跳转至内容
Merck

细胞健康分析

活细胞/死细胞双重染色

细胞健康分析试剂、试剂盒和工具用于测量细胞培养活力的总体和特定指标。细胞存活率测定既可作为细胞健康状况的总体衡量指标,也可与细胞毒性测定结合使用,以评估处理措施的影响。增殖测定通常利用DNA合成和细胞分裂来衡量细胞在特定条件或处理下的代谢活性。细胞毒性检测试剂盒可采用生物还原法来评估代谢活性。  

培养物污染是高效、可靠细胞培养中最常见的障碍之一。尽管通过对培养物进行细致的显微镜检查可以检测到某些污染物,但像支原体这样的污染物却无法通过目视检测方法发现。因此,应使用能够可靠检测微生物污染物的试剂盒和试剂对培养物进行常规筛查。能够在污染发生时将其最小化并消除的试剂是培养室的必备品,可作为无菌操作技术和良好培养室规范的补充。


Products






细胞存活率和增殖检测

用于测定细胞增殖和存活率的检测方法,旨在监测细胞在受到各种刺激处理后,体外培养过程中细胞的反应及健康状况。检测方法的选择取决于待评估细胞的数量和类型,以及预期结果。细胞增殖检测可监测随时间变化的细胞数量、细胞分裂次数、代谢活性或DNA合成情况。 使用台盼蓝卡莱因-AM等存活染剂进行细胞计数,既可测定增殖速率,也可测定存活细胞的比例。5(6)-羧基荧光素二乙酸酯 N-琥珀酰亚胺酯(CFSE)(21888, SCT110)是测定细胞群体经历的分裂次数的常用选择。 CFSE进入细胞后,会被细胞内酯酶水解形成荧光化合物,其琥珀酰亚胺基酯基团会与细胞内蛋白质上的伯胺发生共价反应。每次细胞分裂时,每个子细胞的荧光强度都会减半,从而可通过流式细胞术轻松检测细胞分裂的次数。

如96孔板中所示,活细胞将MTT代谢为吡唑啉盐的过程

如96孔板中所示,活细胞将MTT代谢为吩嗪盐的过程

我们用于测定细胞存活率和增殖率的全面工具和解决方案采用了多种方法,包括:

  • DNA合成增殖检测
  • 代谢增殖检测
  • 发光细胞存活率检测
  • 荧光染料增殖检测
  • 三维培养的活/死/总细胞三重染色
  • 台盼蓝染料排斥法细胞存活计数

细胞毒性检测

用于测定代谢活性的检测方法适用于分析细胞增殖、存活率和细胞毒性。MTT和XTT等四唑盐还原为有色福马赞化合物,或雷萨祖林(R7017,TOX8)的生物还原反应,仅在代谢活跃的细胞中发生。处于活跃增殖期的细胞其代谢活性会增强,而处于应激状态的细胞(如暴露于毒素的细胞)则会表现出代谢活性降低。

凋亡检测

在发育和稳态维持过程中,细胞死亡对于许多正常的生理功能而言是必不可少的。肿瘤细胞能够逃避程序性细胞死亡(也称为凋亡)的能力,是大多数癌症的标志性特征。 包括细胞表面受体、适配器蛋白、蛋白酶和线粒体组分在内的多种细胞蛋白,通过调节细胞存活与凋亡之间的精细平衡发挥作用。审慎选择检测方法不仅有助于分析细胞培养条件和处理措施对细胞健康的影响,还能揭示其影响细胞健康的具体机制。我们提供全系列的检测产品,用于早期、中期和晚期凋检测

细胞污染检测与消除

维持无污染的细胞培养是细胞研究的基础。最普遍的细胞培养问题之一是支原体污染——支原体是一类细菌,其形态特征为亚微米尺寸且无细胞壁,这使得这些细菌难以甚至无法通过显微镜检测,并且对许多抗生素具有抗药性。 尽管支原体通常不会导致细胞死亡,但会对培养细胞产生多种影响,包括代谢紊乱、增殖能力下降以及染色体畸变。简而言之,支原体污染会损害受影响细胞系为生命科学研究提供有意义数据的能力。

DAPI 或 Hoechst 等常见的 DNA 检测试剂可通过荧光显微镜检测出受污染培养物中是否存在支原体。

我们用于支原体检测和清除的工具包括:

  • LookOut® 支原体PCR检测试剂盒及其他PCR和qPCR试剂盒,可对细胞培养物中的支原体进行可靠且灵敏的检测
  • 色氨酸磷酸盐培养基及其他试剂,用于通过支原体培养法进行检测
  • 用于荧光DNA染色法检测支原体的DNA染色剂
  • LookOut® 支原体清除喷雾及试剂,用于支原体去污

相关资源

1/2