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Merck

細胞分離培地

細胞分離培地は、バイオメディカル研究、診断、製薬アプリケーションにおいて、特定の細胞集団の分離・精製に使用される。これらの培地は、全血や組織サンプルのような複雑な混合物から、特定の特性やマーカーに基づいて目的の細胞を分離することを容易にする。密度勾配遠心法は、勾配培地とサンプル粒子の密度範囲に基づいて、生物学的粒子の特定の細胞集団を分離する。

当社は、白血球、ウイルス、DNA、RNA、オルガネラ、その他多くのアプリケーションの分離や抽出のための密度勾配培地の幅広いポートフォリオを提供しています。

当社の製品ラインには、白血球分離用のHistopaque® ヨウ素化勾配培地、哺乳類細胞分離用の多糖類、哺乳類細胞およびオルガネラ分離用のコロイド状シリカ培地、DNA、ウイルス、タンパク質分離用の無機塩などがあります。



CELL SEPARATION WITH ACCUSPIN™ SYSTEM-HISTOPAQUE® MEDIA

人気の高いACCUSPIN™ System with Histopaque®-1077 は、放射線滅菌された遠心チューブを使用しています。®-1077は放射線滅菌された遠心チューブを使用し、多孔質の高密度ポリエチレン製バリアー(フリット)で2つの独立したチャンバーを形成するように設計されています。このシステムにより、抗凝固処理した全血を上部チャンバーに添加しても、下部チャンバー内のHistopaque®分離培地と混合する心配がありません。Histopaque®密度勾配培地は、リンパ球と単核球(すなわち単球)の明確な分離を可能にします。赤血球は凝集し、顆粒球はわずかに高張になり、沈降速度が増加し、その結果、ACCUSPIN™チューブの底でペレット化します。分離プロセスが完了すると、単離された細胞はさらに特性評価、培養、分析が可能となり、フローサイトメトリー、セルベースアッセイ、分子分析、医薬品や細胞治療開発などの下流のアプリケーションで使用することができる。

HISTOPAQUE® IODINATED GRADIENT MEDIA

Histopaque®培地は、異なる種類の細胞を密度に基づいて分離するように設計されており、製薬および生物医学研究において、特定の細胞集団の分離および精製に一般的に使用されています。Histopaque®培地は、滅菌濾過されたエンドトキシン試験済みのポリスクロースとジアトリゾ酸ナトリウムの溶液で、正確な密度に調整されています。これらのすぐに使用できる分離培地は、少量の全血から迅速かつ最適な生細胞の回収を容易にします。Histopaque®分離培地は、通常以下のようなアプリケーションに使用されます:末梢血単核球(PBMC)の分離:末梢血単核球(PBMC)の分離:Histopaque®培地は、全血サンプルからPBMCを分離するためによく使用されます。PBMCはリンパ球、単球、その他の有核細胞から構成されています。血液サンプルと遠心チューブの間にHistopaque®培地を重ねることで、遠心分離によりPBMCが赤血球や血小板などの他の血液成分から分離されます。細胞分画:Histopaque®培地は、混合細胞集団をその密度に基づいて明確な層に分画するために使用できる。遠心チューブに分離メディウムを重ね、細胞懸濁液を注意深く加えることにより、遠心分離によって異なる細胞タイプを示す明確な層が形成される。この技法は、さらなる分析や実験のために細胞を分離・精製するのに有用である。特定の細胞タイプの分離Histopaque®分離培地は、密度や特異的マーカーに基づいて特定の細胞集団を分離するために利用することができる。分離培地と細胞懸濁液を注意深く重ね合わせることにより、遠心分離で目的の細胞と不要な細胞を分離します。この技術は、特定の細胞タイプを研究する研究者や、希少な細胞集団を濃縮しようとする研究者にとって特に価値がある。ISO 9001品質管理のもとで生産されたHistopaque®製品は、ロット別の性能試験により、血液細胞株の一貫した選択的分離、歪みのない生存細胞の最適分離、外来細胞の干渉の最小化を実現します。

PERCOLL® COLLOIDAL SILICA MEDIA

コロイダルシリカ培地は、直径15~30 nmのポリビニルピロリドン(PVP)でコーティングされたシリカ粒子のコロイド懸濁液で、一般的に細胞の分離と精製のために生物医学および製薬研究で使用されます。PVPは生物学的物質との相互作用を減少させ、等張食塩水中でコロイドを安定化させる。Percoll®溶液の濃度を変えることで濃度を調整することができるので、研究者は特定の分離ニーズに合わせてグラジエントをカスタマイズすることができます。当社のPercoll®コロイド培地は浸透圧が極めて低く、密度による変化はほとんどありません。また、遠心分離によって形成されるグラジエントの浸透圧は、適量のスクロースや緩衝液を加えることで簡単に調整できます。Percoll® 勾配液は、細胞、細胞小器官、膜小胞、さらに一部のウイルスの等ピクニック分離に理想的です。

INORGANIC SALTS

イオン勾配液は、イオン勾配液またはイオン溶液としても知られ、細胞分離技術において、表面電荷または電気的性質に基づいて細胞を分離するために使用されます。これらの媒体は静電場または電荷差を作り出し、異なる表面電荷を持つ細胞の分離を可能にします。イオン勾配媒体を利用する細胞分離技術の例としては、電気泳動、誘電泳動(DEP)、等電点集束(IEF)などがある。培地と技術の具体的な選択は、分離される細胞の性質、望まれる分離メカニズム、および全体的な実験目的によって決まる。濃縮重金属塩からなるイオン勾配培地は、核酸のアイソピクニック分離にのみ使用される。塩化セシウムと硫酸セシウムが最も広く使われている重金属塩で、勾配密度は最大1.91 g/cm3。その他の塩としては、ヨウ化ナトリウム、臭化ナトリウム、ルビジウム塩などがある。

非イオン性ヨウ素添加密度勾配媒体

非イオン性ヨウ素添加密度勾配媒体は、生物学、生化学、臨床診断など様々な分野で分離精製技術に用いられる特殊な物質である。これらの培地は通常、密度勾配を形成するヨウ素化化合物をベースとしており、密度に基づいて粒子を分離することができます。非イオン性ヨウ素化密度勾配培地は、密度勾配遠心分離の原理に基づいて操作される。一般的な密度勾配媒体に使用されているヨウ素化化合物の多くは、トリヨード安息香酸のようなヨウ素化化合物に親水基を結合させた構造で、水溶液中で連続的な密度勾配を形成するように溶解度を高めています。当社は、生物学的粒子の脱水を最小限に抑える、より高密度のイオヘキソール溶液(例えば、Nycodenz®およびHistodenz™)を提供しています。

POLYHYDRIC ALCOHOLS

当社の多価アルコール非イオン勾配媒体のポートフォリオには、高分子の速度帯分離やウイルスや細胞小器官の等ピクニック分離に広く使用されているスクロース勾配があります。安定性、不活性、低コストなどの利点がありますが、溶液が濃縮され、高張性であるという欠点があります。

ポリサッカライド(POLYSACCHARIDES)

スクロース溶液の使用で生じる高浸透圧の問題を回避するために、最も一般的に使用されている多糖培地、Ficoll®を提供しています。Ficoll®合成ポリマーはポリビニルピロリドンでコーティングされたポリ(エチレングリコール)(PEG)で、密度勾配溶液の調製によく用いられる。Ficoll®溶液は、様々な生物学的および生化学的用途、特に細胞の分離や単離に広く利用されている。この溶液は、スクロース分子をエピクロロヒドリンで重合させ、平均分子量400,000の多糖類を得ることにより製造される。20%(w/v)以下のFicoll®溶液の密度は1.07g/cm3で、浸透圧的に不活性であると考えられている。Ficoll®溶液の主な欠点は、同等のショ糖溶液よりも粘性が高いことにある。Ficoll®溶液は、様々な製薬研究開発プロセスにおいて重要な役割を果たしており、細胞、ウイルス、その他の生物学的成分の分離、精製、特性解析を容易にし、創薬、免疫療法、その他の製薬アプリケーションの進歩に貢献している。細胞分離技術、特に末梢血やその他の細胞源から単核球を分離するために一般的に使用されている。細胞懸濁液をFicoll®密度勾配に重層し、遠心分離することにより、リンパ球や単球などの目的の細胞を他の細胞種や赤血球や顆粒球などの不要な成分から分離することができる。Ficoll®溶液は密度勾配遠心法(浮力密度に基づいて粒子や分子を分離する技術)にも使用されます。遠心分離中、粒子や細胞はFicoll®グラジエント中を移動し、それぞれの密度に対応する位置に沈降する。これにより、不均一な混合物中に存在する異なる成分の分離と分画が可能になります。


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