cOmplete^™ Cóctel de inhibidores de proteasas

Rendimiento probado con extracto pancreático.

El cóctel inhibidor de proteasas cOmplete^™ se ha utilizado como un componente del

• el tampón de lisis para la homogeneización del músculo liso cavernoso (CSM) de rata para obtener las fracciones membranosa y citosólica
• el tampón A frío para preparar los extractos citosólico y nuclear
• el tampón de lisis para homogeneización de tejidos para determinar la expresión proteica mediante inmunoelectrotransferencia
• disolución salina tamponada con fosfato (PBS) para la lisis de retina de rata para enzimoinmunoanálisis absorbente (ELISA)

cOmplete^™ se utiliza para la inhibición de serín y cisteín proteasas y de metaloproteínasas en extractos bacterianos, de levaduras y de células vegetales y de mamíferos.
cOmplete contiene inhibidores reversibles e irreversibles de proteasas. Por consiguiente, recomendamos añadir cOmplete a todas las disoluciones tampón de reserva y las disoluciones normalmente protegidas con inhibidores de proteasas, y no  tan sólo durante las etapas de purificación iniciales.
cOmplete contiene EDTA (1 comprimido produce EDTA  1 mM en 50 ml). Por consiguiente, el tampón de extracción no deberá contener cationes divalentes como el Ca²⁺, el Mg²⁺o el Mn²⁺, o la inhibición de las metaloproteasas podría ser incompleta. Si se va a purificar la proteína de interés mediante IMAC (cromatografía por afinidad con metal inmovilizado), por ejemplo, las proteínas recombinantes etiquetadas con poli-his, tendrá que eliminarse el EDTA (por ejemplo, mediante diálisis) antes de la cromatografía.
También podría utilizarse el producto cOmplete carente de EDTA. Estos comprimidos son idénticos a los cOmplete, con la excepción de que no contienen EDTA ni otros quelantes.
Los comprimidos cOmplete inhiben la actividad proteolítica en volúmenes de extracción grandes (hasta 50 ml). Si se trabaja con volúmenes menores (hasta 10 ml), recomendamos utilizar cOmplete, Mini. La composición del comprimido cOmplete Mini es idéntica a la del comprimido cOmplete normal.

Mezcla de diversos inhibidores de proteasas con amplia especificidad inhibidora. Para la inhibición de las serín y cisteín proteasas y las metaloproteasas en extractos bacterianos, de células de mamífero, de levaduras y de células vegetales.

Utilice los comprimidos de inhibidores de proteasas cOmplete para proteger sus proteínas de una gran variedad de proteasas. En solo unos minutos, la actividad proteolítica desinhibida puede degradar la proteína que se ha tardado días en aislar. Cada uno de estos cómodos comprimidos hidrosolubles contiene una mezcla de inhibidores de proteasas que inhiben la actividad proteolítica de la mayor parte de tipos celulares: animales, vegetales, levaduras y bacterias. No es necesario pesar ni medir, lo que garantiza resultados uniformes.

• Facilidad de uso: sólo tiene que echar un comprimido de disolución rápida en su disolución tampón.
• Protección completa: protección instantánea de sus proteínas frente a una amplia gama de proteasas.
• Flexibilidad: protección de las proteínas en extractos de casi cualquier tejido o célula: animales, vegetales, levaduras, bacterias u hongos.
• Seguridad: elija inhibidores no tóxicos que no le planteen riesgos a usted ni a quienes le rodean.
• Idoneidad para purificación mediante cromatografía por afinidad IMAC: purificación de proteínas etiquetadas con poli-histidina con una resina de purificación cOmplete con la etiqueta His.

Los comprimidos de inhibidores de proteasas cOmplete inhiben un amplio espectro de proteasas de serina y de cisteína, y metaloproteínasas, así como calpaínas. Debido a la composición optimizada de los comprimidos, demuestran excelentes efectos inhibidores y son ideales para la protección de proteínas aisladas de tejidos animales, vegetales, levaduras y bacterias. Los comprimidos cOmplete contienen EDTA e inhibidores reversibles e irreversibles de proteasas.

La eficiencia de la inhibición se analiza rápida y sensiblemente con el sustrato universal de las proteasas. Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Mezcla patentada de diversos inhibidores de proteasas con amplia especificidad inhibidora.

Comprimidos en viales de vidrio

Concentración de trabajo: 1 comprimido por 50 ml de disolución de extracción
Disolución de trabajo: Preparación de la disolución de trabajo:

Un comprimido completo de inhibidor de proteasas cOmplete basta para la inhibición de la actividad proteolítica en 50 ml de la disolución de extracción. Si hay mucha actividad proteolítica, deberá utilizarse un comprimido por 25 ml de tampón de extracción. Los comprimidos pueden añadirse directamente al medio de extracción. Otra posibilidad es preparar una disolución de reserva (concentración x 25).

Preparación de la disolución de reserva (concentración x 25):

Disolución de un comprimido del inhibidor de proteasas cOmplete en 2 ml de agua destilada o en 2 ml de tampón fosfato 100 mM, pH 7,0. La disolución de reserva también puede prepararse en tampón Tris 10 mM, pH entre 7,2 y 7,5.
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): La disolución de trabajo puede conservarse entre 2 y 8 °C durante1 a 2 semanas, o al menos 12 semanas entre -15 y -25 °C.

Solubles en disoluciones tampones acuosas; o añadir directamente a los medios de extracción. Otra alternativa es preparar disoluciones de reserva 25x en 2 ml de agua o de tampón fosfato 100 mM, pH 7,0. La disolución de reserva es estable durante 1 a 2 semanas entre 2 y 8 °C o al menos 12 semanas entre -15 y -25 °C; también puede utilizarse en disoluciones que contengan tiol entre 15 y 25 °C.

cOmplete is a trademark of Roche