세포 이동 및 침습 분석법

섹션 개요

• 보이든 챔버 분석법
  
• 세포 이동 분석법
  
• 세포 침입 분석법
  
• 미세유체 이동 장치
  
• 체외 스크래치 분석법
  
• ECM 단백질
  
• 참고문헌

전이란 종양 세포와 그 미세환경에서 발생하는 여러 변화의 누적된 결과로, 이를 통해 세포가 이동하여 건강한 숙주 조직으로 침습할 수 있게 됩니다. 증식하는 신생 세포가 원발성 종양 부위를 벗어나려고 시도함에 따라, 국소적인 세포 접착과 주변 조직으로의 침습이 발생해야 합니다¹. 혈관 내피를 관통하여 혈류로 진입하기 전에, 암세포는 ECM 단백질 성분을 분해하여 국소 조직을 침습하고, 궁극적으로 기저막을 통과해야 합니다². 일단 혈류에 진입하면, 이러한 세포들은 이차 부위에 전이성 콜로니를 형성할 수 있습니다.

보이든 챔버 분석법

가장 널리 인정받는 세포 이동 기법은 보이든 챔버 분석법³이다. 고전적인 트랜스웰(Transwell) 이동 분석 시스템은 한쪽 끝이 다공성 막으로 밀봉된 중공 플라스틱 챔버를 사용한다. 이 챔버는 배지 및/또는 화학유인물질이 들어 있을 수 있는 더 큰 웰 위에 매달려 있다. 세포를 챔버 내부에 넣으면 세포가 기공을 통해 막의 반대편으로 이동하게 된다. 그런 다음 이동한 세포를 염색하여 계수한다.

세포 이동 및 침윤 분석 키트

밀리포어(Millipore)의 QCM™ 세포 이동 및 침투 분석 키트는 약리학적 제제의 스크리닝, 인테그린, 화학유인물질 또는 세포 이동을 담당하는 기타 접착 수용체의 평가를 포함하여, 세포 이동, 접착 및 침투에 영향을 미치는 다양한 요인을 정량적으로 측정할 수 있는 신속하고 효율적인 시스템을 제공합니다. 이 키트는 10년 이상 연구자들에게 일관된 결과를 제공해 왔으며, 4,000편 이상의 학술 논문에 인용되었습니다.

세포 이동 분석법: 화학 농도 구배(화학유인) 또는 ECM 단백질 구배(접착유인)를 향한 체외 세포 이동을 편리하고 민감하게 정량화할 수 있습니다.

세포 침투 분석: 기저막 ECM 단백질이나 내피 세포와 같은 세포층을 통한 체외 세포 침투를 편리하고 민감하게 정량화할 수 있습니다.

세포에 적합한 기공 크기를 선택하는 방법:

• 3 μm 기공 크기는 백혈구 또는 림프구 이동에 적합합니다.
• 5 µm 기공 크기는 일부 섬유아세포나 NIH-3T3 및 MDA-MAB 231 세포와 같은 암세포에 적합합니다. 또한 단핵구 및 대식세포에도 적합합니다.
• 8 μm 기공 크기는 대부분의 세포 유형에 적합합니다. 이 기공 크기는 대부분의 상피세포 및 섬유아세포의 최적의 이동을 지원합니다. 참고 - 8 μm 기공 크기는 림프구 이동 실험에는 적합하지 않습니다.

세포 이동 분석

 세포 침투 분석법

미세유체 이동 장치

Millicell® µ-Migration 분석 키트는 기존의 멀티웰 이동 분석법의 한계를 극복합니다. µ-Migration 슬라이드의 혁신적인 설계는 일관되게 선형적이며 48시간 이상 지속되는 안정적인 확산에 의한 농도 구배를 형성합니다. 유리와 유사한 높은 광학적 특성을 지닌 플라스틱으로 제작된 µ-Migration 슬라이드는 비디오 현미경 분석을 위해 특별히 설계되었습니다. 특정 시간 간격으로 관찰 영역의 이미지를 획득할 수 있어, 세포 이동을 실시간으로 모니터링하고 정량적으로 측정할 수 있습니다.

ECM 단백질

세포외 기질(ECM) 단백질은 세포 내에서 생성된 후 주변 세포 배양액으로 분비되며, 세포 접착, 분화, 증식, 이동, 침습 및 생존을 포함한 다양한 세포 기능을 능동적으로 조절합니다. 체외 배양에서 ECM의 주요 용도는 세포 접착을 촉진하는 동시에 세포 생존력을 유지하고, 후속 세포 기반 응용을 위해 세포 증식을 극대화하는 것입니다.

• 콜라겐
• 라미닌
• 피브로넥틴
• 비트로넥틴
• 엘라스틴
• 기저막 추출물