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この商品について
UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.41
eCl@ss:
32160702
Clone:
3H10, monoclonal
Species reactivity:
human
Application:
FACS, ICC, IF, WB, inhibition assay, multiplexing
Citations:
128
biological source
mouse
Quality Segment
antibody form
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
clone
3H10, monoclonal
species reactivity
human
manufacturer/tradename
Upstate®
technique(s)
flow cytometry: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunofluorescence: suitable, inhibition assay: suitable (peptide), multiplexing: suitable, western blot: suitable
isotype
IgG1κ
NCBI accession no.
UniProt accession no.
shipped in
wet ice
target post-translational modification
phosphorylation (pSer10)
Gene Information
human ... HIST1H3F(8968)
General description
ヒストンH3は、真核細胞のクロマチン構造に関与する5種類の主要なヒストンタンパク質の1つです。H3は、中心的な球状ドメインと長いN末端尾部を特徴とし、′ひも構造に付着したビーズ状′のヌクレオソーム構造に関わっています。ヒストンH3のN末端尾部は、球状ヌクレオソームの中心から突出し、細胞プロセスに影響を及ぼす複数種のエピジェネティック修飾を受けます。これらの修飾としては、リジンおよびアルギニンアミノ酸へのメチル基またはアセチル基の共有結合付加、ならびにセリンまたはトレオニンのリン酸化などがあります。
17 kDa
Application
フローサイトメトリー:
この抗体は、フローサイトメトリーを用いてリン酸化ヒストンH3を検出したことが独立した研究室により報告されています。
Beadlyteヒストン-ペプチド特異性アッセイ:
1:1,000~1:81,000希釈の以前のロットを、Luminexミクロスフェアとコンジュゲートさせたさまざまな修飾を含むヒストンH3ペプチドとともにインキュベートしました。(図B)。ホスホセリン10を含有するペプチドのみが検出されました。
免疫細胞染色:
0.2 μg/mLの以前のロットにより、95%エタノールと5%酢酸で固定して0.1% Triton X-100で透過処理した有糸分裂A431およびHeLa細胞において、染色体免疫染色が陽性であったことが示されました。
ペプチド阻害分析:
コルセミド処理済みHeLa酸抽出物のイムノブロットにおける抗リン酸化ヒストンH3(Ser10)によるヒストンH3の検出は、ホスホセリン10を含有する10 μMのヒストンH3ペプチドにより減少しましたが、ホスホセリン28を含有するペプチドまたは非修飾ヒストンH3配列では減少しませんでした(図C)。
免疫蛍光染色:
この抗体は、フローサイトメトリーを用いてリン酸化ヒストンH3を検出したことが独立した研究室により報告されています。
Beadlyteヒストン-ペプチド特異性アッセイ:
1:1,000~1:81,000希釈の以前のロットを、Luminexミクロスフェアとコンジュゲートさせたさまざまな修飾を含むヒストンH3ペプチドとともにインキュベートしました。(図B)。ホスホセリン10を含有するペプチドのみが検出されました。
免疫細胞染色:
0.2 μg/mLの以前のロットにより、95%エタノールと5%酢酸で固定して0.1% Triton X-100で透過処理した有糸分裂A431およびHeLa細胞において、染色体免疫染色が陽性であったことが示されました。
ペプチド阻害分析:
コルセミド処理済みHeLa酸抽出物のイムノブロットにおける抗リン酸化ヒストンH3(Ser10)によるヒストンH3の検出は、ホスホセリン10を含有する10 μMのヒストンH3ペプチドにより減少しましたが、ホスホセリン28を含有するペプチドまたは非修飾ヒストンH3配列では減少しませんでした(図C)。
免疫蛍光染色:
抗リン酸化ヒストンH3(Ser10)抗体、クローン3H10は、セリン10でリン酸化されたヒストンH3を検出するためのマウスモノクローナル抗体です。この精製mAb、別名:H3S10pは、論文審査のある専門誌で発表され、FC、ICC、IF、PIA、WB、Mplexで検証されています。
Biochem/physiol Actions
Ser10でリン酸化されたヒストンH3。
幅広い動物種交差反応性が予測されます。
Physical form
フォーマット:精製
精製マウスIgG1k抗体、0.15 M塩化ナトリウムと0.05%アジ化ナトリウムを含有する0.1 Mトリス-グリシン緩衝液(pH 7.4)に溶解。
Preparation Note
2~8°Cで受領日から1年間安定です。
溶解する前に、バイアルを短時間微量遠心して、バイアルの底に材料を沈降させてください。
受領時は、キャップを開ける前に、バイアルを遠心し、溶液を穏やかに混合してください。微小遠心管に分注してから、-20°Cで保存してください。凍結融解を繰り返さないでください。IgGに損傷を与える、または製品性能に影響を及ぼすおそれがあります。注:冷凍庫の温度が -20°Cより低い温度に変動すると、グリセロール含有溶液が保存中に凍結する可能性があります。
溶解する前に、バイアルを短時間微量遠心して、バイアルの底に材料を沈降させてください。
受領時は、キャップを開ける前に、バイアルを遠心し、溶液を穏やかに混合してください。微小遠心管に分注してから、-20°Cで保存してください。凍結融解を繰り返さないでください。IgGに損傷を与える、または製品性能に影響を及ぼすおそれがあります。注:冷凍庫の温度が -20°Cより低い温度に変動すると、グリセロール含有溶液が保存中に凍結する可能性があります。
Analysis Note
コルセミドで処理済みの有糸分裂HeLa細胞(カタログ番号17-306)から酸抽出したタンパク質のウェスタンブロットで常に評価されています。
ウェスタンブロッティング:
0.05~0.5 μg/mLで使用し、コルセミドで処理済みの有糸分裂HeLa細胞(カタログ番号17-306)から酸抽出したタンパク質でリン酸化ヒストンH3を検出できましたが、非修飾リコンビナントヒストンH3(カタログ番号14-494)では検出できませんでした(図A)。
ウェスタンブロッティング:
0.05~0.5 μg/mLで使用し、コルセミドで処理済みの有糸分裂HeLa細胞(カタログ番号17-306)から酸抽出したタンパク質でリン酸化ヒストンH3を検出できましたが、非修飾リコンビナントヒストンH3(カタログ番号14-494)では検出できませんでした(図A)。
コントロール
UV処理293細胞抽出物、UV処理HeLa細胞抽出物、乳癌組織、HEPG2細胞抽出物。
UV処理293細胞抽出物、UV処理HeLa細胞抽出物、乳癌組織、HEPG2細胞抽出物。
Other Notes
濃度:ロットに固有の濃度につきましては試験成績書をご参照ください。
Legal Information
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
試験成績書(COA)
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。