Kits de ensayo inmunoenzimático (ELISA)
Un ensayo ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) es un inmunoensayo basado en placas de múltiples pocillos en el que uno de los componentes del ensayo, normalmente un anticuerpo o una muestra, se adsorbe sobre una superficie sólida, en este caso, una placa. Al ofrecer una detección rápida, cuantitativa y sensible del analito a un coste relativamente bajo, los ELISA representan uno de los formatos de ensayo más sencillos de realizar. Además, la facilidad de adaptación de un ELISA a un método de cribado de mayor rendimiento permite a los investigadores analizar un gran número de muestras en una sola ejecución.
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Sandwich, ELISA directo y ELISA competitivos
Nuestros ELISAs son un método cómodo y fácil de usar para estudiar biomarcadores de proteínas solubles en una variedad de matrices, incluyendo suero, plasma, sobrenadante de cultivo celular o lisado. Nuestra oferta de ELISA consta de 1.000 ensayos para uso exclusivo en investigación, frente a una amplia variedad de especies, incluidos humanos, ratones, ratas y otros modelos animales (agrícolas y de compañía). Cada ensayo viene con un protocolo específico y los reactivos necesarios para ejecutar una placa de 96 pocillos. Los ELISA existen principalmente en formato de 96 pocillos y el proveedor suministra los reactivos necesarios para detectar y cuantificar la diana. Existe una variedad de métodos ELISA, entre los que se incluyen el ensayo sándwich, directo y competitivo.
El ensayo sándwich utiliza un par de anticuerpos monoclonales (mAbs) contra diferentes epítopos de la misma diana. El mAb primario, unido a la placa, extrae la proteína de la solución mientras que el segundo mAb se utiliza para completar el "sándwich" y proporcionar la señal que indicará la presencia de la diana. Con el kit se suministra una cantidad conocida de la versión recombinante de la proteína, lo que permite al usuario crear una curva estándar con la que se interpretará la señal de una de las muestras. La mayor parte de nuestra cartera se encuentra en este formato ELISA sándwich.
Los ensayos ELISA directo y competitivo son más raros. El ensayo directo utiliza un único mAb para detectar la muestra que se une a la placa. A continuación, el mAb se une a un anticuerpo secundario informador para proporcionar la señal.
El ensayo competitivo tiene una cantidad conocida del biomarcador preunida a la placa. Un anticuerpo marcado se co-incuba con la muestra que "absorbe" el anticuerpo dependiendo de la concentración de la diana en la muestra. El anticuerpo libre puede entonces unirse al antígeno en la placa y proporcionar una señal tras el lavado de la muestra. En este caso, la señal es inversamente proporcional a la concentración del biomarcador diana.
Conferma® ELISAs y Belysa® Immunoassay Curve Fitting Software
El La marca Conferma® ELISA consiste en ensayos tipo sándwich diseñados para minimizar la variabilidad entre lotes a nivel de reactivo crítico, una preocupación clave de los usuarios de ensayos. La evaluación de los lotes individuales de reactivos críticos con una serie de técnicas analíticas alineadas con un protocolo detallado de control de calidad nos permite controlar y limitar la variabilidad a lo largo del tiempo.
Para que los científicos puedan evaluar la reproducibilidad de su método, hemos diseñado el Belysa® Immunoassay Curve Fitting Software. Con esta herramienta, un usuario puede examinar su inmunoensayo sandwich para asegurarse de que parámetros como %CV (coeficiente de variación) y %Recuperación fueron los esperados.A continuación, puede pasar a comparar las curvas estándar de varias placas para confirmar la coherencia del método.
Recursos relacionados
- Article: ELISA Protocols
En este artículo se ofrecen 4 protocolos ELISA populares: Protocolo de ELISA en sándwich, procedimiento de análisis de fosforilación, procedimiento de análisis EIA y procedimiento de análisis en células aisladas.
- Article: ELISA Troubleshooting Guide
Troubleshoot and optimize ELISAs using this guide that includes solutions to some of the most common sources of problems for assay development.
- Brochure: ELISA Kits
There are several ELISA configurations, with the most common formats being sandwich, competitive and signaling assays.
- Article: Conferma® ELISAs
Learn about the Conferma® ELISA development and manufacturing methods that provide strong sample detection and long-term assay and lot consistency, giving you confidence in your research.
- Article: Belysa® Software
Explore how to effortlessly monitor immunoassay method reproducibility using Belysa® analysis software.
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