Anticorps anti-puromycine, clone 4G11

La puromycine est un antibiotique aminonucléosidique dérivé de la bactérie Streptomyces alboniger. Elle agit comme un inhibiteur de la synthèse des protéines qui bloque la traduction en interrompant prématurément la chaîne protéique dans le ribosome. Les anticorps monoclonaux anti-puromycine peuvent être utilisés avec des protocoles d'immunochimie standard pour examiner directement la traduction : c'est ce que l'on appelle la méthode SUnSET ("surface sensing of translation"). Son utilité dans les analyses de la traduction des protéines provient du fait qu'une partie de la molécule ressemble à l'extrémité 3′ de l'aminoacyl-ARNt. La puromycine induit la fragmentation de l'ADN dans les thymocytes et les cellules leucémiques humaines HL-60.

La puromycine est incorporée dans les protéines nouvellement synthétisées. En présence de puromycine uniquement, cet anticorps détecte les protéines nouvellement synthétisées de multiples poids moléculaires qui ont incorporé la puromycine. Cependant, un signal plus faible est obtenu lorsque le cycloheximide est également présent, car il inhibe la biosynthèse des protéines dans les organismes eucaryotes.

Analyse par immunocytochimie : une dilution au 1/2 000e d'un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine dans les lysats de cellules HeLa traitées à la puromycine. Cependant, un signal plus faible est obtenu lorsque le cycloheximide est ajouté, car il inhibe la biosynthèse des protéines dans les organismes eucaryotes.

Analyse par western blotting : un lot représentatif provenant d'un laboratoire indépendant a permis de détecter les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par WB (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277).

Analyse par Immunofluorescence : un lot représentatif provenant d'un laboratoire indépendant a permis de détecter les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par IF (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277).

Analyse par cytométrie en flux (FACS) : un lot représentatif provenant d'un laboratoire indépendant a permis de détecter les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par FACS (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

Alexa Fluor^™ est une marque déposée de Life Technologies.

L'anticorps anti-puromycine, clone 4G11, détecte la puromycine incorporée dans les protéines. Les anticorps monoclonaux anti-puromycine peuvent également être utilisés avec des méthodes d'immunochimie standard.

Réaction vérifiée avec un échantillon test humain préalablement incubé avec de la puromycine. Réaction anticipée avec toutes les espèces lorsque l'échantillon test est incubé avec de la puromycine.

Format : Produit purifié

Produit évalué par western blotting sur des lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide ou à la puromycine uniquement.

Analyse par western blotting : une dilution au 1/12 500e de cet anticorps a permis de détecter les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine dans les lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine uniquement. Cet anticorps a également détecté de faibles quantités de puromycine dans les cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide.

ALEXA FLUOR is a trademark of Life Technologies