Analyse de la santé cellulaire
Les réactifs, kits et outils d’analyse de la santé cellulaire permettent de mesurer des indicateurs généraux et spécifiques de la vigueur des cultures cellulaires. Les tests de viabilité peuvent être utilisés comme mesure générale de la santé cellulaire, ou pour évaluer les effets d’un traitement en complément de tests de cytotoxicité. Les tests de prolifération s’appuient souvent sur la synthèse d’ADN et la division cellulaire pour mesurer l’activité métabolique des cellules en réponse à des conditions ou à des traitements. Les kits de cytotoxicité peuvent recourir à des mesures de bioréduction pour évaluer l’activité métabolique.
La contamination des cultures est l’un des obstacles les plus courants à une culture cellulaire efficace et fiable. Bien que certains contaminants puissent être détectés par une inspection microscopique minutieuse des cultures, des contaminants tels que les mycoplasmes échappent aux méthodes de détection visuelle. Les cultures doivent donc être systématiquement contrôlées à l’aide de kits et de réactifs permettant de détecter de manière fiable les contaminants microbiens. Les réactifs qui minimisent et éliminent la contamination lorsqu’elle survient sont des éléments indispensables dans les salles de culture, qui viennent renforcer les techniques de stérilité et les bonnes pratiques en matière de culture cellulaire.
Products
Tests de viabilité et de prolifération cellulaires
Les tests permettant de mesurer la prolifération et la viabilité cellulaires sont utilisés pour surveiller la réponse et l'état des cellules en culture après un traitement par divers stimuli. Le choix approprié d'une méthode de test dépend du nombre et du type de cellules à évaluer, ainsi que du résultat attendu. Les tests de prolifération cellulaire peuvent permettre de suivre le nombre de cellules au fil du temps, le nombre de divisions cellulaires, l'activité métabolique ou la synthèse d'ADN. Le comptage cellulaire à l’aide de colorants de viabilité tels que le bleu de trypan ou la calcéine-AM permet de déterminer à la fois le taux de prolifération et le pourcentage de cellules viables. Le diacétate de 5(6)-carboxyfluorescéine, ester N-succinimidyle (CFSE) (21888, SCT110) est un choix courant pour mesurer le nombre de divisions cellulaires subies par une population. Une fois à l’intérieur de la cellule, le CFSE est clivé par des estérases intracellulaires pour former le composé fluorescent, et le groupe ester succinimidyle réagit de manière covalente avec les amines primaires des protéines intracellulaires. À chaque division, l’intensité de fluorescence de chaque cellule fille est réduite de moitié, ce qui permet de déterminer facilement le nombre de divisions cellulaires par cytométrie en flux.
Métabolisme du MTT en sel de formazan par des cellules viables, tel qu'illustré dans une plaque à 96 puits
Nos outils et solutions complets destinés à mesurer la viabilité et la prolifération cellulaires s'appuient sur diverses méthodes et comprennent notamment :
- Tests de prolifération par synthèse d'ADN
- Tests de prolifération métaboliques
- Tests de viabilité cellulaire par luminescence
- Tests de prolifération par colorant fluorescent
- Triple coloration « cellules vivantes/mortes/totales » pour les cultures 3D
- Comptage de viabilité par exclusion au bleu de Trypan
Tests de cytotoxicité
Les tests mesurant l'activité métabolique permettent d'analyser la prolifération, la viabilité et la cytotoxicité. La réduction des sels de tétrazolium, tels que le MTT et le XTT, en composés formazanes colorés, ou la bioréduction de la résazurine (R7017, TOX8), ne se produit que dans les cellules métaboliquement actives. Les cellules en phase de prolifération active augmentent leur activité métabolique, tandis que les cellules en détresse, telles que celles exposées à des toxines, présentent une activité réduite.
Tests d’apoptose
La mort cellulaire est nécessaire à de nombreuses fonctions physiologiques normales, tant au cours du développement que de l’homéostasie. La capacité des cellules tumorales à échapper à la mort cellulaire programmée, également appelée apoptose, est une caractéristique distinctive de la plupart des types de cancer. Une grande variété de protéines cellulaires, notamment les récepteurs de surface, les adaptateurs, les protéases et les composants mitochondriaux, régulent un équilibre subtil entre la survie cellulaire et la mort par apoptose. Un choix judicieux de tests peut aider à analyser non seulement les effets des conditions de culture cellulaire et des traitements sur la santé cellulaire, mais aussi les mécanismes par lesquels ils influencent cette santé. Nous proposons une gamme complète de produits de test pour la détection de l’apoptose aux stades précoce, intermédiaire et avancé.
Détection et élimination de la contamination cellulaire
Le maintien de cultures cellulaires exemptes de contamination est fondamental pour la recherche cellulaire. Parmi les problèmes les plus courants en culture cellulaire figure la contamination par les mycoplasmes, un genre de bactéries dont la morphologie se caractérise par une taille inférieure au micron et l’absence de paroi cellulaire, ce qui rend ces bactéries difficiles, voire impossibles à détecter au microscope et résistantes à de nombreux antibiotiques. Bien que les mycoplasmes ne provoquent généralement pas la mort cellulaire, ils sont responsables de divers effets sur les cellules en culture, notamment une dérégulation du métabolisme, une prolifération réduite et des aberrations chromosomiques. En résumé, la contamination par les mycoplasmes compromet la validité des lignées cellulaires affectées pour fournir des données pertinentes à la recherche en sciences de la vie.
Nos outils de détection et d'élimination des mycoplasmes comprennent :
- le kit de détection par PCR LookOut® Mycoplasma ainsi que d’autres kits de PCR et de qPCR permettant une détection fiable et sensible des mycoplasmes dans les cultures cellulaires
- le bouillon au tryptose phosphate et d'autres réactifs pour la détection par culture de mycoplasmes
- Des colorants d'ADN pour la détection des mycoplasmes par la méthode de coloration fluorescente de l'ADN
- Le spray LookOut® Mycoplasma Erase et les réactifs destinés à la décontamination des mycoplasmes
Ressources connexes
- Essais de viabilité cellulaire et de prolifération
Tests cellulaires pour la prolifération cellulaire (BrdU, MTT, WST1), la viabilité cellulaire et les expériences de cytotoxicité pour des applications dans la recherche sur le cancer, les neurosciences et les cellules souches.
- Apoptosis Assays
Cellular apoptosis assays to detect programmed cell death using Annexin V, Caspase and TUNEL DNA fragmentation assays.
- Mycoplasma Detection, Prevention, and Elimination in Cell Culture
Detect mycoplasma contamination in cell culture through the PCR, DNA stain, or culture tests. Discover mycoplasma prevention, elimination, and detection kits.
- Angiogenesis Assays
Cell based angiogenesis assays to analyze new blood vessel formation for applications of cancer research, tissue regeneration and vascular biology.
- Autophagy Assays
Cell based autophagy assays including live cell LC3 GFP/RFP lentiviral biosensors, kits for autophagy detection and autophagy activators and inhibitors.
- Protocole de test de viabilité et de prolifération cellulaires au MTT
Protocole du test au MTT pour la mesure de la viabilité, de la prolifération et de la toxicité cellulaires. Instructions de préparation du réactif au MTT et exemples d'applications.
- Apoptosis Assays
Cellular apoptosis assays to detect programmed cell death using Annexin V, Caspase and TUNEL DNA fragmentation assays.
- Essais de viabilité cellulaire et de prolifération
Tests cellulaires pour la prolifération cellulaire (BrdU, MTT, WST1), la viabilité cellulaire et les expériences de cytotoxicité pour des applications dans la recherche sur le cancer, les neurosciences et les cellules souches.