Purificación de proteínas biotiniladas

Las proteínas biotiniladas y los anticuerpos biotinilados se utilizan habitualmente en la investigación básica y el descubrimiento de fármacos. Existen diversas resinas de cromatografía de afinidad y columnas y placas preempaquetadas para unir, aislar y purificar proteínas biotiniladas y anticuerpos.

La biotinilación de proteínas y anticuerpos es una de las principales aplicaciones de la cromatografía de afinidad.

Perlas de agarosa y geles de afinidad

Las perlas de agarosa y los geles de afinidad permiten la purificación de proteínas biotiniladas y anticuerpos biotinilados utilizando estreptavidina o avidina reticuladas a agarosa en perlas. Tanto la avidina como la estreptavidina se unen a la biotina con gran afinidad, aunque la avidina puede presentar una unión inespecífica elevada. La agarosa Extravidin® utiliza una avidina modificada con gran afinidad y especificidad por la biotina. Buenas para la purificación a pequeña y gran escala, estas resinas son adecuadas para la purificación en columna de flujo por gravedad, la centrifugación a baja velocidad en el procesamiento por lotes y los procedimientos de cromatografía a baja presión. Los geles de afinidad EZview™ incorporan un colorante rojo que permite al usuario diferenciar fácilmente el pellet del sobrenadante, lo que se traduce en una menor pérdida de proteínas durante la purificación por lotes.

Perlas magnéticas

Las perlas magnéticas PureProteome™ Streptavidin proporcionan una forma rápida y reproducible de purificar inmunoglobulinas a partir de mezclas complejas como muestras de suero, plasma o sobrenadantes de cultivos celulares. Las proteínas biotiniladas y los anticuerpos biotinilados se purifican utilizando una gradilla o plataforma magnética para separar las microesferas de las fracciones de lavado y elución. Este procedimiento es adecuado para un bajo rendimiento utilizando tubos de microcentrífuga individuales o para un mayor rendimiento utilizando placas de 96 pocillos con o sin automatización. Las partículas magnéticas de estreptavidina también pueden utilizarse para la purificación de proteínas biotiniladas y anticuerpos biotinilados.

Placas recubiertas con estreptavidina de alta capacidad SigmaScreen™

SigmaScreen™. utilizan una tecnología de recubrimiento patentada que proporciona una capacidad de unión de biotina sustancialmente mayor que las placas recubiertas de estreptavidina o ExtrAvidina estándar. Con una capacidad de unión de >300 pmol/pocillo (formato de 96 pocillos) o >150 pmol/pocillo (formato de 384 pocillos), estas placas permiten eluir la proteína capturada para su análisis posterior a la captura mediante diversos métodos como MALDI, ICAT o SDS-PAGE. Las placas SigmaScreen™ de alta capacidad recubiertas de estreptavidina se fabrican bajo la norma ISO 9002 en nuestras instalaciones GMP y ofrecen una alta consistencia pocillo a pocillo y placa a placa.

Columnas y medios de cromatografía Cytiva™ Amersham

Columnas y medios de cromatografía Cytiva™ Amersham.Existe una variedad de resinas de medios y columnas de cromatografía Cytiva™ Amersham para la purificación fiable y de alta resolución a pequeña y gran escala de proteínas biotiniladas y anticuerpos.

• Las columnas SpinTrap™ son columnas de centrifugación preempaquetadas y de un solo uso para la purificación sencilla y a pequeña escala de proteínas biotiniladas y anticuerpos biotinilados.
• Las columnas HiTrap™ HP están preempaquetadas con resina Streptavidin Sepharose™ High Performance para la purificación rutinaria y preparativa de proteínas biotiniladas y anticuerpos.
• Las placas de filtro de 96 pocillos MultiTrap™ proporcionan un formato rápido y fiable para la purificación a pequeña escala de proteínas biotiniladas y anticuerpos utilizando placas de filtro de 96 pocillos preempaquetadas susceptibles de centrifugación o filtración al vacío, manualmente o utilizando sistemas robóticos automatizados.
• Los medios Streptavidin Mag Sepharose™ están compuestos por perlas magnéticas basadas en Sepharose™ diseñadas para simplificar el enriquecimiento de proteínas diana mediante aplicaciones de inmunoprecipitación o pull-down, y pueden utilizarse para la purificación y el cribado rápidos a pequeña escala de proteínas biotiniladas y anticuerpos biotinilados a partir de sobrenadantes celulares.
• La resina de estreptavidina Sepharose™ High Performance también está disponible por separado para la purificación a escala.