跳转至内容
Merck
主页应用微生物检测制药行业中的支原体检测

制药行业中的支原体检测

支原体污染是生命科学研究和制药行业中许多细胞培养系统普遍存在且反复出现的问题。支原体在培养基中可增殖至高滴度，却不会表现出浑浊等典型的细菌污染迹象。其对培养细胞的影响包括代谢改变、增殖减缓以及染色体畸变。 简而言之，支原体污染会损害受影响细胞系的数据有效性，并影响生命科学研究结果的可靠性。因此，支原体检测以及由此确保细胞培养无污染，对于基于细胞的研究以及以消费者健康为首要关切的产品制造而言，至关重要。

索取信息

精选分类

符合 ISO 21150、ISO 21567、FDA-BAM、EP、USP 和 JP 标准的颗粒状麦康基琼脂
微生物培养基

微生物培养基是一种由多种物质组成的混合物，能够促进和支持微生物的生长与分化。

选购商品
用于微生物质量控制的无菌检测设备
无菌检测耗材、培养基及仪器

对于按照GMP生产且宣称无菌的产品而言，无菌检测是验证过程中不可或缺的一部分。

选购商品
用于热原检测的 PyroMAT™ 单核细胞活化试验
热原检测

确保安全：热原检测对药品和医疗器械至关重要。单核细胞活化试验（MAT）可检测内毒素和非内毒素类热原。

选购商品
MAS-100® 微生物空气采样器
环境监测与无菌工艺模拟

探索适用于制药生产的高级环境监测和无菌工艺仿真解决方案。借助我们专为洁净室、隔离器及RABS系统设计的专用工具和培养基，确保符合GMP规范。

选购商品
生物安全检测服务

生物安全检测服务

提供生物安全检测服务，对单克隆抗体、细胞与基因疗法及疫苗原料进行检测，以确保其不含可能导致下游加工过程中发生灾难性故障的杂质或意外结果，包括：支原体检测。

 

关于支原体

支原体是已知最小的细菌之一，能够穿过孔径为0.2 µm的滤膜。这些微生物可在有氧或兼性厌氧条件下生长。

支原体可呈寄生或腐生性。某些物种（例如肺炎支原体）具有致病性，会引起人类肺炎及其他呼吸系统疾病。生殖支原体据推测与盆腔炎有关。由于缺乏细胞壁，支原体对青霉素或其他作用于该结构的抗生素不敏感。 为了稳定其细胞质膜，大多数支原体需要胆固醇类物质，它们从环境中摄取这些物质，通常是从动物宿主那里获取胆固醇。许多支原体菌株对多种其他抗生素也具有耐受性。

文档搜索
需要更详细的信息吗？

请访问我们的文档搜索页面，查阅数据表、证书和技术文档。

查找文档

支原体污染的来源

在实验室和生产过程中，支原体污染的来源极难控制。某些支原体菌种存在于人体皮肤上，若无菌操作规范不严，便可能被带入细胞培养中。此外，支原体还可能通过受污染的培养辅料（如胎牛血清）进入培养体系，最常见的情况则是通过其他受污染的细胞培养物传播。 一旦细胞培养物中含有支原体，这些微生物就会通过培养操作过程中产生的气溶胶和颗粒物迅速扩散，并污染实验室的其他区域。严格遵守良好的实验室无菌操作规范至关重要，并且强烈建议对培养物进行例行检测，以有效控制生产区域内的支原体污染。

为何制药行业需要进行支原体检测？

使用真核细胞生产疫苗的生物制药设施，必须对其细胞库、病毒种子批以及疫苗原液进行支原体污染检测。该属细菌会感染真核细胞，干扰其生长和代谢。当支原体干扰疫苗生产时，可能会影响蛋白质的质量和产量，更重要的是，会导致接种最终疫苗产品的患者出现不良反应。

除非在生产过程中及早发现，否则生物反应器中的支原体污染可能会导致大量时间、材料和收入的损失。如果没有严格的检测流程，生物制药生产批次中的支原体污染极难被发现，因为支原体的存在通常不会导致培养基的pH值变化或出现肉眼可见的浑浊。 药典规定的支原体检测方法包括培养法和指示细胞法两种检测手段。如果仅使用两种培养基进行分析，建议将FREY培养基与FRIIS培养基结合使用。

支原体检测方法

在质量控制的各个环节，对生物制药、疫苗、细胞培养物和病毒培养物进行支原体检测至关重要。最常见的三种检测方法是：

  • 支原体培养法：将优化后的支原体细菌培养基接种待测样本
  • DNA染色法：使用Hoechst或DAPI对支原体细胞核进行反染色，并通过荧光显微镜成像
  • PCR（聚合酶链反应）：若样本中存在支原体，则通过该方法扩增其DNA

根据EP 2.6.7和USP 63检测支原体的工作流程

* 接种后的几天内，将每份液体培养基进行传代培养，向每种固体培养基的至少1块平板上接种0.2 mL。在试验的第6至8天、第13至15天以及第19至21天之间重复该操作。 每2或3天观察一次液体培养基，若出现颜色变化，则进行传代培养。 注：此外，每种固体和液体培养基均需设置一个阳性对照和一个阴性对照，培养时间为14天。

* 接种后的几天内，将每份液体培养基进行传代培养，向每种固体培养基的至少1块平板上接种0.2 mL。在试验的第6至8天、第13至15天以及第19至21天之间重复该操作。每2或3天观察一次液体培养基，若出现颜色变化，则进行传代培养。
注：此外，每种固体培养基和液体培养基均需设置一个阳性对照和一个阴性对照，培养时间为14天。

用于药典标准支原体检测的即用型培养基

我们提供全套即用型液体和固体培养基，可满足根据《欧洲药典》6.1版（2.6.7）和《美国药典》第35版（63）检测支原体的需求。无需任何额外制备步骤，我们的即用型支原体培养基可确保产品品质稳定，并附有针对每批次的分析证书，实现全程可追溯。

由于成分特性，支原体培养基的保质期通常远短于大多数其他用于微生物质量控制的培养基。 我们即用型 Friis、Frey 和 Hayflick 液体及固体培养基的保质期已延长至：琼脂平板为 4 个月，肉汤培养基为 6 个月。体验我们全系列保质期更长的即用型培养基，让支原体检测更加轻松。

索取信息
相关服务
制药微生物学方法开发和验证
如果您需要针对新产品确立微生物检测方法（S.O.P.），或针对经证存在抗菌效应和/或过滤问题而改良这类微生物检测方法（S.O.P.），我们的应用实验室可为您开发符合适用监管要求（药典）的方法。我们因卓越的产品质量享誉全球，但在开发新方法时同样遵循最高标准，恪守严苛的监管要求。