抗UTX（KDM6A）

リジン特異的脱メチル化酵素6A（UniProt O15550、別名ヒストン脱メチル化酵素UTX、KDM6A、X染色体の普遍的転写TPRタンパク質、普遍的転写X染色体テトラトリコペプチド反復タンパク質）は、 ヒトにおいてKDM6A（別名KABUK2、UTX）遺伝子（Gene ID 7403）にコードされています。KDM6AはH3K4メチルトランスフェラーゼMLL3/4複合体に結合してヒストンH3のLys-27を特異的に脱メチル化し、ヒストンコードにおいて中心的役割を果たしています。トリメチル化およびジメチル化H3Lys-27は脱メチル化しますが、モノメチル化H3 Lys-27は脱メチル化しないことが示されています。KDM6Aは、脱メチル化酵素活性を介して筋再生を仲介する一方で、脱メチル化酵素活性とは無関係に胚性幹細胞の中胚葉分化および乳腺発生を調節します。KDM6Aは、褐色脂肪細胞の熱産生プログラムの調節においても潜在的な役割を果たします。マウスの褐色脂肪細胞の分化中および褐色脂肪組織と白色脂肪組織の寒冷曝露によってKDM6Aがアップレギュレートされることから、熱産生において役割を果たしていることが示されています。KDM6Aを不活性化すると、褐色脂肪特異的遺伝子発現がダウンレギュレートされます。KDM6A遺伝子の変異は、先天的精神遅滞、生後の小人症、大きな突出した耳たぶ、口蓋裂または高口蓋、側わん症、およびその他の異常を特徴とする歌舞伎症候群の原因因子です。

Ref.:
Lederer, D et al. (2012).Am. J. Hum.Genet.90, 119-124.
Zha, L et al. (2015).J. Biol. Chem. 290, 25151-25163.

約154 kDa、実測154.2 kDa（ヒト; UniProt O15550）および154.4/157.5 kDa（マウスアイソフォーム 1/2; UniProt O70546）、算出。一部のライセートに特性評価されていないバンドが認められる場合があります。

ヒトUTXの中心領域内のHis-タグ付きリコンビナントフラグメント（Seenundun, S., et al. (2010). EMBO J. 29(8):1401-1411）。

研究カテゴリー
エピジェネティクス・核内機能分子

クロマチン免疫沈降（ChIP）：代表的なロットは、野生型またはUtx（KI/KI）雌マウス（ホモ接合型脱メチル化酵素活性欠失Utx変異遺伝子ノックインを有する）由来の初代マウス筋芽細胞の筋原性分化後の、Myog、CKm、およびTnnc2プロモーターへのUTX（KDM6A）の動員を検出しました（Faralli, H., et al. (2016). J. Clin. Invest. 126(4):1555-1565)。

クロマチン免疫沈降（ChIP）：代表的なロットは、マウスのC2C12筋芽細胞の筋原性分化後の、ミオゲニンおよびCKm調節領域の時間依存性のUTX（KDM6A）増加を検出しました。shRNAを介したSix4のノックダウンは、ミオゲニンおよびCKm遺伝子座へのUTX（KDM6A）の動員をダウンレギュレートしましたが、p38 MAPK 阻害はこれをダウンレギュレートしませんでした（Seenundun, S., et al. (2010). EMBO J. 29(8):1401-1411）。

免疫細胞染色：代表的なロットは、マウスの長趾伸筋（EDL）から単離した1%パラホルムアルデヒド固定0.5%Triton X-100透過処理済み筋線維の間接免疫蛍光染色により、UTX（KDM6A）免疫反応性を検出しました（Faralli, H., et al. (2016). J. Clin. Invest. 126(4):1555-1565）。

免疫蛍光：代表的なロットは、マウス前脛骨筋の4%パラホルムアルデヒド固定1% Triton X-100透過処理済み横断OCT凍結切片の間接免疫蛍光染色により、UTX（KDM6A）免疫反応性を検出しました、 (Faralli, H., et al. (2016). J. Clin. Invest. 126(4):1555-1565）。

免疫沈降：代表的なロットは、野生型またはUtx（KI/KI）マウス（ホモ接合型脱メチル化酵素活性欠失Utx変異遺伝子ノックインを有する）由来の胚性幹細胞（ESC）核抽出物を用いて、PTIPおよびRbBP5をUTXと共免疫沈降させました。UtxノックアウトESCからは、UTX/PTIP/RbBP5複合体は沈降しませんでした（Faralli, H., et al. (2016). J. Clin. Invest. 126(4):1555-1565）。

免疫沈降：代表的なロットは、筋原性分化24時間後のマウスのC2C12筋芽細胞由来の核抽出物を用いて、Six4とTX（KDM6A）を共免疫沈降させました（Seenundun, S., et al. (2010). EMBO J. 29(8):1401-1411）。

ウェスタンブロッティング：代表的なロットは、UTXおよびMLL4の免疫沈降物と同様に、野生型またはUtx（KI/KI）マウス（ホモ接合型脱メチル化酵素活性欠失Utx変異遺伝子ノックインを有する）由来の筋芽細胞全細胞ライセートおよび胚性幹細胞（ESC）核抽出物中のUTX4を検出しました。UtxノックアウトESCではUTX標的バンドは検出されませんでした（Faralli, H., et al. (2016). J. Clin. Invest. 126(4):1555-1565）。

ウェスタンブロッティング：代表的なロットは、ヒトK562およびマウスのC2C12筋芽細胞（筋原性分化24時間後）由来の核抽出物ならびにSix4免疫沈降物においてUTX（KDM6A）を検出しました。核抽出調製前にshRNA処理をすると標的バンド検出が消失しました（Seenundun, S., et al. (2010). EMBO J. 29(8):1401-1411）。

抗UTX（KDM6A）、カタログ番号：ABE1865は、リジン特異的脱メチル化酵素6Aを特異的に検出するウサギポリクローナル抗体であり、 クロマチン免疫沈降（ChIP）、免疫細胞染色、免疫蛍光、免疫沈降、ウェスタンブロッティングでテストされています。

このポリクローナル抗体は、野生型では予想通りのUTX標的バンドを検出しましたが、Utx-ノックアウトマウスのESC核抽出物では検出しませんでした（Faralli, H., et al. (2016). J. Clin. Invest. 126(4):1555-1565）。

0.1 M Tris-グリシン（pH 7.4）、150 mM NaCl、0.05%アジ化ナトリウムを含むバッファー中の精製ウサギポリクローナル抗体。

アフィニティ精製。

2～8°Cで受領日から1年間安定です。

HeLa核抽出物のウェスタンブロットで評価されています。

ウェスタンブロッティング：0.2 µg/mLで使用、10 µgのHeLa核抽出物中のUTX（KDM6A）を検出できます。

濃度：ロット固有のデータシートを参照してください。

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