Millicoat^® ECMスクリーニングキット、1 ea.ECM101-ECM105

細胞接着は細胞の情報伝達と制御に重要な役割を果たしており、組織の発生と維持において根本的に重要です。科学者は、さまざまな細胞外マトリックス（ECM）成分タンパク質におけるさまざまなタイプの細胞の接着と遊走に関する検討を続けています。 Millicoat^®細胞接着ストリップは、アッセイ設計の利便性と柔軟性のため、プレートフレーム内の取り外し可能な12個の8ウェルストリップとして提供されます。A～G列のウェルは、ヒトECMタンパク質でコートされています。 各ストリップのH列はBSAでコートされ、ネガティブアッセイコントロールとなります。 Millicoatスクリーニングキットには、フィブロネクチン、ビトロネクチン、ラミニン、コラーゲンI、およびコラーゲンIVのための96-ウェルプレートがそれぞれ含まれています。細胞をコートされた基質の上に播種します。 次に、接着細胞を固定し染色します。 相対的接着を、吸光度の値を用いて測定します。

Millicoat^®スクリーニングキットには、フィブロネクチン、ビトロネクチン、ラミニン、コラーゲンI、コラーゲンIVのための96-ウェルプレートがそれぞれ含まれています。

手順：

注： サブコンフルエントな細胞培養物を用いると最善のアッセイ性能が得られます。アッセイ実施の1～2日前に細胞を分割することでこれが行えます。

1.室温で、1ウェル当り200 mLのPBSで、ストリップを少なくとも15分間再水和します。 再水和したストリップからPBSを除去します。

2.できれば非酵素的解離バッファーを用いて、単細胞懸濁液を調製します。最適な細胞密度は、細胞の滴定によって決定できます。一般的な開始範囲は1x10E05～1×10E07　cells/mLです。

3.各ウェルに、希釈した細胞懸濁液を100 mL加えます。 CO2インキュベーター内で、37°Cで1時間、プレートをインキュベートします。 Ca2+/Mg2+を含むPBS（200 mL/ウェル）でプレートを3回、穏やかに洗浄します。

4.各ウェルに、100 mL/ウェルの10%エタノール中の0.2%クリスタルバイオレットを加えます。 室温で5分インキュベートします。 ウェルから染色液を除去します。PBS（300 mL/ウェル）でプレートを3回、穏やかに洗浄します。

5.各ウェルに、100 mLの可溶化バッファー（0.1M NaH2PO、pH 4.5と50%エタノールの50/50混合液）を加えます。 細胞が結合した染色液が完全に溶解するまで室温でストリップをインキュベートし穏やかに振盪します。約5分間です。

6.マイクロプレートリーダーで、540～570 nmの吸光度を測定します。

研究カテゴリー
細胞構造

ホイルパウチに入れて2-8°Cで少なくとも3か月保存できます。未使用のストリップはパウチに戻して保存できます。 乾燥剤がパウチの中に入っていること、そしてパウチがしっかりと閉じていることを確認してください。

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

MILLICOAT is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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