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Merck

MAB3560

Anticorps anti-8-oxoguanine, clone 483.15

ascites fluid, clone 483.15, Chemicon®

Synonyme(s) :

8-oxoG

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A propos de cet article

UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.41
eCl@ss:
32160702
Clone:
483.15, monoclonal
Species reactivity:
monkey, human, primate
Application:
ChIP, ELISA, ICC
Citations:
57
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biological source

mouse

antibody form

ascites fluid

antibody product type

primary antibodies

clone

483.15, monoclonal

species reactivity

monkey, human, primate

species reactivity (predicted by homology)

mouse, rat

manufacturer/tradename

Chemicon®

technique(s)

ChIP: suitable, ELISA: suitable, immunocytochemistry: suitable

isotype

IgM

shipped in

dry ice

target post-translational modification

unmodified

Quality Level

Gene Information

human ... OGG1(4968)

General description

La 8-oxoguanine est un produit mutagène résultant de l′endommagement oxydatif de la guanine. La base endommagée par voie oxydative qu′est la 8-oxoguanine est générée dans l′ADN de tous les organismes vivants par la présence d′espèces réactives de l′oxygène dans les cellules. L′endommagement de l′ADN menace la viabilité de l′information génétique stockée dans chaque molécule d′ADN ; il existe toutefois dans les cellules des enzymes qui protègent de l′effet mutagène de cette lésion. La 8-oxoguanine est l′une des lésions de l′ADN dues au stress oxydatif les plus abondantes et les mieux caractérisées. On estime qu′environ 180 guanines par cellule de mammifère et par jour sont oxydées en 8-oxoG. La 8-oxoG est une lésion apparentée à une erreur de codage qui peut provoquer des mutations du type transversion de G/C en T/A ou de T/A en G/C. Cette lésion s′accumule dans l′ADN avec l′âge. Elle a été vaguement reliée à plusieurs cancers et maladies, tels que la maladie d′Alzheimer et la maladie de Parkinson.

Immunogen

8-Oxoguanine adsorbée sur de l′alumine.

Application

Immunocytochimie :
Sur des cellules HeLa et Cos7 fixées au paraformaldéhyde. La 8-oxoguanine a été localisée dans le noyau des cellules privées de nutriments.

Test ELISA :
Des cellules cultivées sur des lames ont subi deux extractions successives par une solution refroidie de NaCl 560 nM / Triton X-100 à 0,1 % (v/v) / SDS à 0,02 % (p/v) / tampon phosphate 10 mM à pH 7,4 puis fixées à température ambiante pendant 5-20 minutes avec du PFA à 4 % préparé de frais. {Conlon, KA et al (2000) J. Histotechnology 23(1):37-44}. Une coloration typique montre que les noyaux des cellules extraites présentent une périphérie et des zones bien définies de chromatine condensée. Le marquage obtenu avec le clone 483.15 a montré une coloration fluorescente spécifique mais pale au niveau des noyaux de cellules incubées dans du DMEM supplémenté. Dans des cellules incubées dans une solution saline de composition définie et exempte de nutriments (NFDSS) {chlorure de calcium 1,8 mM, NaCl 110 mM, bicarbonate de sodium 44 mM, pH 7,5}, le clone a généré une forte coloration fluorescente nucléaire à l′aspect ponctué et uniformément distribué. La coloration fluorescente disparaît jusqu′au niveau du bruit de fond dans les cellules incubées dans un milieu contenant des nutriments, même après un traitement initial au NFDSS {Conlon et al}.

Un précédent lot de cet anticorps a été utilisé dans un test ELISA.

Il revient à l'utilisateur final de déterminer les dilutions de travail optimales.
L'anticorps anti-8-oxoguanine, clone 483.15, permet de détecter les niveaux de 8-oxoguanine ; son utilisation a été publiée et validée en ElISA et IC.

Biochem/physiol Actions

8-oxoguanine. Dans un test ELISA par compétition, l′anticorps monoclonal n′a montré aucune réactivité pour les composés dGMP, dAMP, dCMP ou TMP aux concentrations micromolaires. Une compétition n′a été observée que lorsque les concentrations ont été augmentées jusqu′à la plage millimolaire.

Physical form

IgM monoclonale de souris non purifiée en solution dans un tampon sans conservateur.

Preparation Note

Stable pendant 6 mois à -20 ºC en aliquotes non diluées à partir de la date de réception.
Recommandations relatives à la manipulation du produit : Dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Répartir en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et conserver ces derniers à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgM et nuire aux performances du produit.

Analysis Note

Produit évalué en routine par immunocytochimie sur des cellules NIH/3T3.

Immunocytochimie :
Analyse confocale par fluorescence de cellules NIH/3T3 à l'aide de l'anticorps monoclonal de souris anti-8-oxoguanine.
Témoin
Cellules HeLa ou Cos7 en manque de nutriments

Other Notes

Concentration : Pour connaître la concentration spécifique du lot, veuillez vous référer au certificat d′analyse.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Classe de stockage

10 - Combustible liquids

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Not applicable

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Numéro d'article de commerce international

RéférenceGTIN
MAB356004053252503078

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