内切酶

内切酶用于将DNA和RNA切割成更小的片段,从而降低生物加工工作流程和研究应用中的核酸污染水平。尽管存在多种天然来源,但这些内切酶制剂可能带来挑战,因为它们可能含有蛋白酶活性及病毒污染物。 Benzonase® 内切核酸酶是一种源自腐生沙雷氏菌(Serratia marcescens)的基因工程核酸酶,它消除了使用天然来源内切核酸酶的风险,并能降解所有形式的 DNA 和 RNA。
在适当的反应条件下,Benzonase® 内切核酸酶可将所有形式的 DNA 和 RNA(单链、双链、线性及环状)降解为长度约为 3 至 5 个碱基对的寡核苷酸。该酶具有极高的比活性,且无可检测到的蛋白水解活性。
对于某些生产模板,使用高于生理水平的盐浓度(200mM NaCl)可能更有利。 Benzonase®耐盐内切核酸酶可在腺相关病毒(AAV)载体生产过程中,用于中段裂解和DNA消化步骤,适用NaCl盐浓度范围为200mM至1000mM。作为Benzonase®产品系列的新成员,该产品与所有经过测试的表面活性剂均兼容,包括作为Triton™ X-100替代品的Deviron®表面活性剂。
生物加工应用
Benzonase® 内切核酸酶非常适合苛刻的生物加工应用。它能将核酸降解至远低于世界卫生组织(WHO)和美国食品药品监督管理局(FDA)要求的 200 碱基对片段大小,在 GMP IPE-PQG 条件下放行,并在 FDA 备案了药物主文件(DMF),可在监管申报中引用。
该产品在广泛的操作条件和应用场景下均表现出色,包括:
- 病毒疫苗和病毒载体疫苗的纯化
- 细胞和基因疗法的纯化
- 溶瘤病毒的纯化
- 从蛋白质及其他生物制品中去除DNA和RNA
- 从蛋白质及其他生物制品中去除宿主细胞DNA
IPEG PQG GMP级Benzonase®内切酶提供三种版本,以满足不同的生产需求。所有版本均属于Emprove®计划,该计划有助于准备监管申报所需的文件(表1)。
Benzonase®内切核酸酶在大肠杆菌W3110表达系统中制备,病毒污染风险极低。
- Benzonase® 内切核酸酶 Emprove® Expert
- Benzonase® 内切酶 Safety Plus Emprove® Expert 在化学定义培养基中生产,每批产品均经过检测,确保不含外来病毒和支原体。
- Benzonase® 耐盐内切酶同样在化学定义培养基中生产,每批产品均经过支原体检测;可根据要求进行外来病毒检测。
研究应用
Benzonase® 内切核酸酶可用于多种研究应用,包括:
- 从微生物组样本中去除宿主DNA
- 提高微生物组研究中微生物分类群的鉴定准确性
- 预防疫苗研究过程中的凝集现象
- 在重组蛋白提取流程中降低裂解液粘度,从而提高目标蛋白的收率
提供多种高纯度、高浓度的 Benzonase® 内切核酸酶产品供选择。
Benzonase® 内切核酸酶还可与蛋白质提取试剂组合包装,以进一步简化工作流程。
- BugBuster® Master Mix:含 Benzonase® 内切核酸酶和 rLysozyme 溶液的 BugBuster® 蛋白质提取试剂
- BugBuster® HT 蛋白质提取试剂:BugBuster 蛋白质提取试剂和 Benzonase® 内切核酸酶
- CelLytic™ B Plus 试剂盒:溶菌酶、Benzonase® 内切核酸酶和蛋白酶抑制剂
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Benzonase® 内切酶——生物制药生产中去除 DNA 的智能解决方案,30 多年来已充分证明了其价值。
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