細胞遊走・浸潤アッセイ

がんの転移は、腫瘍細胞およびその微小環境における複数の変化が積み重なった結果であり、それによって細胞が移動したり、正常組織へ浸潤したりすることが可能になります。当社が提供する移動アッセイ、浸潤アッセイ、走化性および触化性のボイデンチャンバーアッセイのラインナップにより、研究者は生体内において正常細胞や転移細胞が直面する条件を再現することができます。
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細胞遊走アッセイ
細胞遊走は、胚発生、血管新生、創傷治癒、免疫応答、および炎症において極めて重要な役割を果たしています。転移性疾患はがんによる死亡の主な要因であるため、がん研究において細胞遊走のメカニズムを理解することは極めて重要です。多くの細胞遊走アッセイでは、定性的なスクラッチアッセイや、より定量的なボイデンチャンバー法が用いられています。
ボイデンチャンバー法では、走化性およびハプトタキシスに基づく細胞遊走を測定します。走化性とは、細胞外化学シグナルに応答して起こる細胞遊走を指し、ハプトタキシスとは、固定化された細胞外マトリックス(ECM)タンパク質の濃度勾配に向かって起こる細胞遊走を指します。
ケモタキシスおよびハプトタキシスの両方のQCM™移動アッセイは、さまざまな孔径およびマルチウェル形式で利用可能です。QCM™移動アッセイでは、カルセイン-AMによる細胞標識を伴う他のプロトコルで必要となる、細胞の標識、スクレイピング、洗浄、および計数といった工程が不要です。
マルチウェル形式のInnoCyte™細胞遊走アッセイは、走化性細胞遊走を測定することを目的としています。このアッセイでは、細胞透過性蛍光色素を用いて、8 μmの孔を通ってフィーダー層へと移動する上皮細胞、間葉系細胞、および内皮細胞の遊走を測定します。
細胞遊走のためのスクラッチアッセイ
スクラッチアッセイは、細胞遊走および創傷治癒の研究に使用されます。スクラッチアッセイでは、コンフルエントな細胞単層の表面にスクラッチ(傷)を作り、狭い創傷のような隙間を形成します。その後、その隙間が埋まるまで、隣接する細胞が隙間へ移動する様子を観察します。当社のCell Comb™スクラッチアッセイは、創傷の縁を最大化するために高密度のスクラッチ領域を形成すると同時に、隙間に移動するための十分な数の無傷の細胞を残します。


HT-1080細胞による浸潤は、96ウェル細胞浸潤アッセイにより測定した。非浸潤対照としてNIH3T3細胞を用いた。
細胞浸潤アッセイ
腫瘍が基底膜および関連組織のECM成分を分解する能力は、転移能の指標となります。当社のQCM™ ボイドンチャンバー細胞浸潤アッセイは、in vitroでの細胞浸潤を定量するための、高スループットかつ高感度な手法です。このアッセイでは、細胞は基底膜のモデル構造に浸潤しますが、その膜の細孔はECMタンパク質の層によって塞がれており、非浸潤性の細胞は通過できません。
Chemicon® ニューライト伸長アッセイは、Millipore® の微細多孔性組織培養インサート技術を採用しています。この技術により、ニューライト突起は1 µmの孔を通過できますが、細胞体は通過できない直径となっています。本アッセイはPC12細胞向けに最適化されています。
関連リソース
- 記事:細胞遊走および浸潤アッセイ
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- 記事:内皮細胞のトランスウェル法を用いた遊走・浸潤アッセイ
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- 記事:移動・侵入アッセイチャート
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- 記事:ボイデン・チャンバー法
本記事では、細胞の遊走を評価するためのボイデンチャンバー法について解説し、その手順、細胞の種類に応じた適切な孔径、およびアッセイに使用される材料について詳しく説明します。
- Cultrex® 3D Spheroid BME Invasion Assay Protocol
3D Spheroid BME Cell Invasion Assay utilizes specialized plates and ECM for cell aggregation and spheroid formation in vitro.
- T-Cell Migration Assays Using Millicell® Cell Culture Inserts
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ECMゲルマトリックスEHS基底膜抽出物(BME)を用いた、神経突起伸長、細胞浸潤および血管新生時の管腔形成細胞培養プロトコル集
- Lyo ECM Gel: A Novel Lyophilized Basement Membrane Extract for 2D and 3D Cell Culture
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- Angiogenesis Assays
Cell based angiogenesis assays to analyze new blood vessel formation for applications of cancer research, tissue regeneration and vascular biology.
- Cell Migration and Invasion Assay Guidance using Millicell® Cell Culture Inserts
How to set up cell migration assays using cell culture inserts.