Anticorps anti-N-acétylglucosamine liée par des liaisons O, clone RL2

La modification post-traductionnelle des protéines par la N-acétylglucosamine liée en β (β-GlcNAc) via les fractions hydroxyle des résidus sérine ou thréonine est appelée β-GlcNAc à liaison en O ou plus simplement O-GlcNAc. La O-GlcNAc est l'une des modifications post-traductionnelles les plus abondantes au sein des compartiments nucléocytoplasmiques de l'ensemble des animaux et des plantes. Contrairement aux autres types de glycosylation des protéines, la O-GlcNAc se produit exclusivement dans les compartiments nucléaires et cytoplasmiques et ne subit généralement pas d'autre modification pour former des structures plus longues. En outre, la O-GlcNAcylation est un processus réversible et extrêmement dynamique. La O-GlcNAc transférase (OGT) fixe la O-GlcNAc aux protéines au niveau de résidus sérine et thréonine spécifiques, tandis que la O-GlcNAcase catalyse le retrait / l'hydrolyse de la O-GlcNAc à partir des protéines. En fait, l'interaction dynamique entre la O-GlcNAcylation et la phosphorylation des résidus serine/thréonine joue un rôle important dans la régulation de la signalisation cellulaire. Tau et l'ARN polymérase II (Pol II) sont deux protéines bien connues qui sont modifiées par O-GlcNAcylation. Dans les cerveaux humains atteints de maladie d'Alzheimer, la protéine tau est fortement phosphorylée et moins O-GlcNAcylée. De manière similaire, la O-GlcNAc est retirée et remplacée par un O-phosphate dans le domaine CTD de la Pol II lorsque la phase d'élongation de la transcription est initiée.

Variable en fonction de la taille de la (des) protéine(s) O-GlcNAcylées.

Fraction de complexe pore-lamine purifiée issue d'enveloppes nucléaires de foie de rat correspondant à la N-acétylglucosamine à liaison O de rat.

Analyse par immunocytochimie : une concentration de 4,0 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter la N-acétylglucosamine à liaison O dans des cellules HeLa.
Analyse en immunocytochimie : un lot représentatif a permis d'immunomarquer les enveloppes nucléaires, mais pas l'intérieur du noyau, de cellules HeLa perméabilisées à la digitonine. Le clone RL2 a permis de marquer l'intérieur nucléaire uniquement sur des cellules HeLa perméabilisées au Triton X-100 sans enveloppe nucléaire intacte (Adam, S.A., et al. (1990). J. Cell Biol. 111(3):807-816).
Analyse de liaison par affinité : un lot représentatif a été radiomarqué avec 125I et étudié pour ses caractéristiques de liaison avec des enveloppes nucléaires isolées de foie de rat (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143-1156).
Microscopie électronique : un lot représentatif a permis de localiser une immunoréactivité à la O-GlcNAc dans des enveloppes nucléaires isolées de foie de rat (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143-1156).
Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter les protéines O-GlcNAcylées dans des préparations d'enveloppes nucléaires de foie de rat (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143-1156 ; Holt, G.D., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1157-1164).
Analyse par immunoprécipitation : un lot représentatif a permis d'immunoprécipiter les protéines O-GlcNAcylées à partir de préparations d'enveloppes nucléaires de foie de rat en solution. Le prétraitement des préparations d'enveloppes nucléaires à la galactosyltransférase a empêché l'immunoprécipitation des glycoprotéines par le clone RL2 (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143-1156 ; Holt, G.D., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1157-1164).

L'anticorps anti-N-acétylglucosamine à liaison O, clone RL2 est un anticorps dirigé contre la N-acétylglucosamine à liaison O. Il est destiné à une utilisation en western blotting, en immunocytochimie, en analyse de liaison par affinité, en microscopie électronique et en immunoprécipitation.

La structure ciblée n'est pas spécifique à l'espèce.

Reconnaît spécifiquement les espèces de N-acétylglucosamine à liaison O (O-GlcNAc) sur les protéines et peptides O-GlcNAcylées. Peu de réactivité avec la GIcNAc libre et aucune réactivité avec la GalNac. Le traitement à la galactosyltransférase des protéines O-GlcNAcylées entraîne la galactosylation de la O-GlcNAc par liaison β1-4 et une perte complète de liaison par le clone RL2 (Holt, G.D., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1157-1164).

Format : Produit purifié

Produit évalué par western blotting sur des lysats de cellules HeLa.

Analyse par western blotting : une concentration de 1,0 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter la N-acétylglucosamine à liaison O dans 10 µg de lysat de cellules HeLa.

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.