 서문에는, 서문에 열거된 주요 기술적 변경 사항들이 (제1부 및 제2부의) 이전 판과 비교하여 도입된 것으로 간주되며, 이 방법의 성능 특성에 미치는 영향은 미미하다고 명시되어 있습니다.

실험실 간 연구 결과 및 시험 시료는 제1부 및 제2부의 부록 C에 기술되어 있습니다.

ISO 6888-1:2021 제2판은 기술적으로 개정된 제1판(ISO 6888-1:1999)을 취소 및 대체합니다. 또한 개정안 ISO 6888-1:1999/Amd 1:2003 및 ISO 6888-1:1999/Amd 2:2018을 통합합니다.

ISO 6888-1:2021 제2판은 기술적으로 개정된 제1판(ISO 6888-2:1999)을 취소하고 대체합니다. 또한 개정안 ISO 6888-2:1999/Amd 1:2003을 포함합니다.

이전 판과 비교한 제1부 및 제2부의 주요 변경 사항은 다음과 같습니다:

  • 제목이 "식품 공급망"과 관련되도록 변경되었습니다.
  • ISO 6888-1과 ISO 6888-2의 지위가 명확히 규정됨
  • 문서가 ISO 7218:2007과 일치하도록 조정됨, 즉 용융한 한천 배지를 44°C~47°C에서 주입함
  • 적절한 경우 "35°C 또는 37°C"로 표기된 모든 부분을 "34°C~38°C"로 변경하였습니다.
  • 모든 배양 시간 표기에서 "18시간에서 24시간"은 "24시간 ± 2시간"으로 변경되었습니다
  • ·ISO 11133 사용 요건이 추가되었습니다
  • 시료 채취 기술과 관련된 모든 이용 가능한 표준이 업데이트되었습니다
  • 제1부에만 해당: 베어드-파커 한천(BPA) 배지에서 나타나는 전형적 및 비전형적 콜로니에 대한 설명이 업데이트되었습니다
  • 제1부 전용: 확인을 위한 응고효소 검사 대체법으로 토끼 혈장 피브리노겐 한천(RPFA) 배지가 추가됨
  • 제1부 및 제2부 부록 A의 흐름도 절차가 업데이트됨
  • 제1부 및 제2부 부록 B의 성능 시험을 거친 배지 및 시약이 추가되었습니다
  • 실험실 간 연구 결과(제1부의 경우 ISO 6888-1:1999/개정 1:2003의 정확도 데이터, 제2부의 경우 ISO 6888-2:1999/개정 1:2003의 정확도 데이터)가 업데이트되어 제1부 및 제2부의 부록 C에 추가되었습니다.
  • 제1부 및 제2부의 참고문헌

ISO/TS 21872-2:2020

식품 공급망의 미생물학 — 비브리오속 ( Vibrio spp.) 검출을 위한 수평적 방법 — 제2부: 핵산 하이브리다이제이션을 이용한 수산물 내 총 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus ) 및 잠재적 장병독성 비브리오 파라헤몰리티쿠스 (tdh 및/또는 trh 양성)의 계수

본 문서는 해산물에서 잠재적 장병독성 비브리오 파라헤몰리티쿠스 (tdh 및/또는 trh 양성)의 직접 계수 및/또는 총 비브리오 파라헤몰리티쿠스의 계수를 위한 방법을 명시한다.

잠재적 장병독성 비브리오 파라헤몰리티쿠스 균주는 열안정성 직접 용혈소(TDH) 및/또는 열안정성 직접 용혈소 관련 용혈소(TRH)를 보유한다. TDH 양성 균주는 가나가와 현상(KP)을 나타낸다. 이 특성은 전통적으로 비브리오 파라헤몰리티쿠스의 장독소 생성 균주 식별에 활용되어 왔다. TRH를 보유한 균주는 TDH 양성 분리주의 용혈 특성을 공유하지 않으며, TRH 확인을 위한 기존 확인 검사는 보고된 바 없습니다. 환경 내 병원성 균주는 소수이므로, 장병독성 V. parahaemolyticus와 총 V. parahaemolyticus 존재 여부를 구분하는 것이 유용합니다.

ISO/TC 34/SC 9 신규 웹사이트

새 웹페이지는 뉴스(핫 토픽), 진행 중인 프로젝트, 지침 및 위원회 관리자 및 위원장에게 연락할 수 있는 관련 정보를 다루는 다양한 섹션을 포함합니다. 예를 들어, (EN) ISO 16140-3 구현을 위한 과도기 문서에 대한 배경 정보 및 링크를 포함한 방법의 검증 및 확인에 대한 관련 추가 정보가 제공됩니다.

또 다른 섹션은 배지 및 시약에 관한 (EN) ISO 11133을 다루며, 여기에는 ISO 식품 및 수질 미생물학 표준에서 사용되는 배지 및 시약의 완전한 목록과 성능 시험에 사용해야 하는 대조 균주 명칭이 포함된 표가 있습니다.

또한 (EN) ISO 19036 "정량적 분석을 위한 측정 불확도 추정"에 관한 부분이 있으며, 최근 개정된 ISO 19036:2019 표준의 접근 방식을 제시함으로써 이 복잡한 주제에 대한 질문에 대한 답변을 제공합니다. 사용자가 이 표준의 계산을 구현할 수 있도록 하는 Excel® 도구 링크도 제공됩니다.

(EN) ISO 11133:2014/AMD 2:2020

식품, 사료 및 물의 미생물학 — 배지 준비, 생산, 저장 및 성능 시험 — 개정 2

이미 발간된 (EN) ISO 11133:2014에 대한 이 두 번째 개정안은 식품 공급망 및 물 샘플의 미생물학적 검사에 관한 표준에 기술된 확인 및 특성 분석 배지, 시약, 염료, 착색제 및 재료의 성능 시험을 위한 통제 균주를 명시함으로써 추가 정보를 제공합니다. 선택된 균주는 (EN) ISO 11133:2014에 인용된 균주들이다. 이 출처에서 적합한 균주를 확보할 수 없는 경우, 세계 미생물 데이터 센터(WDCM)가 편찬한 미생물 목록에서 균주를 선정하였다. 대부분의 경우 양성 반응과 음성 반응 모두에 대해 하나 이상의 균주가 기재되어 있다. 사용자는 양성 반응과 음성 반응에 대해 인용된 균주 중 어느 것이나 선택할 수 있다.

(EN) ISO 6579-1:2017 / AMD1:2020

식품 공급망의 미생물학 — 살모넬라 검출, 계수 및 혈청형 분류를 위한 수평적 방법 — 제1부: 살모넬라 속( Salmonella spp.) 검출 — 개정안 1: 배양 온도 범위의 확대, 부록 D 상태에 대한 개정 및 MSRV 및 SC 조성 수정

개정안 1:2020에는 선택 배지의 배양 온도 범위를 37 °C ± 1 °C에서 34 °C ~ 38 °C로 확대하고 추가 허용 오차를 두지 않는 내용이 포함됩니다(예: MKTTn 국물, XLD 한천, SC 배지, BS 한천, 확인 배지 및 시약). 이 온도 범위는 비선택 배지 배양에 대해 (EN) ISO 6579-1:2017에 이미 포함되어 있었습니다.

부록 D " 살모넬라 엔테리카 아종 엔테리카 혈청형 타이피 및 파라타이피 검출"의 상태가 "규범적"에서 "정보적"으로 변경되었습니다.

MSRV(변형 반고체 라파포트-바실리아디스) 한천 및 SC(셀레나이트 시스테인) 배지의 조성은 단일 성분으로부터의 제조를 위해 수정되었습니다.

(EN) ISO 6887-5:2020

식품 공급망의 미생물학 — 미생물학적 검사를 위한 시험 시료, 초기 현탁액 및 십진 희석액의 준비 — 제5부: 우유 및 유제품 준비에 관한 특정 규칙

본 문서는 ISO 6887-1에 명시된 일반 방법과 다른 준비가 필요한 경우, 유제품 및 유제품의 시료와 현탁액의 미생물학적 검사를 위한 준비 규칙을 규정한다. 관련 국제 표준에서 준비 세부 사항이 명시된 계수 및 검출 시험 방법에 대한 시료 준비는 제외한다.

본 문서에는 희석제의 목록과 그 조성 및 성능 시험 외에도, 우유 및 액상 유제품, 탈수 유제품, 치즈 및 치즈 제품, 카제인 제품, 버터, 저 pH 유제품(예: 요구르트, 프로바이오틱 유제품), 프로바이오틱 유무에 관계없이 탈수된 유성 유아식품 등에 대한 초기 현탁액 및 추가 십진 희석액의 일반적 및 특정 준비 절차를 기술한다.

(EN) ISO 6887-5:2020은 (EN) ISO 6887-1:2017 "식품 공급망의 미생물학 — 미생물학적 검사를 위한 시험 시료, 초기 현탁액 및 십진 희석액의 준비 — 제1부: 초기 현탁액 및 십진 희석액 준비에 대한 일반 규칙"과 함께 사용하기 위한 것입니다.

ISO 7932:2004 / AMD1:2020-05

식품 및 동물 사료의 미생물학 — 추정 바실러스 세레우스(Bacillus cereus) 계수용 수평적 방법 — 30°C에서의 콜로니 계수 기술 — 개정1: 선택적 시험 포함.

개정안 1:2020에는 (EN) ISO 7932:2004에 설명된 절차에서 얻어진 분리된 바실러스 세레우스 그룹 균주에 대한 보완적 조사(즉, 역학적 조사)를 위한 선택적 시험이 포함됩니다.

이 개정안에서는 2016년에 발표된 EFSA 의견에 따라 "추정 바실러스 세레우스"대신 "바실러스 세레우스 그룹"이라는 용어를 사용합니다.

새로운 부록 C는 세포독소 K를 암호화하는 유전자의 두 가지 변이형(cytK-1 또는 cytK-2 유전자 변이형)을 모두 표적으로 하는 검증된 PCR 방법을 설명하며, 두 형태 중 어느 것이 존재하는지 표시합니다. 또한 분리체를 B. cytotoxicus로 확인하는 것도 허용합니다.

새로운 부록 D는 ces 유전자를 표적으로 하는 신속하고 검증된 PCR 방법을 기술합니다. 세룰라이드 펩타이드 합성효소(ces)는 세룰라이드의 비리보솜 합성에 관여합니다. 이 세룰라이드는 식품에서 생성될 경우 구토성 식중독 증후군을 유발할 수 있습니다.

부록 E에 기술된 운동성 검사는 분리된 B. cereus 군 내에서의 추정 B. anthracis 선별을 가능하게 합니다. 이 검사는 강력한 한계가 있으며, B. anthracis를 다른 B. cereus 군 구성원들과 구별하는 데 도움을 주기 위한 것입니다. B. anthracis 균주의 정확한 동정은 매우 복잡하며, 본 문서의 범위를 벗어나는 추가 검사가 필요합니다.

부록 F에는 바실러스 투린지엔시스 ( Bacillus thuringiensis )의 부포자 결정체 현미경 검사가 기술되어 있다. 바실러스 세레우스 군에 속하는 종 중 하나인 바실러스 투린지엔시스는 부포자 결정체 형성의 현미경 검사를 통해 이 군의 다른 종들과 구별될 수 있다. 이 방법은 실험실 간 연구를 통해 평가되었으며, 성능 특성은 부록 F에 포함되어 있다.