Anti-α-Actin-1 (ACTA1) antibody

43 kDa

Las actinas son proteínas eucariotas ubicuas que actúan como unidades estructurales básicas multifuncionales de los microfilamentos citoesqueléticos. Desempeñan papeles cruciales en una amplia gama de procesos celulares, como la división celular, la migración celular, la remodelación de la cromatina, la regulación de la transcripción y el tráfico de vesículas. Estas funciones se atribuyen a su capacidad de formar filamentos, que se pueden ensamblar y desmontar rápidamente dependiendo de las necesidades de la célula. Se han comunicado al menos seis tipos diferentes de actina en mamíferos. Las actinas muestran alrededor del 90 % de homología de secuencia general, pero las isoformas no muestran patrones de expresión específicos de tejido, espaciales ni temporales, y solo se encuentra un 50-60 % de homología en sus 18 restos N-terminales. Las beta y gamma actinas, también conocidas como actinas citoplásmicas, están muy conservadas en los animales superiores y se expresan predominantemente en células no musculares, donde controlan la estructura celular. Exocitosis y motilidad. Son proteínas casi idénticas y difieren solo en cuatro aminoácidos de la región N-terminal. Las otras cuatro isoformas de actina se suelen encontrar en tipos específicos de tejido muscular adulto. Las actinas alfa-cardíacas y alfa-esqueléticas se expresan en los músculos estriados cardiaco y esquelético, respectivamente. Las actinas alfa y gamma se encuentran principalmente en el músculo liso vascular y en los músculos lisos entéricos, respectivamente. Se ha demostrado que en condiciones de unión al calcio, la beta-actina exhibe un comportamiento más dinámico que la gamma-actina con mayores tasas de polimerización y despolimerización. Además, las beta y gamma-actinas pueden copolimerizar fácilmente, y los filamentos resultantes exhiben tasas de polimerización y despolimerización que varían en función del cociente beta a gamma-actina (Lessard, JL., et al.(1988). Cell Motility Cytoskeleton 10(3); 349-362.

Actina de molleja de pollo purificada (Lessard, 1988).

El epítopo está conservado en todas las actinas conocidas.

Categoría de investigación
Estructura celular

Detección fiable y específica de la actina con este anticuerpo anti-actina, clon C4. Este anticuerpo monoclonal que ha aparecido en muchas publicaciones está validado para utilizar en ELISA, IC, IF, IH, IH(P) y WB. Este AcM también está disponible como conjugado fluorescente.

Inmunofluorescencia indirecta a 1:100:
Células de cultivo tisular, fijadas con formaldehído, tratadas con metanol o acetona.
Miofibrillas glicerinadas: fijar las fibras con formaldehído, tratar con metanol frío. Tiñe intensamente las bandas I y las fibras de estrés de los fibroblastos humanos.
Cortes de criostato (6 µm), congelados rápidamente en isopentano, portaobjetos tratados con gelatina y formaldehído.

Inmunotransferencias:
1:100-1:1 000 (Otey, 1987): en los homogeneizados de músculo sometidos a SDS-PAGE, reacciona de forma relativamente uniforme con una proteína de 43 kD presente en los tejidos esquelético, cardíaco, de molleja y aorta. Parece reaccionar con todas las isoformas de la actina que se encuentran en esas preparaciones y muestra una fuerte reacción con la alfa-actina que se encuentra en el músculo esquelético, cardíaco y arterial.

Yodación (Lessard, 1979).

Ensayo de unión en fase sólida ELISA:
se demostró que una dilución 1:800-1:1 000 de un lote anterior era fuertemente reactiva con la actina citoplásmica y que exhibe una unión significativa con las actinas de molleja, esqueléticas, arteriales y cardíacas. También demuestra una unión significativa a Dictyostelium discoidum y Physarum polycephalum.

ELISA:
muy reactivo con la actina citoplásmica y muestra una unión significativa a las actinas de molleja, esqueléticas, arteriales y cardíacas. También demuestra una unión significativa a Dictyostelium discoidum y Physarum polycephalum.

El usuario debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.

Subcategoría de investigación
Comunicación citoesquelética

El MAB1501 es un pan-anticuerpo anti-actina que se une a un epítopo en una región muy conservada de la actina; por lo tanto, este anticuerpo reacciona con las seis isoformas de la actina de vertabrados (Lessard, 1988). Reacciona con las formas globular (G) y filamentosa (F) de la actina y no interfiere en la polimerización de la actina para formar filamentos, en una proporción de hasta un anticuerpo por dos monómeros de actina. Sin embargo, este anticuerpo aumenta la extensión de la polimerización cuando se utiliza en una proporción menor de anticuerpo a actina. Además de marcar los miotubos, el anti-actina tiñe los mioblastos y los fibroblastos. Aunque el clon C4 se prepara como anticuerpo contra la actina de los músculos de la molleja de pollo, reacciona con las actinas de todos los vertebrados, así como con las actinas de Dictyostelium discoideum y Physarum polycephalum (Lessard, 1988).

Hasta la fecha, todas las especies animales y tipos de células con una forma de actina reaccionan mediante inmunofluorescencia indirecta o inmunotransferencia, incluida la actina vegetal.

Líquido ascítico monoclonal de ratón, con azida sódica al 0,01 %.

Sin purificar

Estable a -20°C en alícuotas no diluidas durante un máximo de 12 meses después de la fecha de recepción. No guardar en un formato diluido. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.

Control
Lisado de células Hela completas.

Evaluada sistemáticamente mediante inmunotransferencia Western en lisados A431.

Análisis mediante inmunotransferencia Western:
una dilución 1:500 de este lote detectó la ACTINA en 10 ug de lisados A431.

Sustituye a: 04-1040

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