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薄層クロマトグラフィー

色付きのスポットがはっきりと分離しているシリカゲルTLCプレート

薄層クロマトグラフィー(TLC)は、混合物中の化合物を分離するために用いられる親和性に基づく手法である。TLCは汎用性の高い分離法であり、試料の定性分析および定量分析の両方に広く利用されている。TLCは、農薬、ステロイド、アルカロイド、脂質、ヌクレオチド、配糖体、炭水化物、脂肪酸など、事実上あらゆる種類の物質の分析に利用できる。  



注目のカテゴリー

薄層クロマトグラフィー(TLC)
TLCプレートおよび吸着剤

シリカ、アルミニウム、ガラス、プラスチック製の基板を備えた従来のTLCプレートに加え、HPTLCプレート、MSグレードのTLCおよびHPTLCプレート、PLCプレートからお選びいただけます。

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TLCでは、固定相は、通常、シリカゲルや酸化アルミニウムなどの薄い吸着剤層であり、不活性なプレート表面(一般的にはガラス、プラスチック、またはアルミニウム)にコーティングされています。試料はTLCプレートの片端に点付けられ、有機溶媒(移動相)が入った密閉チャンバー内に垂直に設置されます。 移動相は毛細管力によってプレートを上方に移動し、試料成分は固定相および移動相に対する親和性の違いに応じて、それぞれ異なる距離だけ移動します。溶媒がプレートの上端に達したら、プレートを展開チャンバーから取り出し、乾燥させます。分離された成分はプレート上にスポットとして現れ、各成分の保持因子(Rf)が評価されます。

TLCのプロセスと原理

TLCは、固定相と液体の移動相との間の親和性の違いによって、混合物の成分が分離されるという、古典的なクロマトグラフィーの原理に基づいています。 

TLCの保持因子(Rf

保持係数(Rf)は、TLCプレート上での化合物の移動を測定するために用いられる。Rfは、個々の成分が移動した距離を、溶媒が移動した総距離で割った値として定義される。その値は常に0から1の間にある。

Rf 成分の移動距離
溶媒の移動距離


一般に、化合物が固定相吸着剤に強く結合するほど、TLCプレートを上る移動速度は遅くなります。TLCの吸着剤は通常極性であるため、非極性化合物はプレートをより速く移動する傾向があり、その結果Rf値が高くなります。一方、極性化合物は移動速度が遅く、Rf値が低くなる傾向があります。

TLCの応用

TLCは、製薬、臨床検査、環境毒性学、食品・水・農薬分析、化粧品など、多くの産業や研究分野で広く利用されています。TLCの代表的な用途には以下が含まれます:

  • 食品および環境試料中の医薬品残留物および抗生物質の分析
  • 食品および化粧品に含まれる着色料、成分、保存料、甘味料の同定および定量
  • 医薬品製剤の品質管理および純度試験
  • HPLCに先立つ迅速かつ高スループットなスクリーニング
  • 化学反応の完了の確認
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