研究、診断、および製薬用途向けの細胞分離培地

ACCUSPIN™システムとHISTOPAQUE®培液を用いた細胞分離

ヒストパーク®-1077を用いた定評のあるACCUSPIN™システムは、多孔質の高密度ポリエチレン製仕切り（「フリット」）により2つの独立したチャンバーを形成するように設計された、放射線滅菌済みの遠心分離管を採用しています。このシステムにより、下部チャンバー内のヒストパーク®分離媒体と混ざってしまうリスクなしに、上部チャンバーへ抗凝固処理済みの全血を添加することができます。 ヒストパーク®密度勾配媒体を使用することで、リンパ球と単核球（すなわち単球）を明確に分離することができます。 赤血球は凝集し、顆粒球はわずかに高張性となるため、沈降速度が増加し、ACCUSPIN™チューブの底部に沈殿します。分離プロセスが完了すると、分離された細胞は、さらなる特性評価、培養、分析を行うほか、フローサイトメトリー、細胞ベースのアッセイ、分子解析、医薬品や細胞療法の開発などの下流工程に利用することができます。

HISTOPAQUE® ヨウ素化密度勾配液

Histopaque® 分離液は、密度に基づいて異なる細胞種を分離するように設計されており、特定の細胞集団の単離および精製を目的として、製薬および生物医学研究で広く使用されています。Histopaque® 分離液は、精密な密度に調整されたポリスクロースおよびジアトリゾエートナトリウムの溶液であり、無菌ろ過およびエンドトキシン検査を経ています。この即用型の分離液により、少量の全血から生存細胞を迅速かつ最適に回収することが可能になります。 ヒストパック®分離培地は、通常、以下のような用途に使用されます：末梢血単核細胞（PBMC）の単離：ヒストパック®培地は、全血サンプルからPBMCを単離するためによく用いられます。 PBMCは、リンパ球、単球、およびその他の有核細胞で構成されています。血液検体と遠心管の間にヒストパック®分離液を層状に充填することで、遠心分離によりPBMCが赤血球や血小板などの他の血液成分から分離されます。細胞分画：ヒストパック®分離液を使用すると、混合細胞集団をその密度に基づいて明確な層に分画することができます。 遠心管に分離液を層状に注入し、細胞懸濁液を慎重に添加することで、遠心分離を行うと、異なる細胞種を表す明確な層が形成されます。この手法は、さらなる分析や実験のために細胞を分離・精製するのに有用です。特定の細胞種の単離：ヒストパック®分離液は、密度や特定のマーカーに基づいて特定の細胞集団を単離するために利用できます。 分離媒体と細胞懸濁液を慎重に層状に重ねることで、遠心分離により目的の細胞を不要な細胞から分離することができます。この手法は、特定の細胞種を研究している研究者や、希少な細胞集団を濃縮しようとしている研究者にとって特に有用です。ISO 9001品質管理体制の下で製造され、ロットごとの性能試験を経たHistopaque®製品は、血液細胞株の一貫した選択的分離、生存しており変形していない細胞の最適な分離、および外来細胞による干渉を最小限に抑えることを実現します。

PERCOLL® コロイド状シリカ媒体

コロイド状シリカ媒体は、ポリビニルピロリドン（PVP）で被覆された直径15～30 nmのシリカ粒子のコロイド懸濁液であり、通常、生物医学および製薬研究における細胞の分離・精製に使用されます。 PVPは、粒子と生体物質との相互作用を低減し、等張生理食塩水中でコロイドを安定化させます。その密度はPercoll®溶液の濃度を変えることで調整可能であり、研究者は特定の分離ニーズに合わせてグラジエントをカスタマイズすることができます。 当社のPercoll®コロイド媒体は、浸透圧強度が極めて低く、密度による変化もほとんどありません。また、遠心分離によって形成される密度勾配の浸透圧は、適切な量のショ糖または緩衝液を添加することで容易に調整できます。Percoll®密度勾配は、細胞、細胞小器官、膜小胞、さらには一部のウイルスの等比重分離に最適です。

無機塩

イオン勾配媒体（イオン勾配またはイオン溶液とも呼ばれる）は、細胞の表面電荷や電気的特性に基づいて細胞を分離する細胞分離技術に使用されます。これらの媒体は静電場または電荷差を生成し、それによって異なる表面電荷を持つ細胞の分離を可能にします。イオン勾配媒体を利用する細胞分離技術の例としては、電気泳動、誘電泳動（DEP）、等電点焦点化（IEF）などが挙げられます。 具体的な培地や手法の選択は、分離対象となる細胞の性質、望ましい分離メカニズム、および実験全体の目的によって異なります。当社のイオン勾配培地は、高濃度の重金属塩で構成されており、核酸の等比重分離にのみ使用されます。塩化セシウムおよび硫酸セシウムは、最大1.91 g/cm³の密度勾配を持つ、最も広く使用されている重金属塩です。 その他に使用される塩には、ヨウ化ナトリウム、臭化ナトリウム、およびルビジウム塩などがある。イオン勾配媒体および手法の選定と設計には、pH、導電率、緩衝液の組成、ならびに対象となる細胞の電気的特性といった要因を慎重に考慮する必要がある。

非イオン性ヨウ素化密度勾配媒体

非イオン性ヨウ素化密度勾配媒体は、生物学、生化学、臨床診断など、さまざまな分野における分離・精製技術に使用される特殊な物質である。これらの媒体は通常、密度勾配を形成するヨウ素化化合物を基にしており、粒子の密度に基づいて分離を行うことを可能にする。 非イオン性ヨウ素化密度勾配培地は、密度勾配遠心分離の原理に基づいて機能します。一般的な密度勾配培地で使用されるヨウ素化化合物の多くは、水溶液中で連続的な密度勾配を形成するために溶解性を高める親水性基が結合された、トリヨード安息香酸のようなヨウ素化化合物を主成分としています。 当社は、生体粒子の脱水を最小限に抑える高密度のイオヘキソール溶液（例：Nycodenz®、Histodenz™）を提供しています。イオヘキソールは無毒であり、哺乳類細胞によって代謝されることはありません。

多価アルコール

当社の多価アルコール系非イオン性密度勾配媒体の製品ラインナップには、高分子の速度ゾーン分離や、ウイルスおよび細胞小器官の等密度分離に広く使用されているスクロース密度勾配が含まれています。その利点としては、安定性、不活性、低コストが挙げられますが、一方で、溶液が濃縮され、高張性になるという欠点もあります。 また、対応するスクロース溶液よりも密度が低いグリセロール溶液も提供しており、これにより特定の酵素の活性を阻害しつつ、真空による除去が容易に行えます。

多糖類

当社は、ショ糖溶液の使用に伴う高い浸透圧の問題を回避するために、最も一般的に使用されている多糖類媒体であるFicoll®を提供しています。Ficoll®合成ポリマーは、ポリビニルピロリドンでコーティングされたポリ（エチレングリコール）（PEG）であり、密度勾配溶液の調製に広く使用されています。Ficoll®溶液は、さまざまな生物学および生化学の応用分野、特に細胞の分離および単離において広く利用されています。 この溶液は、スクロース分子とエピクロロヒドリンを重合させることで製造され、平均分子量400,000の多糖類が生成されます。20％（w/v）未満のFicoll®溶液は密度が1.07 g/cm³であり、浸透圧的に不活性であると見なされます。 Ficoll®溶液の主な欠点は、同等のショ糖溶液に比べて粘度が高い点にある。Ficoll®溶液は、さまざまな医薬品の研究開発プロセスにおいて重要な役割を果たしており、細胞、ウイルス、その他の生物学的成分の単離、精製、特性評価を促進することで、創薬、免疫療法、その他の医薬品応用分野の進歩に貢献している。これらは細胞分離技術、特に末梢血やその他の細胞源から単核細胞を単離するために広く用いられている。 細胞懸濁液をFicoll®密度勾配上に層状に配置し、遠心分離を行うことで、リンパ球や単球などの目的細胞を、他の細胞種や赤血球、顆粒球などの不要な成分から分離することができます。Ficoll®溶液は、浮遊密度に基づいて粒子や分子を分離する技術である密度勾配遠心分離にも使用されます。 遠心分離中、粒子や細胞はフィコール®の密度勾配中を移動し、それぞれの密度に応じた位置に沈降します。これにより、不均一な混合物中に存在するさまざまな成分の分離および分画が可能となります。