ChIPAb+ LEF1 - ChIP検証済み抗体およびプライマーセット

55-57 kDa

毎回ChIPアッセイが問題なく行えることを保証するため、ChIPAb+ラインの抗体のすべてのロットは、クロマチン沈降について個別に検証されています。各抗体には、性能の確認のため、コントロールプライマーセットが含まれています。LEF1抗体とネガティブコントロール抗体（マウス正常IgG）を使用すると、LEF1結合クロマチンの沈降においてLEF1抗体が機能的に検証されていることを確認できます。
含まれるqPCRプライマーは、ヒトc-mycプロモーターのLEF1/TCF結合部位に隣接しています。

この抗体は、ヒトLEF1のアミノ酸1-85に対して作成されています。

ChIPAb+ LEF1マウスモノクローナル抗体を用いたLEF1の検出は、WB、ChIPでの使用が検証されています。

ウェスタンブロッティング：
Jurkat細胞ライセートを電気泳動で分離し、ニトロセルロースに転写し、抗LEF1（1 mg/mL）で標識しました。HRP標識したヤギ抗マウス二次抗体と化学発光検出システムを用いてタンパク質を可視化しました（図参照）。

研究のカテゴリー
エピジェネティクス・核内機能分子

研究のサブカテゴリー
クロマチン生物学

転写因子

LEF1（リンパ球エンハンサー結合因子1）を認識します。

1キットあたりアッセイ25回分。クロマチン免疫沈降1回あたり約4 μg/mL。

フォーマット：精製

抗LEF1（マウスIgG1）。アジ化ナトリウムを含むリン酸緩衝生理食塩水100 mL中にチオフィリックおよびサイズ排除クロマトグラフィーで精製したマウスIgG1を100 mg含むバイアル1本。－20℃で保存してください。この抗体は、ヒトLEF1のアミノ酸残基1-85に対して作成されており、ヒトおよびマウスLEF1を認識できます。TCF-3やTCF-4とは交差反応しません。

正常マウスIgG。容量125 μLに125 μgの正常マウスIgGを含むバイアル1本。－20℃で保存してください。

ChIPプライマーc-myc。ヒトc-mycプロモーターに特異的な5 μMの各コントロールプライマーを75 mL含むバイアル1本。－20℃で保存してください。
フォワード：CCC AAA AAA AGG CAC GGA A
リバース：TAT TGG AAA TGC GGT CAT GC

－20℃で出荷日から1年間。

クロマチン免疫沈降：
3x10⁶個のHT29細胞から調製した超音波処理クロマチンを、ネガティブコントロール抗体、マウス正常IgG、マウス抗LEF1のいずれか4 μgとMagna ChIP^® Gキット（カタログ番号17-611）を用いてクロマチン免疫沈降しました。
LEF1結合部位を持つヒトc-mycプロモーターに隣接するChIPプライマーc-mycを用いたqPCRにより、LEF1が結合したDNA断片が問題なく濃縮されたことが確認されました（図参照）。
実験の詳細については、EZ-Magna ChIP G（カタログ番号17-409）またはEZ-ChIP（カタログ番号17-371）キットプロトコルを参照してください。

コントロール
ネガティブコントロールマウスIgG抗体およびヒトc-mycプロモーターに特異的なコントロールプライマーを含む。

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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