抗SYNE1抗体、クローン7A12（MANNES1A）

ネスプリン-1（UniProt：Q8NF91、別名：Enaptin、Myne-1、筋細胞核エンベロープタンパク質1、核エンベロープスペクトリンリピートタンパク質1、シナプス核エンベロープタンパク質1、Syne-1）は、ヒトにおいてSYNE1（別名：C6orf98、EDMD4、KIAA0796、KIAA1262、KIAA1756、MYNE1、SCAR8）遺伝子（Gene ID：23345）によってコードされています。SYNE1遺伝子は、代替開始コドンの使用とスプライシングの結果として、複数の細胞内リンカー／骨格分子をコードします。構造的には、ネスプリンはスペクトリンリピートで構成される中央ロッドドメインを有します。ネスプリン-1アイソフォームgiant/4/5/6/7/10およびネスプリン-2アイソフォームgiant/p32CH/NUANCE-N-33には、アクチン細胞骨格と結合する2つのN末端CH（カルポニン相同）ドメインがあります。ネスプリン-1アイソフォームgiant/β/α/4/β2/α2/myne-1およびネスプリン-2アイソフォームgiant/2/ε2/β1/α1/α2/γ/β2/FLJ56122/FLJ55476/ε1には、C末端膜貫通KASH（Klarsicht-ANC-Syne-homology）ドメインが含まれます。 このドメインは核外膜に存在し、内腔空間全体でSUN（Sad1、UNC84）II型核内膜タンパク質、SUN1およびSUN2と結合して、細胞骨格および細胞核と結合するLINC（Linker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton）複合体を形成します。ヒトSYNE1遺伝子は、5大精神疾患、 統合失調症、双極性障害（BD）、大鬱病、注意欠如・多動症（ADHD）、自閉症スペクトラム障害（ASD）、ならびにその他の複数の神経障害および神経筋障害のリスクを与える遺伝子座のなかでも10本の指に入ります。

実測値：約1,000 kDa（Giant、Enaptin）。算出値：1,011/380.4/112.4/1,005/167.3/367.9/111.6/131.2 kDa（ヒトアイソフォーム1（Giant、Enaptin）/2（β）/3（α）/4/5/8（β2）/9（α2）/11（myne-1、131 kDa））、1010/111,3/108.8/1010 kDa（マウスアイソフォーム1（Giant、Enaptin）/2/3（Syne-1A）/4（Syne-1B））、および325.1 kDa（ラットネスプリン-1：UniProt Q8VHJ9）。一部のライセートでは、特性が明らかになっていないバンドが認められることがあります。

全長アイソフォームα配列と融合した、GSTタグ付きリコンビナントヒトSYNE1アイソフォームβC末端121-a.a.フラグメント（UniProt：Q8NF91-2およびQ8NF91-3）。

ウェスタンブロッティング：10 µg/mLを使用、4日目のヒト骨格筋管培養由来のライセートでSYNE1スプライスアイソフォームGiant（Enaptin）を検出できます（出典：Glenn E. Morris, Ph.D., Wolfson Centre for Inherited Neuromuscular Disease, Oswestry, United Kingdom）。

免疫細胞染色：蛍光免疫細胞染色により、アセトン／メタノール固定ラット大動脈血管平滑筋細胞（VSMC）の核を免疫染色できます（Duong, N.T., et al. (2014).PLoS One.9(4):e94380）。

免疫細胞染色：アセトン／メタノール固定ヒト皮膚線維芽細胞の蛍光免疫細胞染色により、エメリン発現に関わらず、主に核内のSYNE1免疫活性を検出できます。SYNE1免疫活性は、Lamn-/-マウス胎児線維芽細胞（MEF）にラミンA/Cが存在しない状態でERへ再分散されました（Randles, K.N., et al. (2010).Dev.Dyn.239(3):998-1009）。

免疫細胞染色：分化が進行中の筋芽細胞培養に含まれる単核筋芽細胞全体で非常に弱いまたは少ないSYNE1免疫活性しか見られない場合でも、多核筋管核エンベロープを免疫染色できます（Randles, K.N., et al. (2010).Dev.Dyn.239(3):998-1009）。

ウェスタンブロッティング：ヒト筋組織、骨格筋細胞、および皮膚線維芽細胞において、さらにLmna-/-マウス胎児線維芽細胞（MEF）においても、複数のSYNE1スプライスアイソフォーム（Giant/Enaptin、β、およびαを含む）を検出できます（Randles, K.N., et al. (2010).Dev.Dyn.239(3):998-1009）。

マウスモノクローナル抗SYNE1、クローン7A12（MANNES1A）、カタログ番号MABT843は、免疫細胞染色およびウェスタンブロッティングを用いたネスプリン-1の検出がバリデーションされています。

研究カテゴリー
細胞構造

エピトープ領域は、ヒトアイソフォーム1（Giant、Enaptin）/2（β）/3（α）/4/5/8（β2）/9（α2）/11（myne-1、131 kDa）、マウスアイソフォーム1（Giant、Enaptin）/2/3（Syne-1A）/4（Syne-1B）、およびラットネスプリン-1（UniProt Q8VHJ9）には存在しますが、UniProt（Q8NF91、Q6ZWR6、Q8VHJ9、Q63128）によって報告されているヒトスプライスアイソフォーム6/7/10（drop1）/12（GSRP-56、56 kDa)、マウススプライスアイソフォーム5（Enaptin-165）、およびラットスプライスアイソフォームCPG2（UniProt Q63128）には存在しません。 クローン7A12はネスプリン-2とは反応しませんが、アセトン／メタノール固定HeLa細胞の中心体が染色されている場合の交差反応性は評価されていません（Randles, K.N., et al. (2010).Dev.Dyn.239(3):998-1009）。

フォーマット：精製

プロテインG精製品。

精製マウスIgG1κ抗体、150 mM塩化ナトリウムと0.05%アジ化ナトリウムを含有する0.1 Mトリス-グリシン緩衝液（pH 7.4）に溶解。

2～8°Cで受領日から1年間安定です。

アイソタイプテストによる同一性確認。

アイソタイプ解析：このモノクローナル抗体の同一性は、マウスIgG1に対してアイソタイプテストを行うことにより確認されます。

濃度：ロットに固有のデータシートを参照してください。

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