96ウェル プラスミド精製キット
 
Simply clear, concentrate, wash, and recover
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ご注文情報
Documentation
FAQ(よくある質問と回答)
| 質問 | 回答 | 
|---|---|
| What is holdup volume of a MultiScreen Plate used with the Montage Kits? | The holdup volume for the MultiScreen plate is between 5-20 microliters. | 
| When using the Montage kits how can I tell when filtration in the MultiScreen plate is complete? | Filtration is complete when the individual wells of the MultiScreen plate are empty and the membranes appear shiny. | 
| The two sections of the MultiScreen plates used in the Montage kits are separating under vacuum. Why? | The most common reason for this problem is the lack of a MultiScreen underdrain support grid in the vacuum manifold. A MultiScreen support grid is required for proper functioning of the MultiScreen plate with any vacuum manifold. | 
| The total yields with the Montage Plasmid Miniprep-96 kit seems to be less then with competitive products. Why? | The Montage kit uses less culture volume (1ml vs. 1.3 ml) than most competitive kits. However the relative yield is equivalent. | 
| What is the total processing time for plasmid preparation using the Montage kits? | Processing time depends on viscosity of sample, number of manifolds, familiarity with protocol, temperature. (Also, need vacuum capable of 24 in Hg or 812.7 millibar, 609.6 torr.) | 
| Can the culture block in the Montage 96 Plasmid prep be autoclaved? | Yes. | 
| What is the 260/280 assessment ratio when using the Montage Plasmid Kit? | The 260/280 reading is 1.8-2.0. This signifies and extremely high level of purity. | 
| Can I use this kit in centrifugal mode? | Use of the Montage Plasmid Miniprep-96 Kit in a centrifugal protocol is not recommended. | 
| I'm using your two plate plasmid prep protocol and the wells are overflowing when I transfer the cleared lysate to the FB plate. What am I doing wrong? | Overflowing can result from any of the following: 
 | 
| I have observed RNA contamination of my plasmid preps. Why? | Failure to add RNase A to solution 1 will often result in RNA contamination in your DNA miniprep. | 
関連製品&アプリケーション
関連製品: Application Facete
| Protein Purification | 
| Dialysis and Filtration | 
関連製品: Brand Facete
| Montage® | 
カテゴリー
キットには96ウエルフォーマットでプラスミドDNAを精製するために必要な全ての試薬および消耗品が含まれています。溶菌後に3回の短いろ過操作だけで、プレート上で96検体の精製DNA試料を調製できます。精製した試料は、クローニング、DNAシークエンシング、形質転換やその他の高感度なダウンストリームアプリケーションの大半に適しています。
モンタージュプラスミドミニプレップ96キットは、自動分注システムでの使用に適しています。プレート上部からの精製試料の回収と遠心ステップが無いことにより、このキットは広範なオートメーションシステムに対応可能です。
遠心も沈殿ステップも不要
短い処理時間
優れた純度、収率および再現性
自動化対応
キット構成品
| 部品 | 機能 | 
| 96ウェル ディープウエル培養ブロック | 宿主菌の増殖 | 
| プラスミドプレート | プラスミドDNAの精製 | 
| ライセートクリアリングプレート | バクテリアライセートの粗ろ過 | 
| V-bottom保存プレート | プラスミドDNA試料の保存 | 
| シーリングテープ | V-bottom保存プレートの密封 | 
| RNase A | Solution 1への添加用 | 
| Solution 1 | 菌の再懸濁 | 
| Solution 2 | 溶菌 | 
| Solution 3 | 中和 | 
| Solution 4 | 洗浄 | 
| Solution 5 | プラスミドDNAの再懸濁/保存 | 
| Foil seal | Sealing plates during growth (must be pierced) | 
| * キットの構成品に関しての詳細は、モンタージュプラスミドミニプレップ96キットの取扱説明書をご覧いただくか、http://www.millipore.com/userguides.nsf/docs/p36315にアクセスください。null | |
プロトコール
For BAC DNA protocol, see Montage Plasmid MiniprepHTS Kit user guide, P36315
| 1. | 溶菌の後、ライセートをディープウエル培養ブロックからクリアリングプレートに移します。吸引ろ過を用い、プラスミドフィルタープレート中にライセートを回収します。 | 
| 2. | 試料を濃縮するために、プラスミドプレートをマニホールドの上に置き、5から7分間吸引します。プラスミドDNAはメンブレン上に捕捉され、一方、不純物を含むろ液は廃棄します。洗浄溶液を添加し、3から5分間吸引ろ過します。 | 
| 3. | 再懸濁バッファーを添加し、精製された試料をピペットで回収します。 | 
| 4. | 試料を保存用のV-bottomプレートに移します。 | 
性能
高いクォリティ
 
                                                            モンタージュプラスミドミニプレップ96キットを用いて精製したプラスミドDNAのクォリティと均一性を示すアガロースゲル電気泳動結果(MW-lambda Hind III digest)。
| 高い収量* | ||
| 宿主菌株 | プラスミド | 収量 (µg) | 
| XL 1-blue | pUC 19 | 2.6 ± 0.5 | 
| pLH2* | 3.9 ± 0.4 | |
| JM109 | pUC 19 | 2.7 ± 0.3 | 
| pLH2* | 3.9 ± 0.4 | |
| *   結果は、宿主菌株、プラスミド、プロトコール条件に依存して変化します。null ** pLH2は、pUC19にλファージHind III切断断片2.0kbpをクローニングしたもの。サイズは4.7kbpnull | ||
| 信頼性の高い結果 | |||
| 宿主菌株 | プラスミド | 平均解析長 (n=24; >98% accuracy) | 平均Phred q >20 ベース (n = 24) | 
| XL1-blue | pUC 19 | 707 | 618 | 
| pLH2 | 658 | 623 | |
| JM109 | pUC 19 | 706 | 602 | 
| pLH2 | 695 | 543 | |
| モンタージュプラスミドミニプレップ96キットで調製したプラスミドを用いたシークエンスデータ。 試料は全て、BigDye®試薬を用いて反応させ、MegaBACE®キャピラリーアレイシークエンサーで解析した。pLH2 160 ng、pUC19 100 ngをテンプレートに用いた。反応物はモンタージュ SEQ384を用いて精製した。 | |||
Performance— BAC DNA
Chromosomal DNA
 
                                                            DNA from three different BAC clones from a human chromosome 22 human BAC DNA library (Research Genetics, Inc.) was purified with the Montage Plasmid MiniprepHTS 96 Kit and electrophoresed on a 0.8% agarose gel for 120 min at 100 V either uncut (lanes 1 – 3) or after digestion with Not I (lanes 4 – 6) or Hind III (lanes 7 – 9). Lane M is a Hind III digest of Lambda phage DNA. The BAC DNA purified with the Montage Plasmid MiniprepHTS 96 Kit is suitable for fingerprinting.

 


 
  

 
 
