Marquage des acides nucléiques

Illustration d'une sonde d'ADN marquée à la digoxigénine (DIG).

Les technologies de marquage des acides nucléiques non radioactives sont couramment utilisées comme alternative plus sûre aux composés radiomarqués pour la détection de l'ADN et de l'ARN. Notre gamme propose divers réactifs de marquage des acides nucléiques, notamment le mélange de marquage de l'ARN à la biotine, le mélange de marquage de l'ARN à la fluorescéine, ainsi que des réactifs de marquage et de détection de l'ARN et de l'ADN à la digoxigénine (DIG). Découvrez notre gamme et identifiez le réactif de marquage des acides nucléiques le mieux adapté à vos besoins en matière de flux de travail.

Products

Marquage et détection de l'ADN par la DIG

La technologie de marquage à la digoxigénine (DIG) constitue une alternative idéale aux isotopes radioactifs dangereux pour le marquage des acides nucléiques. Elle permet d’utiliser de manière flexible la détection colorimétrique, luminescente ou fluorescente des signaux et d’obtenir une sensibilité élevée avec un faible bruit de fond en des temps d’exposition très courts. Utilisez des procédures fiables et des protocoles éprouvés pour obtenir un faible bruit de fond et un rapport signal/bruit élevé. En tant que distributeurs exclusifs du système DIG de Roche, nous nous engageons à fournir aux chercheurs la haute spécificité et la haute sensibilité dont ils ont besoin pour détecter les acides nucléiques et réaliser leur prochaine avancée majeure. Le système DIG offre plusieurs avantages :

Spécificité : les anticorps DIG ne se lient pas à d’autres substrats.
Polyvalence : utilisez des sondes marquées au DIG pour les filtres et l’hybridation in situ.
Efficacité prouvée : des milliers de publications démontrent pourquoi la technologie DIG est supérieure à la radioactivité.
Sécurité : marquez et détectez sans les dangers ni les inconvénients liés à la radioactivité.

Pour plus d’informations sur les protocoles, les réactifs et les ressources DIG, veuillez consulter notre page de ressources consacrée aux méthodes de marquage DIG.

Méthodes de marquage à la digoxigénine (DIG)

Issu à l’origine d’un stéroïde isolé des plantes de la famille des digitacées, seule source connue de digoxigénine, le système DIG est un outil puissant pour l’analyse par hybridation nucléique. La présence limitée de cette molécule dans la nature en fait une molécule de marquage idéale, car l’anticorps anti-DIG ne se lie pas à d’autres molécules biologiques, garantissant ainsi une spécificité élevée vis-à-vis de la cible. Une fois que l’acide nucléique stabilisé s’est hybridé avec la sonde marquée au DIG, des anticorps anti-digoxigénine couplés soit à la peroxydase de raifort (HRP), soit à la phosphatase alcaline, à la rhodamine ou à la fluorescéine sont utilisés pour la détection chimiluminescente ou fluorescente qui s’ensuit.

Applications associées

Électrophorèse sur gel

L'électrophorèse sur gel permet de séparer les protéines en vue de leur purification, de leur caractérisation et de leur détection. Des méthodes comme l'électrophorèse PAGE en conditions natives, l'électrophorèse SDS-PAGE, l'électrophorèse 2D-PAGE et l'électrofocalisation permettent de préparer des applications en aval comme l'analyse par western blotting, la spectrométrie de masse et l'analyse protéomique.

Analyses par western blotting

Panorama des principes et applications de l'analyse par western blotting pour la détection des protéines. Inclut des liens vers les protocoles détaillés, des vidéos et d'autres ressources sur l'extraction des protéines, l'électrophorèse sur gel, le transfert sur membranes en PVDF ou nitrocellulose, et les méthodes de détection par chimiluminescence, colorimétrie ou fluorescence.

Lyse et extraction des protéines

Aperçu des méthodes de lyse cellulaire et d'extraction des protéines, notamment la solubilisation par détergent, la lyse par congélation-décongélation, le choc osmotique, la sonication, la lyse cellulaire enzymatique et les techniques de disruption mécanique telles que Dounce, Polytron et l'homogénéisation au mortier et au pilon.

Interactions entre les protéines et les acides nucléiques

Réactifs et ressources destinés à l'étude des interactions protéine-ARN, protéine-ADN et protéine-protéine, ainsi qu'aux applications associées.

Technique de pull-down (interactions protéines/protéines)

Étudiez les interactions protéine-protéine in vitro avec des essais de pull-down (interactions protéines/protéines) reposant sur des méthodes d'affinité, de pull-down avec GST, de co-immunoprécipitation et de double purification par affinité du type méthode TAP.

Électrophorèse sur gel d'acides nucléiques

Découvrez les principes fondamentaux de l'électrophorèse sur gel de l'ADN et de l'ARN, ainsi que la manière dont ces techniques peuvent être utilisées pour séparer et purifier des molécules d'ADN et d'ARN en fonction de leur taille et de leur charge.

Marquage et détection des acides nucléiques

Méthodes de marquage et de détection des acides nucléiques (ADN et ARN), ainsi que leurs applications au Northern blot, au Southern blot et à d'autres tests de détection des acides nucléiques.