Vascular Endothelial Growth Factor human

製品供給源：バキュロウイルス感染 Sf9 細胞で発現した組換えヒト DNA

VEGF 増殖アッセイ

1. このアッセイに使用する前に、HUVE 細胞を 10 %（v/v）FBS、1 % ペニシリン-ストレプトマイシン-グルタミン、0.1 mg/mL ヘパリン、0.05 mg/mL 内皮細胞増殖添加剤（ECGS）を添加した F-12K 培地で維持します。

2. VEGF のアッセイには、HUVE 細胞を、96 ウエルプレートに 4,000 個／ウエルとなるように増殖培地で一晩培養します。

3. 最終濃度が 0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.2、12.5、25、50ng/mL となるように VEGF を添加します。 陰性コントロールとして、1 組のウェルに VEGF 希釈液を加えます。
4. 4 日後、各ウェルに Promega 社製の基質細胞力価 96 水性ワンソリューション試薬を 20μL 添加します。
5. 37℃ で 2 時間インキュベートし、OD 490nm で測定します。

0.2ミクロンメンブレンフィルターにより滅菌済み

10 µg VEGF タンパク質を 25 mM HEPES、150 mM NaCl、pH 7.0 のバッファーから凍結乾燥。キャリアフリー。

25 mM HEPES、150 mM NaCl、pH7.0 を含むバッファーから凍結乾燥した 10 µg の VEGF タンパク質。キャリアフリー。

凍結乾燥粉末は室温で数週間安定ですが、-20°C で受領日より 1 年間保存するのが最適です。短時間遠心した後、滅菌水または 25 mM HEPES、150 mM NaCl、pH 7.0 で再構成してください。 再構成したものは 2 ～° 8°C で1週間保存できますが、未希釈の分注は -20°C で保存することをお勧めします。凍結融解の繰り返しは避けてください。

本製品は酸に安定です。 安定性を保つため、VEGF 1ug あたり 25 ug の BSA を含む 0.1% TFA または 4 mM HCl で希釈してください。還元試薬（ジチオトレイトールや2-メルカプトエタノールなど）は VEGF 活性を阻害します。

ヒト臍帯静脈内皮細胞を用いた 5 日間増殖アッセイで定期的に評価

細胞増殖アッセイ： このロットの VEGF の生物学的活性は、ヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC）に対する分裂促進活性によって決定され、その ED50 は約 1.0 ng/mL でした。結果は使用する細胞株によって異なる場合があります。 VEGF は他の生物種の内皮細胞も刺激します。

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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