FastStart Universal SYBR Green Master (Rox)

FastStart^™ Universal SYBR^® Green Master (Rox) es una mezcla de reacción de inicio en caliente lista para utilizar para la qPCR y la RT-qPCR en todos los sistemas de PCR en tiempo real que requieran normalización con ROX.

El SYBR^® Green I es un colorante específico del ADN bicatenario. Durante cada fase de síntesis de ADN, el colorante SYBR^® Green I, que está incluido en la mezcla de reacción, se une a los productos amplificados de la PCR. El amplicón puede detectarse por su fluorescencia.

Se ha demostrado que los protocolos de inicio en caliente mejoran de manera significativa la especificidad, la sensibilidad y el rendimiento de la PCR. Grupos de bloqueo termolábiles en algunos restos de aminoácido de la ADN polimerasa Taq FastStart^™ inactivan la enzima modificada a temperatura ambiente (de +15 a +25°C). Por consiguiente, no hay elongación durante el periodo en el que los cebadores pueden unirse de manera inespecífica. La ADN polimerasa Taq FastStart^™ se activa al eliminarse los grupos bloqueantes a una temperatura elevada (es decir, una etapa previa a la incubación a +95°C).

El FastStart^™ Universal SYBR^® Green Master (Rox) puede utilizarse para la amplificación y la detección de cualquier ADN o ADNc diana, incluso los que son ricos en GC o AT.
Combine esta mezcla maestra con el kit de síntesis de la cadena primaria del ADNc (Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit) (Roche) para conseguir resultados excelentes en la qRT-PCR en dos etapas.
La FastStart^™ Universal SYBR^® Green Master (Rox) se ha utilizado en la PCR en tiempo real con transcriptasa inversa (qRT-PCR) y la PCR cuantitativa (qPCR)

• Mayor sensibilidad y especificidad de la PCR.

Minimiza la formación de productos de amplificación inespecíficos.

• Evita la sobrevaloración de los resultados de la qPCR.

Elimina los productos inespecíficos de la amplificación y los dímeros de cebador que aumentan la cantidad de SYBR Green I ligado cuantificado.

• Amplifica y detecta una amplia variedad de ADN y ADNc específicos.

Amplifica fragmentos de hasta 500 pb de longitud, entre ellos los fragmentos ricos en GC y AT.

• Ahorra tiempo y esfuerzo en la preparación de la qPCR.

Elimina la necesidad de mezclar los componentes, valorar con MgCl₂ o realizar otras largas etapas de optimización.

• Evita los resultados falsos positivos que producen contaminación por arrastre.

Utilizar esta mezcla que contiene dUTP con uracil-ADN glucosilasa para eliminar el ADN contaminante arrastrado de las reacciones de PCR anteriores.

Prueba de la función: Se analiza el rendimiento de cada lote en la qPCR utilizando tres moldes: uno rico en GC, uno rico en AT y un molde largo (aproximadamente 440 pb).

FastStart Universal SYBR Green Master (Rox), mezcla maestra concentrada x2 que contiene ADN polimerasa Taq FastStart, tampón de reacción, nucleótidos (dATP, dCTP, dGTP, dUTP), SYBR Green I y un colorante de referencia.

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

FastStart is a trademark of Roche

SYBR is a registered trademark of Thermo Fisher Scientific or its subsidiaries