抗8-オキソグアニン抗体、クローン483.15

8-オキソグアニンは、グアニンの変異原性酸化損傷生成物です。細胞には活性酸素種が存在するため、酸化損傷塩基の8-オキソグアニンはすべての生体のDNAで生成されます。DNA損傷は、すべてのDNA分子に保存されている遺伝情報の健康を脅かしますが、細胞内には酵素が存在し、この損傷の変異効果から保護しています。8-オキソグアニンは、酸化ストレスによって生じるDNA損傷のうちで最も多く、また十分に特性評価されているDNA損傷の一つです。哺乳類細胞1個につき1日あたり約180個のグアニンが酸化されて8-oxoGになると推定されています。8-oxoGは、G:CからT:AまたはT:AからG:Cへのトランスバージョン変異が原因で生じる可能性のあるミスコーディング損傷です。この損傷は、年齢とともにDNAに蓄積し、一部の癌および疾患、例えばアルツハイマー病やパーキンソン病などと緩く結びついています。

アルミナに吸着した8-オキソグアニン

免疫細胞染色：
パラホルムアルデヒドで固定したHeLaおよびCos7細胞を使用。8-オキソグアニンは、栄養不足の細胞の核に局在しました。

ELISA：
スライドで増殖した細胞を、冷却した560nM塩化ナトリウム、0.1%（v/v）Triton X-100、0.02%（w/v）SDS、10mMリン酸緩衝液（pH 7.4）を用いて30秒間で2回抽出してから、調整したばかりの4% PFAで5～20分間、室温で固定しました。{Conlon, KA et al (2000) J. Histotechnology 23(1):37-44}。抽出した細胞の核は外縁が明確であり、また凝縮クロマチンの領域があることを代表的な染色は示しています。クローン483.15染色は、添加DMEMでインキュベートした細胞において、明確でも弱い核蛍光染色を示しましたが、栄養欠乏規定塩溶液（NFDSS）{1.8mM塩化カルシウム、110mM塩化ナトリウム、44mM炭酸水素ナトリウム、pH 7.5}でインキュベートした細胞では、点状を呈して広く分布する強い核蛍光染色を示しました。栄養培地でインキュベートした細胞では、初回のNFDSSの処理後でも蛍光染色はバックグラウンドレベルまで消失しています{Conlon et al}。

この抗体の以前のロットをELISAアッセイで使用しました。

最適な希釈濃度は、ご自身で決定してください。

抗8-オキソグアニン抗体、クローン483.15は8-オキソグアニンのレベルを検出します。ELISA、ICでの使用が文献発表され、検証されています。

8-オキソグアニン。競合ELISAによれば、このモノクローナル抗体はマイクロモル濃度のdGMP、dAMP、dCMPまたはTMPとの反応性を示しませんでした。濃度がミリモルの範囲まで上昇した場合のみ、競合が見られました。

防腐剤を含まないバッファー中の未精製マウスモノクローナルIgMの液体。

未希釈アリコートで受領日から6か月間、-20ºCで安定です。
溶解する前に、バイアルを短時間微量遠心して、バイアルの底に材料を沈降させてください。受領時は、キャップを開ける前に、バイアルを遠心し、溶液を穏やかに混合してください。微小遠心管に分注してから、-20°Cで保存してください。IgMを損傷し、製品の性能に影響を及ぼす可能性のある凍結／融解の繰り返しは避けてください。

NIH/3T3細胞の免疫細胞染色により常に評価されています。

免疫細胞染色：
抗8-オキソグアニンマウスモノクローナル抗体を用いたNIH/3T3細胞の共焦点蛍光分析。

コントロール
栄養飢餓状態のHeLaまたはCos7細胞

濃度：ロットに固有の濃度につきましては試験成績書をご参照ください。

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany