TCFレポータープラスミドキット

FOPflash： トランスフェクショングレードT細胞因子（TCF）レポータープラスミド。このプラスミドには、TCF結合部位の完全コピー2個と不完全コピー1個（変異）、さらにチミジンキナーゼ（TK）最小プロモーターとルシフェラーゼオープンリーディングフレームの上流の逆方向に3個のコピーが存在します。 このプラスミドは、野生型TCF結合部位を含むTOPflashの陰性対照として機能します。

TOPflash： トランスフェクショングレードT細胞因子（TCF）レポータープラスミド。このTCFレポータープラスミドは、チミジンキナーゼ（TK）最小プロモーターとルシフェラーゼオープンリーディングフレームの上流にあるTCF結合部位（野生型）の3コピーの2セット（第2セットは逆向き）を含みます。 変異したTCF結合部位を含むFOPflashも陰性対照として利用できます。

Wntファミリーは、細胞の増殖制御、細胞運命の決定、器官形成、腫瘍形成に関与する分泌糖タンパク質をコードしています。哺乳類細胞におけるショウジョウバエのwingless（wg）シグナル伝達の遺伝的解析から推測されるように、WntシグナルはFrizzledファミリーの受容体を介してDishevelledに至ります。Dishevelledはグリコーゲンシンターゼキナーゼ-3ß（GSK-3ß）活性を下方調節します。その結果、GSK-3ßの基質であるサイトゾルß-カテニンが安定化および蓄積され、GSK-3ßによってリン酸化されると、ユビキチンを介したタンパク質分解の標的となります。ß-カテニンはその後核に移行し、そこで転写調節因子のTcf/LEFファミリーのメンバーと複合体を形成して、Tcf応答遺伝子の転写を活性化します。このTcfレポータープラスミドは、FOPFLASH（カタログ番号：21-169）とともに、これらの構築物でトランスフェクトされた細胞におけるWnt/Wgシグナル伝達の定量化を可能にします。

TOPFlashおよびFOPFlash wnt/b-カテニン活性アッセイに使用するトランスフェクショングレードT細胞因子（TCF）レポータープラスミドのセット。

FOPflash、カタログ番号：21-169、ロット番号：30860、5.5 kb。 5 μgのアフィニティー精製DNAを溶出させ、10 mM Tris-HCl（pH 8.0、1 mM EDTA）50 μLに無菌的にパッケージング。 凍結溶液。

TOPflash、カタログ番号：21-170、ロット番号：27752、5.5 kb。5 μgのアフィニティー精製DNAを溶出させ、10 mM Tris-HCl（pH 8.0、1 mM EDTA）50 μLに無菌的にパッケージング。 凍結溶液。

-20°Cで出荷日から2年間安定です。 内容物を最大限回収するために、融解後のキャップを外す前に元のバイアルを遠心分離します。

TCF結合部位の同一性を確認するために、DNA配列解析により定常的に評価済み。

FOPflash（変異型TCF結合部位）（カタログ番号：21-169）

TOPflash（TCFレポータープラスミド）（カタログ番号：21-170）

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