Clonación molecular y expresión de proteínas
El objetivo de la clonación molecular es insertar el gen de interés (GOI) en un vector plasmídico, una pieza circular de ADN que contiene varios elementos para facilitar la clonación, la selección de clones y la expresión de proteínas. Los investigadores suelen utilizar enzimas de restricción del ADN y ligasa para insertar el GOI dentro del marco del vector de expresión para la posterior expresión de la proteína. A continuación, este vector se inserta en una célula que expresará la proteína codificada por el GOI o la expresión de la proteína se logra utilizando sistemas de síntesis de proteínas libres de células.
Una vez expresada la proteína, puede estudiarse su función, ya que afecta a la señalización celular, la morfología u otros aspectos dentro de la célula. Alternativamente, la proteína puede expresarse en grandes cantidades, purificarse y utilizarse en numerosas aplicaciones posteriores. Para obtener información adicional, explore nuestra completa oferta de reactivos y recursos fiables que están disponibles en todo el flujo de trabajo de clonación y expresión para sistemas de expresión de proteínas de insectos, bacterias y mamíferos.
Products
Enzimas de restricción y enzimas modificadoras del ADN
En la clonación molecular, los investigadores suelen utilizar dos tipos generales de enzimas: enzimas de restricción para cortar el ADN y enzimas modificadoras para realizar modificaciones en el ácido nucleico, a menudo antes del paso de ligación. Explore nuestra amplia gama de enzimas de restricción y otras enzimas modificadoras como la fosfatasa alcalina, la proteasa, la ARN polimerasa T7, la ribonucleasa A y la ADN ligasa T4 para todas sus necesidades de investigación.
Sistemas de expresión sin células y vectores de expresión que utilizan promotores CMV y la tecnología de etiquetas FLAG®
Nuestros sistemas de clonación y vectores de expresión utilizan promotores CMV y la tecnología de etiquetas FLAG®.
Nuestra cartera de clonación y expresión hace que la ingeniería genética sea más barata y eficiente al proporcionar una colección de vectores versátiles con protocolos simplificados y kits de clonación. Elija entre nuestra amplia gama de sistemas de clonación y expresión, incluido nuestro sistema de síntesis o expresión de proteínas sin células, como el Next Generation Cell-Free Protein Expression Kit (Wheat Germ) y el kit ALiCE®. Además, descubra los vectores de expresión FLAG® bacterianos y de mamíferos para la expresión periplásmica o citoplasmática en sistemas de transfección transitoria o estable y exprese con confianza su FLAG® o 3X FLAG® secuencia en el N- o C-terminal con un sitio de corte de enteroquinasa (Ek) para eliminar la etiqueta de fusión si es necesario.
Novagen® pET System, SnapFast™ Vectors, Simplicon™ Vectors, and UCOE™ Protein Expression Systems
Todos los vectores de expresión de E. coli y los vectores de expresión de insectos confieren resistencia a la ampicilina para facilitar la selección de transformantes positivos. Descubra el sistema pET de Novagen®, el estándar de oro para la clonación y expresión de proteínas recombinantes en expresión bacteriana. Diseñada por Oxford Genetics, la familia de vectores SnapFast™ ofrece un protocolo rápido y sencillo que permite la transferencia de un GOI de un vector a otro utilizando los sitios de corte SnapFast™, generando vectores compatibles con sistemas de expresión de insectos, levaduras, bacterias & mamíferos. Con nuestra tecnología de vectores de expresión UCOE™ (Ubiquitous Chromatin Opening Element), puede conseguir gramos de proteína en menos de 30 días en células de mamífero transfectadas de forma estable. La tecnología de expresión UCOE™ evita el silenciamiento del transgén y proporciona una expresión génica consistente, estable y de alto nivel, hasta 20 veces superior a la de los vectores convencionales, independientemente del lugar de integración cromosómica. El Simplicon™ In Vivo Protein Expression System es un sistema de expresión basado en ARN autoreplicante no integrador del genoma, sintonizable y sintético, que genera una expresión proteica inmediata y altamente sostenida de múltiples genes en células humanas transfectadas sin riesgo de integración del genoma.
Reactivos y recursos para la transformación de bacterias y levaduras
La transformación bacteriana es el proceso de inserción de ADN extraño en bacterias mediante métodos como el choque térmico y la electroporación. Nuestra cartera de células competentes está diseñada para la expresión óptima de proteínas, incluso para las proteínas recombinantes más difíciles. Consulte nuestra Guía de selección de células competentes para elegir entre una variedad de nuevas células competentes bacterianas para una amplia variedad de aplicaciones, incluyendo la expresión de proteínas, la clonación rutinaria o difícil y la generación de bibliotecas. Además, la expresión de proteínas recombinantes en Saccharomyces cerevisiae tiene muchas ventajas, como protocolos sencillos, uso de reactivos básicos y escalabilidad. Explore los numerosos productos disponibles para la transformación de levaduras como parte del flujo de trabajo de expresión de proteínas. Nuestras células competentes NovaBlue®, optimizadas para la eficacia de la transfección y la conservación de plásmidos, permiten una preparación de bibliotecas y una estabilidad de plásmidos superiores. Además, las células competentes Novagen® están diseñadas para facilitar el plegamiento adecuado de proteínas, el aumento de la solubilidad o la expresión de proteínas citotóxicas. Las marcas más populares son los sistemas Rosetta™, Origami™ y Overnight Express™.
Recursos relacionados
- Brochure: Molecular Essentials Guide
Learn how our comprehensive molecular tools and reagents provide precise, ready-to-use solutions for your workflows.
- Article: Cell-Free Protein Synthesis or Expression
Cell-free protein synthesis rapidly produces recombinant proteins without cells, utilizing translation machinery from different cell types for efficiency.
- Article: Competent Cell Selection & E. coli Markers Guide
Select competent cells by application, transformation efficiency, and genotype. We also present a list of E. coli markers for reference.
- Article: Simplicon™ in vivo Protein Expression System
Simplicon: A non-genome integrating, tunable and sustained protein expression system in human cells, based on a single, polycistronic, and self-replicating synthetic RNA.
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