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Moyen 199

La main d'un scientifique, gantée d'un gant bleu, utilisant une pipette pour transférer un liquide rouge dans l'un des puits d'une plaque multipuits, suggérant un environnement de laboratoire dédié à la recherche biologique ou chimique.

Le milieu 199, souvent appelé M199, est un milieu de culture cellulaire mis au point par J.F. Morgan en 1950. Il s'agit de l'un des premiers milieux synthétiques utilisés pour la culture de fibroblastes d'embryons de poulet et d'autres cellules mammifères en laboratoire. La composition du milieu 199 peut varier légèrement en fonction des besoins spécifiques de la lignée cellulaire cultivée ; toutefois, la formulation de base comprend généralement des sels tels que le chlorure de potassium, le chlorure de sodium, le chlorure de calcium et le sulfate de magnésium.

Le milieu 199 contient également divers acides aminés essentiels et non essentiels, du glucose, du cholestérol, des pyrimidines et des vitamines, notamment de la thiamine, de la riboflavine et de la biotine. Il ne contient ni protéines, ni lipides, ni facteurs de croissance ; à la place, le M199 utilise un système tampon à base de bicarbonate de sodium (2,2 g/L) et nécessite un environnement contenant 5 à 10 % de CO₂ pour maintenir un pH physiologiquement adapté.

Le milieu 199 est disponible en plusieurs formulations différentes, pouvant inclure les sels d’Earle ou les sels de Hanks,
de la L-glutamine, de l’HEPES, de la glutamine stable et du bicarbonate de sodium, et se présente sous forme liquide ou en poudre. La forme liquide est pré-préparée et prête à l’emploi, tandis que la forme en poudre correspond à la version déshydratée qui doit être reconstituée avec de l’eau stérile ou une solution tampon avant utilisation.

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Applications du milieu 199

Le milieu 199 a été initialement conçu pour des conditions de culture chimiquement définies et exemptes de composants d'origine animale, ce qui le rend particulièrement adapté à la virologie et à la production de vaccins, y compris la fabrication à grande échelle de vaccins. De plus, le M199 a joué un rôle important dans la campagne de vaccination contre la poliomyélite de 1955. Son large éventail d'applications s'étend également à la production de produits biologiques, au criblage de médicaments et aux études toxicologiques, facilitant ainsi les progrès en médecine et en biotechnologie.

Milieu 199 vs DMEM

Le milieu de Dulbecco modifié (DMEM) et le milieu 199 sont deux milieux de culture cellulaire couramment utilisés qui présentent certaines différences notables. Par rapport au milieu 199, le DMEM contient généralement des concentrations plus élevées d’acides aminés, de vitamines, de glucose et de phosphate inorganique. La teneur plus élevée en nutriments du DMEM lui permet de favoriser la croissance d’un large éventail de lignées cellulaires.

Le DMEM utilise également un système tampon à base de phosphate, ce qui lui permet de maintenir la stabilité du pH sans avoir besoin d’apport supplémentaire en CO₂. Le milieu 199, en revanche, utilise un système tampon à base de bicarbonate de sodium et nécessite un environnement contenant 5 à 10 % de CO₂ pour maintenir un pH physiologique.

Ces différences de composition et de régulation du pH font que le DMEM et le milieu 199 conviennent à des exigences différentes en matière de culture cellulaire. Les chercheurs doivent choisir le milieu approprié en fonction de leurs besoins expérimentaux spécifiques.

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