General description
L'identification de l'épitope cible est un point important pour la caractérisation des anticorps monoclonaux. Les étiquettes épitope sont de courtes séquences linéaires reconnues par les anticorps, qui permettent aux anticorps de détecter les protéines de fusion portant une étiquette. Au fil des ans, un vaste choix d'anticorps anti-étiquette a été développé, chacun présentant ses propres avantages et inconvénients. Les étiquettes épitope peuvent subir dans les cellules des modifications post-traductionnelles comme une phosphorylation et une glycosylation, et entraînent une hausse de la masse moléculaire de la protéine de fusion, qui peut modifier sa mobilité dans les gels. Les étiquettes épitope contenant un petit nombre d'acides aminés sont intéressantes dans le sens où elles ne provoquent que des effets indésirables minimes sur la structure et la fonction de la protéine cible fusionnée. Une étiquette Myc peut être employée dans de nombreux immuno-essais différents et est utile lorsqu'il n'existe aucun anticorps dirigé contre la protéine étudiée. Ajouter une étiquette Myc permet de détecter ces protéines avec un anticorps dirigé contre l'épitope Myc. Le clone 4A6 est un anticorps qui reconnaît la séquence de 10 acides aminés EQKLISEEDL (Glu-Gln-Lys-Leu-Iso-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu) correspondant à la région C-terminale de la protéine c-Myc humaine (UniProt : P01106). Contrairement à d'autres clones dont les performances peuvent être affectées lorsque la séquence de l'étiquette Myc est suivie de plus petits acides aminés neutres, le clone 4A6 assure une détection bien plus fiable des protéines avec étiquette Myc, indépendamment des éventuelles modifications apportées aux séquences d'acides aminésenvironnantes. (référence : Schuchner, S., et al. (2020). Sci. Signal. 13(616); eaax9730; Charest-Morin, X., et al. (2013). Front. Pharmacol. 4: 122).
Poids moléculaire prédit pour la protéine Myc humaine : 49 kDa
Immunogen
Peptide correspondant aux acides aminés 410-420 (MEQKLISEEDL) de la protéine Myc humaine
Application
Domaine de recherche
Étiquettes épitope et usage général
L'anticorps anti-étiquette Myc, clone 4A6, est un anticorps monoclonal de souris dont l'utilisation a été validée en ChIP, IC, IF, IP et WB pour la détection de l'étiquette Myc, et dépourvue de la très grande sensibilité au contexte du clone 9E10. Cet anticorps est cité dans plus de 480 publications.
Sous-domaine de recherche
Étiquettes épitope
Biochem/physiol Actions
Reconnaît les protéines recombinantes contenant l'étiquette épitope Myc (EQKLISEEDL) dans divers contextes de séquence ; reconnaît aussi la protéine Myc humaine.
Physical form
Format : Produit purifié
Immunoglobuline purifiée sur protéine A dans de la Tris-glycine 0,1 M, du NaCl 0,15 M et 0,05 % d'azoture de sodium, à pH 7,4.
Purification sur protéine G
Preparation Note
Conserver entre 2 et 8 °C pendant 1 an maximum à partir de la date d'expédition.
Analysis Note
Contrôle
Contrôle positif pour la protéine Myc humaine : Expression très répandue, notamment dans les lysats de cellules A431, les lysats de cellules de cancer de l'ovaire, ou les tissus de carcinome du sein. Protéine de fusion avec étiquette Myc exprimée dans les cellules.
Produit évalué en routine par immunoblot sur une protéine recombinante avec étiquette Myc dans des contextes de séquence mal reconnus par l'anticorps anti-étiquette Myc, clone 9E10 (référence CBL430).
Other Notes
Concentration : La concentration de chaque lot figure sur le certificat d'analyse.
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