免疫組織化学的診断手順

診断用IHCと臨床病理学

IHCは、一般病理検査室における日常的な検査サービスの一環として利用可能であり、便利な分析・診断ツールとなっています。臨床診断の多くは依然としてヘマトキシリン・エオジン（H&E）染色などの標準的な組織染色に大きく依存していますが、IHCは問題のある症例の検出において病理医を支援する多くの役割を果たしています。診断用免疫染色は、増殖やアポトーシスといった、初期の微細な形態学的変化や細胞の発達変化を特定するために日常的に用いられています。 臨床用抗体は、特定のマーカータンパク質に結合することで、個々の細胞系統を同定することができる。しかし、免疫染色は組織の取り扱い、保存状態、試薬の品質に敏感であるため、この抗体の特異性によって偽陽性・偽陰性の結果が生じる可能性もある。 臨床病理検査室では、確立されたプロトコルや研修プログラムに基づき、臨床的に検証済みの診断用抗体、染色剤、試薬を活用することで、検査誤差を最小限に抑えています。特に、主要な細胞マーカーに対する高特異性のモノクローナル抗体の開発により、疾患状態の研究および臨床的同定、ならびに外科病理の指針として、診断用IHCパネルが活用されるようになりました。

診断用IHCとがん

ほとんどのがんは、生検組織中の特定の抗原を同定することで、組織学的染色と診断用免疫組織化学を組み合わせることで特定できます。ホルマリン固定組織の標準的なH&E染色を用いて正確な腫瘍の種類を判定することは、特に転移性および／または低分化型腫瘍の場合、困難な場合があります。IHCは、腫瘍性組織の起源をより正確に特定し、特定の腫瘍の挙動や進行を調査するための、比較的迅速かつ簡便な方法を提供します。 原発不明がん（CUP）とは、がんの転移が認められるものの、原発部位が不明な状態を指す。全がん症例の3～5％がCUPに該当すると推定されている。形態学的データと臨床データに不一致が見られる重要なCUP症例やその他の非定型症例において、IHCは診断候補の範囲を絞り込む上で重要な役割を果たす。 場合によっては、がんの表現型や原発腫瘍の部位に関する暫定診断に重要な手がかりを与えることもある。 免疫組織化学（IHC）において、免疫染色は、腺癌（結腸、乳がん、前立腺）や皮膚がんを含む多くの種類のがんを検出するための便利な診断ツールであることが証明されている。結腸がん（HNPCC／リンチ症候群）の診断においては、ある種の反復DNAに多数の変異が見られることを特徴とするマイクロサテライト不安定性（MSI）などの従来の検出法を補完するために、しばしば用いられる。 皮膚がんの病理診断において、標準的なH&E染色切片では、特に日光による損傷を受けた皮膚において、表皮内メラノサイトを同定することは信頼性に欠ける。綿密に観察しても、色素性ケラチノサイトとメラノサイトを明確に区別したり、メラノサイトの密度を明確に把握したりすることは困難である。そのため、多くの病理医は、上皮内黒色腫を類似疾患と区別するためにIHCを推奨している。

診断用IHCと感染性病原体

診断用免疫組織化学は現在、患者の組織検体における感染症の迅速な形態学的鑑別を可能にし、患者ケアにおける迅速な診断判断を促進している。フルオレセインイソチオシアネート（FITC）標識抗体は、感染組織中の肺炎球菌抗原を検出するために使用されてきた。感染症の検出において、IHCは以下のような微生物の同定に非常に有用である：

• 通常の染色や特殊染色では検出が困難な微生物
• 染色が不十分な微生物
• 数が少ないもの
• 培養不可能なもの

一部の診断用IHC法は、B型肝炎、C型肝炎、サイトメガロウイルス感染症の症例において、微生物のDNAまたはRNAに対して作製された特異的抗体を用いて、組織内の病原体を確認するために適用されている。さらに、IHCは、通常の顕微鏡染色だけでは確実に検出することが困難な特定のウイルス性および細菌性感染症を特定するため、いくつかの皮膚感染症の検出にも用いられている。 免疫蛍光法（IFA）は、ヒトおよび獣医学の分野において、固定されていない組織中の病原体（ウイルス、細菌、原虫）の検出に広く用いられてきた。