Anti-GFP

Mezcla de dos anticuerpos monoclonales de alta afinidad seleccionados por su rendimiento en la detección de GFP y las proteínas de fusión GFP.

La proteína fluorescente verde (GFP) es una proteína de 27 kDa espontáneamente fluorescente aislada originalmente de la medusa Aequorea victoria. La clonación molecular del gen de la GFP y su subsiguiente expresión en sistemas heterólogos ha establecido la GFP como una molécula reportera valiosa para la visualización in vivo de eventos de expresión génica en una amplia variedad de tipos de células y de organismos. Como la GFP no requiere sustratos ni cofactores añadidos, la fluorescencia verde de la GFP puede detectarse fácilmente utilizando luz azul o UV después de la expresión en células procariotas o eucariotas. Además, se han comunicado diversas formas mutantes de la GFP con propiedades espectrales únicas (por ejemplo, mayor señal de la fluorescencia y desplazamientos en los espectros de excitación y de emisión).

Anticuerpo monoclonal para la detección de las formas naturales y mutantes de la GFP y las proteínas de fusión GFP utilizando:

• Inmunoprecipitación
• Inmunoelectrotransferencia (western blot)
• Inmunotinción

Subtipo: Los dos clones son IgG_{1 de ratón}κ

Contenido
Mezcla de dos anticuerpos monoclonales suministrada como un liofilizado blanco que contiene 200μg de IgG anti-GFP total.
El anti-GFP es una mezcla de dos clones (7,1 y 13,1).

Concentración de trabajo: La concentración de trabajo del anticuerpo depende de la aplicación y del sustrato.
Las siguientes concentraciones deben considerarse una orientación:

• Inmunoelectrotransferencia: dilución 1:1000
• Inmunoprecipitación: de 2 a 10 μg

Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25 °C

Añada 500 μl de agua bidestilada para una concentración final de 0,4 mg/ml.
Rehidrate en hielo durante 30 minutos.

La funcionalidad y la pureza del anti-GFP se prueba con respecto a un patrón de referencia para confirmar la calidad de cada nueva preparación de reactivo.
Pureza: Ambos anticuerpos monoclonales de ratón anti-GFP (clones 7.1 y 13.1) tienen una pureza >95 %, determinada por SDS-PAGE y HPLC de intercambio iónico.

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