ELISA法に基づくmTOR活性測定キット
K-LISA™ mTOR Acrivity Kit
- 製品特長
- 多目的！キナーゼ活性の測定にも阻害剤スクリーニングにも使えます
- 使いやすい！mTORスタンダード、基質、阻害剤すべて梱包されています。
- 便利！96wellフォーマットのELISAベースでアイソトープを使いません。
- 高感度！HRP結合抗体とTMBを使って比色します
| 製品名 | 注文番号 | 包装単位 |
|---|---|---|
| K-LISA mTOR Activity Kit | CBA055-1KIT | 1 Kit |
ELISA法に基づくmTOR活性測定キットです。精製,半精製mTORのキナーゼ活性測定, in vitroでのmTOR阻害剤スクリーニングに適します。このキットはmTORの特異的な基質であるp70S6KにGSTを融合させて，グルタチオンを固定化したプレートに結合させたその基質のリン酸化を抗リン酸化p70S6K抗体で検出します。mTORを介した細胞内シグナル伝達研究に適しています。キットにはラット脳由来のmTORスタンダードが含まれています。
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mTOR (mammalian Target of Rapamycin) は，Saccharomyces cerevisiaeで最初に同定されたプロテインキナーゼです． mTOR は酵母からほ乳類に至るまで広く保存されており，栄養および成長因子に由来するシグナルを統合して，細胞の増殖を制御します．mTOR は，プロテインキナーゼ活性をもつ大きな( ＞ 250 kDa) クラスIV PI3-K ファミリーのメンバーですが，脂質キナーゼ活性はまったく示しません．mTOR は12 kDa のサイトゾルタンパク質であるFKBP-12，およびG1 期で細胞周期を停止させる機能をもつラパマイシンと複合体を形成します．活性化したmTOR はタンパク質合成(mTOR シグナル伝達について最も良く知られている生理学的機能) を促進することによって，腫瘍細胞を増殖亢進していると考えられます．
mTOR はPI3-K →PTEN 経路における重要な下流エフェクターであるAkt の活性を調節し，細胞の増殖および生存を制御しており，mTOR のこの機能を標的として治療への応用が期待されています．
測定例
| 図１ mTOR活性の標準曲線 |
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| 図2 Wortmanninに阻害されたmTOR活性 mTOR(50μL)にWortmannin（キットに含まれています）を作用させたときの活性値の変化 |
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| 図3: FKBP12 + Rapamycinの阻害によるmTOR スタンダードの活性. |
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| mTOR スタンダード (50 μl)の活性をRapamycin (20 μM; 製品番号553210 or 553211)のみ, Rapamycin (20μM) + GST-FKBP12 (37 μg/ml), wortmannin (10 μM; キットに含まれます)の3タイプで阻害したときの活性値を比較. |
| 図4: HEK293細胞溶解液から免疫沈降したmTORの活性. |
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関連製品：抗体
| 製品名 | 製品番号 | アプリケーション | 種交差 |
|---|---|---|---|
| Anti-4EBP1/PHAS-I (101-118) Rabbit pAb | 516676 | GS, WB | human, mouse, rat |
| PhosphoDetect™ Anti-Akt1 (pSer473) Mouse mAb (11E6) | 124003 | ELISA, WB | human, mouse |
| Anti-AMPKa-2 Rabbit pAb | ST1089 | WB, IP | bovine, human, rat |
| PhosphoDetect Anti-elF-4E (Ab-1) (pSer209) Rabbit pAb | PC639 | WB | human, mouse, rabbit, rat |
| Anti-LKB1 (120-160) Rabbit pAb | ST1092 | WB | human |
| Anti-p70S6 Kinase Rabbit pAb | ST1046 | WB | human, mouse, rat |
| Anti-Raptor Rabbit pAb | ST1048 | WB | human, mouse, rat |
| PhosphoDetect Anti-mTOR (pSer2448) Rabbit pAb | PS1020 | WB | human |
| Anti-mTOR/FRAP (Ab-2) Mouse mAb (22C2) | OP97 | WB, IP | human |
| Anti-TSC1 (Tuberous Sclerosis 1) Rabbit pAb | AP1032 | WB, IP | human, mouse |
| PhosphoDetect Anti-Tuberin/TSC2 (pThr1462) Rabbit pAb | ST1084 | WB | human, mouse |
関連製品：アッセイキット
| 製品名 | 製品番号 | 測定感度 | 測定範囲 | サンプルタイプ |
|---|---|---|---|---|
|
PhosphoDetect Akt (pSer473) ELISA Kit (96-well plate) |
CBA005 | >0.8 units/ml | 1.6-100 units/ml | Cell lysates |
|
PhosphoDetect Akt (pThr308) ELISA Kit (96-well plate) |
CBA004 | >0.8 units/ml | 1.6-100 units/ml | Cell lysates |
|
K-LISA mTOR Activity Kit (96-well plate) |
CBA055 | - | - | Purified or partially purified enzyme |
|
TruLight™ p70S6 Kinase Assay Kit (96-well plate) |
539711 | 800 pM | - | recombinant or purified enzyme |
関連製品：阻害剤
| 製品名 | 製品番号 |
|---|---|
| LY 294002 | 440202 |
| InSolution™ LY 294002 | 440204 |
| Rapamycin | 553210 |
| InSolution Rapamycin | 553211 |
| Wortmannin | 681675 |
関連製品：タンパク質
| 製品名 | 製品番号 |
|---|---|
| p70S6 Kinase, Human, Recombinant, S. frugiperda | 506182 |
References
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Sabatini, D.M., et al. 1994. Cell 78, 35.
Stan, R., et al. 1994. J. Biol. Chem. 269, 32027.
Heitman, J., et al. 1991. Science 253, 905.
Trademarks
Triton® is a registered trademark of Dow Chemical Company.
K-LISA™ and PhosphoSafe™ are trademarks of EMD Biosciences, Inc.
QuantaBlu™ is a trademark of Pierce Biotechnology, Inc.
Sold under exclusive license of allowed U.S. Patent Application 20040191836.
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2007/10/23 更新
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