抗リン酸化AMPKα-1抗体（Thr479）

5′-AMP活性化プロテインキナーゼ触媒サブユニットα-1（EC2.7.11.1、EC2.7.11.26、EC2.7.11.27、EC2.7.11.31；UniProt：Q13131；別名：ACACAキナーゼ、アセチルCoAカルボキシラーゼキナーゼ、AMPKサブユニットα-1、AMPKa1、HMGCRキナーゼ、ヒドロキシメチルグルタリル-CoA還元酵素キナーゼ、タウタンパク質キナーゼPRKAA1）は、PRKAA1（別名：AMPK1）遺伝子（ヒトではGene ID：5562）にコードされています。酵母のスクロース非発酵1（SNF1）とAMP活性化プロテインキナーゼ（AMPK）は、ショウジョウバエと哺乳類に存在するオルソロガスヘテロ三量体セリン・スレオニンキナーゼであり、それぞれが触媒αサブユニットと調節βサブユニットおよびγサブユニットで構成されています。これらのキナーゼは、代謝率が高いことや栄養素の利用可能性が低いことによってAMP/ATP比が上昇したときに細胞のエネルギー準位が低下することを感知します。AMPがγサブユニットに結合すると、活性化ループであるスレオニンの触媒αサブユニットのリン酸化が亢進し、AMPKがアロステリックに活性化します。活性化されたAMPKは下流の標的をリン酸化することで、エネルギーの節約とATP消費の阻害をもたらします。例えば、筋収縮における高率のATP使用は、AMPKを介したアセチルCoAカルボキシラーゼ（ACC）のリン酸化/不活化を引き起こし、それによって脂肪酸酸化を増加させ、細胞エネルギーを回復させます。AMPKは、オートファジーを開始させるプロテインキナーゼULK1をリン酸化することによって、また、哺乳類TOR（mTOR）結合パートナーであるRAPTORをリン酸化することによってmTOR経路の活性を阻害し、オートファジーの正の調節因子として機能します。哺乳類には2種類のαサブユニット（PR KA1およびPRKA2遺伝子にコード）、2種類のβサブユニット（PRKAB1およびPRKAP2遺伝子にコード）、3種類のγサブユニット（PRKAG1、PRKAG2、PRKAG3遺伝子にコード）が存在します。

実測値：約63 kDa。算出値：64.01/65.52 kDa（ヒトアイソフォーム1/2）および63.93/63.97 kDa（マウス/ラット）。一部のライセートでは、特性が明らかになっていないバンドが認められることがあります。

リン酸化された標的スレオニンを含むAMPKα-1リン酸化部位配列に対応するKLH結合直鎖ペプチド。

このウサギポリクローナル抗リン酸化AMPKα-1（Thr479；カタログ番号ABS981）を用いてAMPKスレオニン479のリン酸化を検出できます。この抗体は、ドットブロッティングおよびウェスタンブロッティングにおける使用について検証済みです。

ウェスタンブロッティング：希釈倍率1:500で使用、6時間血清飢餓HEK293細胞（メルボルン、St. Vincent′s Institute of Medical ResearchのBruce Kemp博士の厚意による）を30分間血清で刺激したとき、AMPKα-1リン酸化誘導が検出されました。

ウェスタンブロッティング：希釈倍率1:1,000で使用、大腸菌が発現した触媒不活性のAMPKα-1リコンビナント・タンパク質（メルボルン、St. Vincent′s Institute of Medical ResearchのBruce Kemp博士の厚意による）のGSK3β触媒によるリン酸化が検出されました。

研究のカテゴリ
シグナル伝達

Thr479の番号付けは、図2Aに示すラットAMPKα-1配列に基づいています（Suzuki, T., et al. (2013).Mol.Cell.50(3):407-419）。これは、その後の発表でThr479リン酸化として引用されました（Coughlan, K.A., et al. (2015).PLoS One.10(5):e0127388; Hawley, S.A., et al. (2014).Biochem.J. Immunol. 459(2); 275-287）。標的スレオニンは、UniProtが公表しているヒト/マウス/ラットのAMPKα-1配列のThr490（Q13131-1/Q5EG47/P54645）またはヒトスプライスアイソフォーム2のThr505（UniProt：Q13131-2）に対応します。標的部位の配列は、AMPKα-1（-SGTA(pT)PQR-）とAMPKα-2（-SGSS(pT)PQR-）の間で十分に保存されていません。

アフィニティー精製。

精製ウサギポリクローナル抗体、150 mM塩化ナトリウムと0.05%アジ化ナトリウムを含有する0.1Mトリス-グリシン緩衝液（pH 7.4）に溶解。

2～8℃で受領日から1年間安定です。

ドットブロッティングにより評価済み。

ドットブロッティング：希釈倍率1:1,000で使用、免疫原ペプチド20～0.156 ngを検出しましたが、対応する非リン酸化ペプチドは検出しませんでした。

濃度：ロットのデータシートを参照してください。

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