Anticorps anti-podocalyxine (GP135), clone 3F2:D8

La podocalyxine (UniProt : Q52S86 ; également connue sous les noms de Gp135, protéine de type podocalyxine 1, PC, protéine de type PC 1, PCLP-1, et cPCLP1) est codée par le gène PODXL (aussi dénommé PCLP ou PCLP1) (identifiant du gène : 482252) chez les espèces canines. La protéine GP135 est une protéine membranaire apicale exprimée dans les cellules épithéliales MDCK polarisées. Un certain niveau d'expression est également observé dans le cœur, le poumon, le cortex rénal et la moelle rénale, ainsi que le muscle. Cette protéine possède un domaine extracellulaire (a.a. 23-474), un domaine hélicoïdal (a.a. 475-495) et un domaine cytoplasmique (a.a. 496-571). Il a été montré que son domaine cytoplasmique est essentiel au ciblage de la membrane apicale et à la tubulogenèse rénale. La protéine GP135 est impliquée dans la régulation de la morphologie cellulaire et de l'adhérence, ainsi que dans la progression du cancer. Elle agit comme une molécule anti-adhésive qui maintient une voie de filtration ouverte entre les pédicelles voisins du podocyte par répulsion de charges. Elle peut aussi agir comme une molécule pro-adhésive, en renforçant l'adhérence des cellules aux ligands immobilisés et en augmentant ainsi la vitesse de migration et les contacts cellule-cellule de manière intégrine-dépendante. La protéine GP135 serait également impliquée dans la formation d'un sous-domaine apical de la membrane plasmique pour mettre en place la polarisation épithéliale initiale et la formation des lumières apicales durant la tubulogenèse rénale. Elle se situe au même endroit que les filaments d'actine, l'ezrine et SLC9A3R1, en points localisés au niveau de la surface cellulaire apicale où se forment les microvillosités. La protéine GP135 subit une N-glycosylation et une O-glycosylation.

Poids réel (observé) : 180 kDa, poids théorique (calculé) : 59,91 kDa. Des bandes non caractérisées peuvent être observées avec certains lysats.

Cellules de rein de chien Madin-Darby (MDCK) intactes.

Épitope : domaine extracellulaire

Analyse par western blotting : Une dilution au 1/500e d'un lot représentatif a permis de détecter la podocalyxine (GP135) dans du lysat de cellules MDCK traitées au iodoacétamide.

Analyse par dosage radio-immunologique : Un lot représentatif a permis de détecter la podocalyxine (GP135) dans des applications de dosage radio-immunologique (Ojakian, G.K., et. al. (1988). J Cell Biol. 107(6 Pt 1):2377-87).

Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a permis de détecter la podocalyxine (GP135) dans des applications d'immunofluorescence (Ojakian, G.K., et. al. (1988). J Cell Biol. 107(6 Pt 1):2377-87; Cheng, H.Y., et. al. (2005). J Am Soc Nephrol. 16(6):1612-22).

Analyse par immunocytochimie : Une dilution au 1/100e d'un lot représentatif a permis de détecter la podocalyxine (GP135) dans des cellules MDCK (avec la permission du Dr Tzuu-Shuh Jou, M.D., Ph.D., Institut universitaire de médecine clinique, Faculté de médecine, Université nationale de Taïwan).

Analyse par immunocytochimie : Un lot représentatif a permis de détecter la podocalyxine (GP135) dans des applications d'immunocytochimie (Ojakian, G.K., et. al. (1988). J Cell Biol. 107(6 Pt 1):2377-87; Cheng, H.Y., et. al. (2005). J Am Soc Nephrol. 16(6):1612-22).

Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter la podocalyxine (GP135) dans des applications de western blotting (Ojakian, G.K., et. al. (1988). J Cell Biol. 107(6 Pt 1):2377-87; Cheng, H.Y., et. al. (2005). J Am Soc Nephrol. 16(6):1612-22).

Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif a permis de détecter la podocalyxine (GP135) dans des applications d'immunoprécipitation (Ojakian, G.K., et. al. (1988). J Cell Biol. 107(6 Pt 1):2377-87; Cheng, H.Y., et. al. (2005). J Am Soc Nephrol. 16(6):1612-22).

Domaine de recherche
Signalisation

L'anticorps anti-podocalyxine (GP135), clone 3F2:D8 (réf. MABS1327), est un anticorps monoclonal de souris qui détecte la podocalyxine (GP135) et qui a été testé en immunocytochimie, immunofluorescence, immunoprécipitation, dosage radio-immunologique et western blotting.

Le clone 3F2:D8 détecte la podocalyxine dans les cellules MDCK (cellules de rein de chien Madin-Darby).

Produit purifié sur protéine G

Format : purifié

IgG1 monoclonale de souris purifiée, dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4), du NaCl 150 mM et 0,05 % d'azoture de sodium.

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Produit évalué par western blotting sur du lysat de cellules MDCK.

Analyse par western blotting : Une dilution au 1/1000e de cet anticorps a permis de détecter la podocalyxine (GP135) dans du lysat de cellules MDCK.

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

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