DL-Ditiotreitol

El ditiotreitol (TDT) es un agente reductor de disulfuros (SH), que se encuentran en las proteínas y en el aminoácido cisteína. Reduce un enlace disulfuro formando un anillo de seis miembros e iniciando un intercambio tiol-disulfuro. Es un reductor casi 7 veces más fuerte que βME, por lo tanto eficiente a concentraciones más bajas.

El TDT se ha utilizado:

• como uno de los reactivos en la reducción y la alquilación de la αs1-caseína, el alérgeno principal de la leche de vaca.
• como componente del medio para la desmembranación y reactivación de espermatozoides.
• para mantener la estabilidad de la enzima ya que el tiol protege eficazmente los sitios activos del biocatalizador.
• como agente reductor para probar la especificidad de la reacción de la N-etilmaleimida con grupos sulfhidrilo.
• en el análisis proteómico como en la digestión de proteínas en disolución para espectrometría de masas
• como componente de tampón para la cuantificación de proteínas, para preparar tampón de lavado, tampón de lisis, tampón de muestras y tampón de elución de proteínas

Un reactivo excelente para el mantenimiento de los grupos SH en estado reducido; reduce cuantitativamente los disulfuros. El DTT reduce de manera eficaz los enlaces disulfuro de las proteínas en tampones de muestra antes de la SDS-PAGE. El DTT puede utilizarse también para reducir el puente disulfuro del reticulante N,N′-bis(acriloil)cistamina con el fin de separar la matriz de un gel de poliacrilamida. El DTT es menos mordaz y menos tóxico que el 2-mercaptoetanol. Normalmente se requiere una concentración de DTT siete veces inferior (100 mM) a la concentración utilizada del 2-mercaptoetanol (5 % v/v, 700 mM).

El ditiotreitol (TDT) se aplica ampliamente en la síntesis química de péptidos y preparaciones bioquímicas de tioles proteicos. También se utiliza en estudios químicos de las proteínas, como el plegamiento de proteínas y la actividad enzimática. También actúa como un estabilizador enzimático para detener la modificación del ADN. El DTT interviene específicamente en la reacción de intercambio tiol-disulfuro para reducir por completo los enlaces de disulfuro intramoleculares o intermoleculares en las biomoléculas. Esta reacción provoca la formación de los tioles y el disulfuro cíclico del TDT.

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