Anti-Neurofilament H (200 kDa) Antibody

Les neurofilaments sont un type de filament de taille intermédiaire et un élément essentiel du cytosquelette soutenant le cytoplasme des axones. Ce sont les composés fibrillaires les plus abondants des axones, 3 à 10 fois plus fréquents en moyenne que les microtubules axonaux. Les neurofilaments (10 nm de diamètre) sont construits à partir de trois protofibrilles entrelacées, elles-mêmes composées de deux complexes de protofilaments tétramériques de protéines monomères. Ce triplet de protéines du neurofilament (68/70 kDa, 160 kDa et 200 kDa) est présent dans le système nerveux central et périphérique, et est généralement spécifique des neurones. La chaîne légère de 68/70 kDa (protéine NF-L) peut s'autoassembler en une structure filamenteuse, tandis que la chaîne moyenne de 160 kDa (protéine NF-M) et la chaîne lourde de 200 kDa (protéine NF-H) ont besoin de la présence de la chaîne légère de 68/70 kDa pour s'assembler. Les névromes, les ganglioneuromes, les gangliogliomes, les ganglioneuroblastomes et les neuroblastomes présentent une coloration positive pour les neurofilaments. Bien qu'ils se cantonnent généralement aux neurones, des neurofilaments ont été détectés dans des paragangliomes et des phéochromocytomes surrénaliens et extra-surrénaliens. Les tumeurs carcinoïdes, les carcinomes neuroendocrines cutanés et les carcinomes bronchopulmonaires à petites cellules expriment également des neurofilaments. Pour plus d'informations sur les neurofilaments, voir le tableau en ligne "Nervous System Cell Type Specific Marker" dans la section Support technique.

Purified neurofilament polypeptides (Debus et al., 1983).

Detect Neurofilament 200 kDa using this Anti-Neurofilament 200 kDa Antibody, clone NE14 validated for use in IH.

Domaine de recherche
Neurosciences

Immunohistochimie : μ

Il revient à l'utilisateur final de déterminer les dilutions de travail optimales.



Les coupes congelées sont séchées à l'air et fixées avec de l'acétone entre -15 °C et -25 °C pendant 10 minutes. L'excédent d'acétone est évaporé entre 15 et 25 °C. Material fixed in alcohol and embedded in paraffin can also be used, see (Altmannsberger et al., 1982). The antibody appears to react with tissue fixed in formaldehyde for a short time (10 min) (Debus et al., 1983). Other fixation conditions must be first tested by the investigator.

° Le surplus de sérum de veau fœtal est éliminé par décantation avant application de la solution d'anticorps. Les préparations de cellules uniques ou de frottis cellulaires obtenues par cytocentrifugation sont également fixées dans de l'acétone. Ces préparations ne doivent cependant pas être séchées à l'air. Au lieu de cela, le surplus d'acétone est éliminé par un bref lavage dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS).

La suite du traitement est alors la suivante :

μ°



μ°

Laver la lame comme indiqué ci-dessus.

The preparation must not be allowed to dry out during any of the steps.

If using an indirect immunofluorescence technique, the preparation should be overlaid with a suitable embedding medium (e.g. Moviol, Hoechst) and examined under the fluorescence microscope. ° A negative control (e.g. only the secondary antibody) should remain unchanged in color during this incubation period. Subsequently, the substrate is washed off with PBS and the preparation is stained, if desired, with hemalum stain for about 1 min. The hemalum solution is washed off with PBS, the preparation is embedded and examined.

Solutions de substrat :

Aminoethyl-carbazole:

μ Préparer une nouvelle solution chaque jour.

Diaminobenzidine:

′μ Préparer une nouvelle solution chaque jour.

Sous-domaine de recherche
Métabolisme des neurones et neurofilaments

Marqueurs neuronaux et gliaux

The antibody reacts with neurofilament 200 kD.

Format : Produit purifié

Immunoglobuline purifiée. En solution. Buffer = 0.02M Phosphate buffer, 0.25M NaCl containing 0.1% sodium azide.

°

Concentration : pour connaître la concentration spécifique du lot, voir le certificat d'analyse.

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