덜베코 수정 이글 배지 F12 (DMEM F12)
최근 몇 년간 연구자들은 혈청 대신 영양소, 성장 인자 및 호르몬을 보충한 무혈청 배지에서 다양한 세포주를 배양한 사례를 보고했다. Mather와 Sato(BBRC, 1985)는 인슐린, 트랜스페린, 표피 성장 인자, 황체형성호르몬 또는 난포자극호르몬, 소마토메딘, 성장 호르몬을 함유한 무혈청 배지에서 레이디그 세포와 세르톨리 세포를 성공적으로 배양했다고 보고했다.
호르몬의 종류와 농도는 연구 대상 세포의 유형에 따라 다르지만, 이러한 연구에 최적의 배지로 확인된 것은 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)과 Ham's F-12 영양 혼합물을 1:1 비율로 혼합한 것이었습니다. DMEM/F12 배지로 알려진 이 혼합물에는 21종의 아미노산, 10종의 비타민, 포도당, 철, 아연 등이 포함되어 있습니다.
DMEM/F12는 DMEM보다 영양분이 더 풍부하고 성분이 더 복잡한 배지입니다. 또한, 혈청을 제거함으로써 발생하는 완충 능력의 손실을 보충하기 위해 최종 농도 15 mM의 HEPES 완충액을 배지에 포함시킬 수 있습니다. 이 합성 배지에는 혈청, 단백질, 지질 또는 성장 인자가 전혀 포함되어 있지 않으므로, 세포 배양 유형에 따라 소 태아 혈청(FBS)을 보충해야 할 수도 있습니다. 일부 시판되는 배지에는 글루타민이나 페놀 레드가 포함될 수도 있고 포함되지 않을 수도 있습니다.
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DMEM/F12의 용도
고급 기초 배지인 DMEM/F12는 3D 오가노이드 배양이나 줄기세포 배양과 같이 저혈청 또는 무혈청 배지가 필요한 응용 분야에서 자주 사용됩니다. 또한 DMEM/F12 배지는 저혈청 또는 무혈청 조건이 필요한 세포 형질 도입을 최적화하는 데에도 활용될 수 있습니다.
혈청 농도를 낮추거나 혈청이 없는 환경이 필요한 줄기세포 배양 외에도, 1차 세포를 DMEM/F12 배지에서 배양할 수 있습니다. 여기에는 섬유아세포, MDCK 세포, 신경 세포주, 신경교세포 및 평활근 세포가 포함되며, 이들은 고농도의 혈청을 보충한 1차 세포와 동등하거나 더 우수한 성장 및 기능을 나타냅니다. DMEM/F12 배지에서 배양된 세포는 또한 고농도 혈청 조건에서 배양된 세포와 동일한 세포 형태를 보입니다.