Anticorps anti-TrkA

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Produit évalué en routine par western blotting sur des lysats obtenus dans du tampon RIPA de cellules A431 humaines, et sur des lysats de cellules 3T3 de souris ou de cellules PC-12 de rat.

Analyse par western blotting :
Une concentration de 0,5 à 2,0 μg/ml de cet anticorps a permis de détecter TrkA dans des lysats obtenus dans du tampon RIPA de cellules A431 humaines ; un précédent lot a permis de détecter TrkA dans des lysats de cellules 3T3 de souris et de cellules PC-12 de rat.

Témoin
Témoin (antigène) positif : Référence 12-301, lysat de cellules A431 non stimulées. Ajouter 2,5 µl de 2-mercaptoéthanol pour 100 µl de lysat et réduire la préparation en la portant à ébullition pendant 5 minutes. Appliquer 20 µg de lysat réduit par piste pour une analyse sur minigel.

Domaine de recherche
Neurosciences

Immunoprécipitation :
Une quantité de 4 μg d'un précédent lot a permis d'immunoprécipiter TrkA à partir de 500 μg de lysat de cellules PC-12 obtenu dans du tampon RIPA.

Immunocytochimie :
Une concentration de 10 μg/ml d'un précédent lot de cet anticorps a donné un immunomarquage positif pour TrkA dans des cellules PC-12 fixées avec 4 % de formaldéhyde.

L'anticorps anti-TrkA permet de détecter le taux de protéine TrkA, et son utilisation a été publiée et validée en IC, IP et WB.

Sous-domaine de recherche
Neurotransmetteurs et récepteurs

Maladies neurodégénératives

La réactivité vis-à-vis d'autres espèces n'a pas été confirmée.

Reconnait la protéine TrkA, d′un poids moléculaire de 140 kDa. Ne donne lieu à aucune réaction croisée avec TrkB ou TrkC.

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140 kDa

La protéine TrkA, d′un poids moléculaire apparent de 140 kDa, est un facteur de croissance nerveuse (NGF) de grande affinité. La famille des proto-oncogènes Trk compte quatre membres, TrkA, TrkB, TrkC et TrkE, qui sont exprimés à des degrés variables au sein du système nerveux central et du système nerveux périphérique. TrkA se lie au facteur de croissance nerveuse (NGF) et s′autophosphoryle au niveau de résidus tyrosine (Tyr490, Tyr674, Tyr675, Tyr751 et Tyr785) pour activer de multiples protéines effectrices en aval. La phosphorylation de Tyr490 est nécessaire à l′association de Shc et à l′activation de la cascade de signalisation Ras-MAP kinase qui s′ensuit, entraînant l′activation de la transcription des gènes Elk-1-dépendante et la croissance des neurites. La phosphorylation de Tyr674 et Tyr675 se situe dans le domaine catalytique de la tyrosine kinase TrkA et reflète l′activité des kinases Trk. En outre, la phosphorylation de Tyr751 est nécessaire à l′association de la PI3-kinase et à l′activation de la cascade de signalisation Akt.

Lapins immunisés avec une protéine exprimée par voie bactérienne purifiée correspondant au domaine extracellulaire complet du récepteur TrkA de rat.

Concentration : Pour connaître la concentration spécifique du lot, veuillez vous référer au certificat d′analyse.

Remplace le(s) produit(s) suivant(s) : CBL770

Format : purifié

IgG de lapin purifiée dans un tampon contenant du tampon phosphate 0,02 M à pH 7,6, du NaCl 0,25 M et 0,1 % d'azoture de sodium. Produit congelé à -20 °C.

Produit purifié sur protéine A.

Stable à -20 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.
Recommandations relatives à la manipulation du produit : Dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Répartir en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et conserver ces derniers à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit. Remarque : En raison de la variabilité des températures à l'intérieur du congélateur en dessous de -20 °C, les solutions glycérolées risquent de congeler pendant le stockage.