Anticuerpo anti-tubulina acetilada, monoclonal de ratón antibody produced in mouse

El anticuerpo monoclonal anti-tubulina acetilada (isotipo IgG2b de ratón) se obtiene del hibridoma 6-11B-1 producido por la fusión de células de mieloma de ratón y esplenocitos de un ratón inmunizado con tubulina acetilada del brazo exterior de Strongylocentrotus purpuratus (erizo de mar). La tubulina es un heterodímero que consta de una α-tubulina y una β-tubulina; cada subunidad tiene un peso molecular de 50 000 y comparten una homología considerable.

La α-tubulina también denominada tubulina α 4a (TUBA4A), se ha cartografiado en el cromosoma humano 2q35. El gen codifica un miembro de la familia α -tubulina que contiene 448 aminoácidos. La TUBA4A pertenece a la subfamilia de la tubulina, que es el principal bloque de construcción de los microtúbulos. La subunidad α de la tubulina tiene un peso molecular de 50 000.

tubulina acetilada del brazo exterior de Strongylocentrotus purpuratus (erizo de mar).

El anticuerpo monoclonal anti-tubulina acetilada producido en ratón se ha utilizado en:

• inmunotransferencia por puntos (dot blot)
• inmunofluorescencia
• inmunoelectrotransferencia (western blot)
• inmunocitoquímica
• enzimoinmunoanálisis de adsorción (ELISA)
• radioinmunoanálisis en fase sólida (RIA)
• microscopia electrónica

El anticuerpo monoclonal anti-tubulina acetilada se ha utilizado también en la tinción de cortes incluidos en parafina y teñidos con X-gal–para realizar inmunohistoquímica.

El anticuerpo se ha utilizado para detectar α-tubulinas acetiladas de muchos organismos, como protistas, plantas, invertebrados y vertebrados. El anticuerpo reconoce un epítopo localizado en la isoforma α3 de la α-tubulina del axonema de Chlamydomonas , en cuatro residuos de Lys⁴⁰ cuando este aminoácido está acetilado. Una secuencia muy similar a la detectada por el anticuerpo en Chlamydomonas se encuentra en la mayoría de las α-tubulinas, pero la correspondiente región es notablemente divergente en algunas isoformas de la α-tubulina del pollo, Drosophila, y la levadura. Alguna vez, el epítopo reconocido por el anticuerpo puede estar ausente o enmascarado, como ocurre en la línea de células epiteliales PtK₂ de la rata canguro.

La tubulina acetilada está asociada con el montaje del axonema en una variedad de organismos. La tubulina acetilada podría desempeñar un papel crucial en la diferenciación de la estructura y la función de los microtúbulos. La modificación postraduccional de la α-tubulina, es decir, la adición reversible de un grupo acetilo a la Lys40, por una acetilasa específica, produce la tubulina acetilada.

Disolución en solución salina tamponada con fosfato 0,01 M, pH 7,4, que contiene acida sódica 15 mM.

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