FastStart Universal Probe Master (Rox)

Mezcla de reacción universal de inicio en caliente y lista para usar para qPCR y RT-qPCR en todos los sistemas de PCR en tiempo real que requieran normalización con ROX.

FastSTART^™ Universal Probe Master (ROX) incluye un nuevo colorante de referencia que permite su uso en todos los instrumentos de PCR en tiempo real que requieran normalización con ROX, sin modificación ni ajuste del instrumento o protocolo específico. Esta mezcla maestra concentrada x2, lista para usar, contiene todos los reactivos (salvo los cebadores, sondas y muestras) requeridos para realizar análisis de detección cuantitativa de ADN en tiempo real, incluida la qPCR y la qRT-PCR en dos etapas, en el formato de detección de sonda de hidrólisis. FastStart^™ Universal Probe Master (Rox) genera excelentes resultados en equipos como el sistema de PCR en tiempo real Applied Biosystems 7900 HT Fast o el sistema de PCR en tiempo real Applied Biosystems 7500. Este producto no está indicado para usar con los instrumentos LightCycler^®.

Se ha demostrado que los protocolos de inicio en caliente mejoran de manera significativa la especificidad, la sensibilidad y el rendimiento de la PCR. Grupos de bloqueo termolábiles en algunos de los restos de aminoácido de la ADN polimerasa Taq FastStart^™ inactivan a temperatura ambiente la enzima modificada. Por consiguiente, no hay elongación durante el periodo en el que los cebadores pueden unirse de manera inespecífica. La ADN polimerasa Taq FastStart^™ se activa eliminando los grupos bloqueantes a una temperatura elevada (es decir, una etapa previa a la incubación a +95°C).

FastStart^™ Universal Probe Master (Rox) se ha utilizado:

• en reacciones en cadena de la polimerasa en tiempo real cuantitativas (qRT-PCR) TaqMan^® para la cuantificación de miRNA endógenos, como MIR376B, MIR376A y MIR181A
• en PCR con transcriptasa inversa (RT-PCR) para estudiar la expresión del factor de necrosis tumoral (TNF) en todo el tejido sinovial de los pacientes con artritis inflamatoria periférica indiferenciada (UPIA)
• para la amplificación y detección de cualquier ADN o ADNc diana, incluidas las que son ricas en GC o AT, por PCR cuantitativa

Combine esta mezcla maestra con el kit Transcriptor para síntesis de la cadena primaria del ADNc (Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit) (Roche) para conseguir resultados excelentes en la qRT-PCR en dos etapas.

• Aumenta la sensibilidad y la especificidad de la qPCR.

Produce valores umbral de ciclo (Ct) más bajos.

• Uso de la mezcla maestra con cualquier análisis realizado con sonda.

Consigue resultados sensibles y específicos en análisis con las sondas Universal ProbeLibrary o cualquier otra sonda de hidrólisis.

• Amplifica y detecta una amplia variedad de ADN y ADNc específicos.

Amplifica fragmentos de hasta 500 pb de longitud, entre ellos los fragmentos ricos en GC y AT.

• Visualiza los productos de amplificación en geles de agarosa.

• Utiliza estaciones de pipeteo robótico para configurar las reacciones de qPCR.

Utiliza una mezcla maestra que es estable a temperatura ambiente durante tiempos de preparación de la reacción ampliados.

• Evita los resultados falsos positivos que producen contaminación por arrastre.

Utilizar esta mezcla que contiene dUTP con uracil-ADN glucosilasa para eliminar el ADN contaminante arrastrado de las reacciones de PCR anteriores.

Prueba de la función: Se analiza el rendimiento de cada lote en la qPCR utilizando tres moldes: uno rico en GC, uno rico en AT y un molde largo (aproximadamente 440 pb).

FastStart Universal Probe Master (Rox), mezcla maestra concentrada x2 que contiene ADN polimerasa Taq FastStart, tampón de reacción, nucleótidos (dATP, dCTP, dGTP, dUTP) y un colorante de referencia.

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicado para procedimientos diagnósticos.

FastStart is a trademark of Roche

LightCycler is a registered trademark of Roche

TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.